原始研究的文章

前面。神经。,13June 2023
秒。实验治疗学
卷14 - 2023 | https://doi.org/10.3389/fneur.2023.1168012

衰减temperature-controllable温暖的针灸针固定压力诱发高血压的大鼠和外围神经机制

Se Kyun爆炸 ^1、2

Suchan常 ³

苏研搜索引擎优化 ¹

Suk-Yun康¹

Seong金曹¹

Kwang-Ho崔¹

兴女裙⁴

昭熙年轻的金 ⁴ ^*

Yeonhee Ryu ^1、2 ^*

¹韩医学部门的科学研究部门,东方医学研究所、韩国大田市
²韩国融合医学、科技大学、韩国大田市
³生理、医学院的韩国大邱Haany大学、韩国大邱
⁴延世大学医学院生理学系,首尔,韩国

作品简介:我们和其他人表明电刺激内关穴位在手腕缓解高血压通过刺激传入感觉神经纤维和激活中枢内源性阿片系统。温暖针针灸诊所一直被用来治疗各种疾病。

方法:这里,我们开发了一个temperature-controllable温暖针针灸仪器(WAI)和外围调查机制的影响热针针刺内关在高血压大鼠模型的固定压力引起的高血压。

结果:刺激与我们新开发的围和温暖传统针灸针减毒高血压发展。这种效应是由辣椒素复制(TRPV1受体激动剂)注入刺激内关或围在48°C。相比之下,内关预处理与TRPV1拮抗剂capsazepine阻塞围的降压效果刺激内关。围在刺激内关的背根神经节double-stained TRPV1和CGRP怎样。qx - 314和辣椒素神经周的注入化学消融的正中神经小传入神经纤维(c fibers)预防围的降压效果刺激内关。此外,内关预处理与RTX切除围的降压效果的刺激。

结论:这些发现表明,温暖针针刺内关激活C-fiber正中神经和外围TRPV1受体减弱发展固定压力诱导高血压大鼠。

1。介绍

针灸是一种传统的药物已经用于治疗各种疾病了数千年。根据不同的疾病,针灸刺激特定的点在皮肤上,这被称为穴位或穴位(1,2)。各种研究正在进行识别结构上看不见的穴位。李等人报道,许多穴位位于一个地方感觉神经末梢的高密度(3)。金等人认为一些穴位是相同的神经源性炎症皮肤上的斑点,这是由躯体传入的激活在内脏器官的异常条件(4)。针灸治疗,有刺激穴位的各种方法,包括物理刺激的针插入,热刺激使用艾和温暖的针灸针,电刺激,激光刺激,磁刺激和超声波刺激(5,6)。在针灸医学的常用方法之一,基于以前的出版物(7,8),热针针灸可以被定义为针灸和热疗(与艾等热源、激光或加热设备)。针的温度加热后发现大的差异,从30到66°C。在传统针灸理论,温暖的针灸针的使用是描述传输艾热深入人体穴位,促进气血的流通和激活经络系统(9)。温暖针针灸被报道是有效治疗各种疾病和疾病,如风湿性疾病(10)、肌肉骨骼疾病(11,12),和失眠(13),尽管底层机制仍有待确定。

几项研究已经证明了刺激Nei-guan(内关),手腕上有一个穴位,是最有效的降低血压和改善心血管疾病(14)。我们的临床试验表明,内关电刺激诱发血压下降通过激活c fibers正中神经(15)。此外,动物研究表明,电刺激内关引起的内源性阿片肽的释放延髓腹外侧的髓质(rVLM)和减少心脏传入神经元的兴奋性反应产生降压效应在老鼠模型中固定的压力诱导高血压(IMH) (16)。热刺激穴位的温暖针针灸已经用于治疗心血管疾病(17,18),但外围机制温暖针针灸对心血管疾病的影响还没有被确认。

人们普遍认为针灸信号是由几个外围感官受体检测机械刺激,温度和痛觉过敏(19)。如果热刺激穴位,热刺激可以转换为电信号通过瞬时受体电位香草酸(TRPV)通道(20.),这是众所周知的温度传感器(21)。根据他们的结构和功能,TRPV渠道分为以下四组:TRPV1, TRPV2, TRPV3 TRPV4。TRPV频道初级感觉神经元主要表达在nonmyelinated c fibers,有髓a纤维和DRG神经元(22)。特别是,TRPV1的非选择性阳离子通道高钙渗透率能够与辣椒素,质子(pH值< 5.9),与有毒热(43-52°C) (23)。温暖的针灸针利用热量超过40°C, TRPV1可能与温暖的针灸针的影响密切相关。

探索周边机制的影响热针针灸在固定压力诱导高血压大鼠,我们使用新建设备(热针针灸仪器;WAI)克服固有的可变性热刺激的强度和持续时间通常在传统热针针灸。之后,我们测试了温暖的针灸针的降压效果,并探讨是否温暖针针灸的效果与TRPV1通道。

2。材料和方法

2.1。动物

男性Sprague-Dawley老鼠(体重320 ~ 350克,Samtako生物,乌山,韩国)被安置在恒定的温度和湿度(50 ~ 60%)(22±2°C)与自由获取食物和水在12 h / 12 h光/暗周期。机构批准的所有实验动物保健和使用委员会的东方医学研究所批准号码# 21 - 020(大田、韩国)。

2.2。化学物质

Capsazepine (20 nmol / 30μL 100%二甲亚砜(DMSO);30μL /位点,Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国),resiniferatoxin (RTX;250 ng / 30μL 95%乙醇;30μL /位点,Alomone实验室,耶路撒冷,以色列),qx - 314(在生理盐水溶解;50μL /位点,利多卡因N-ethyl溴化;Tocris、布里斯托尔、英国),辣椒素(溶解在10%乙醇和5%渐变80;50μL /位点,Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。Isolectin GS-IB4抗体,Alexa萤石488共轭(IB4 I21411,表达载体,腺岛,纽约,美国),人类降钙素相关基因肽抗体(CGRP怎样;ab47027 Abcam,剑桥,妈,美国),神经丝200抗体(NF200、N4142 Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国),TRPV1抗体(VR1, sc - 398417、Santacruz生物技术、Santacruz,美国),和PGP 9.5抗体(ab8189 Abcam,剑桥,英国)。

2.3。围和针灸治疗的发展

围是模仿传统温暖的针灸针。定量控制的温度插入针,围(图1一个)由一个加热单元、控制单元和电源。加热装置(图1 b),两个正温度系数(PTC)陶瓷加热器(12 x8x3 mm, LxWxT Gaoyi,中国)两边固定一个定制的铝杆,和一个绝缘橡胶垫在底部,防止皮肤由于燃烧热量。

图1

图1。温暖的针针灸仪器(WAI)。(一)控制单元。围包括温度控制器和一个加热单元。(B)加热单元。两个正温度系数(PTC)加热器固定铝杆,和一个橡胶垫在底部。加热元件的温度由控制单元的电压调整。(C)图表在针灸针的尖端温度测量在围手术期间。针灸针是通过加热装置放置在一个橡胶垫,和一根针温度探头放置0.3毫米以下的针。(D)温度送到针尖端围时设置为42°C (n= 10)或52°C (n= 10)。(E)提示在温暖的针针灸针温度(WA) (n= 10)。

针灸治疗,老鼠通过鼻锥和3%异氟烷麻醉。针灸针是双边插入内关穴位皮肤2毫米的深度。的稳定温度42°C, 48°C,或52°C,围设备放置在针灸针装置加热后至少10分钟在预设的温度。围刺激了10分钟,麻醉是停止,血压测量10分钟后停止麻醉。围的刺激是否导致形态组织损伤、组织后被带出52°C温暖针针灸或虚假的操作(针插入但没有加热)。组织在4%多聚甲醛和嵌入paraffin-blocks后缀,分段μm-thickness 5点,与苏木精和伊红染色())和亮场显微镜下检查。

对传统热针针灸(WA), 15毫米艾棒(Dongbang医药有限公司、韩国)放置在针灸针的处理(直径0.20毫米,长度为40毫米,Dongbang医疗有限公司,韩国),和针双边2毫米深插入内关。允许艾燃烧完全至少10分钟,而老鼠麻醉。

2.4。测量的温度传递到针围或佤邦

温度送到围针或佤邦通过使用定制的温度测量系统测量。针灸针(针直径0.10毫米,10毫米的长度,和处理10毫米的长度;Dongbang医药有限公司、韩国)插入橡胶垫2毫米的深度。热电偶探针(nj - 07013, WPI,萨拉索塔,佛罗里达州美国)附加到针的尖端,20分钟的温度测量用数字温度监控装置(BAT-12 Physitemp,新泽西,美国)。佤邦,艾棒(10毫米直径15毫米的高度;Dongbang医药有限公司、韩国)连接到轴的针灸针2厘米从小费。温度测量10分钟后点燃艾。数据分析使用Powerlab 4/30采集系统(Powerlab广告工具,Inc .,科罗拉多州,美国)。

2.5。药理TRPV1受体的封锁和小传入神经纤维

阻止周边TRPV1受体,capsazepine(10毫米;30μL /位点,南卡罗来纳州。)注入内关穴在手腕垂直深度3毫米从皮肤表面使用26-gauge汉密尔顿注射器(NV,雷诺美国)15分钟前围治疗。阻止TRPV1在小传入神经纤维(Aδ/ c fibers), RTX (250 ng / 30μL /位点,南卡罗来纳州)(24)注入内关穴位24 ~ 48小时之前围刺激,如前所述(25)。

2.6。正中神经药理c fibers的封锁

正中神经药理的封锁c fibers是如前所述执行(26)。qx - 314和辣椒素的混合物,选择性地阻断钠通道,抑制兴奋性痛觉受器(27),是正中神经神经周的注入。简而言之,在老鼠异氟烷麻醉,大约0.5厘米的肘部的皮肤内一侧切除正中神经暴露,和50μL qx - 314(1%)和辣椒素(0.5μg /μL)管理正中神经的神经周的空间。皮肤缝合后,ketoprofen(5毫克/公斤SC)是管理在手术部位附近。围的刺激进行1 h后注入。

2.7。测量血压和固定压力诱导高血压(IMH)

高血压是引起抑制大鼠使用锥形塑料袋(长度185 mm,内直径59毫米),(如前所述)(28),收缩压是衡量使用无创血压测量系统。动物被置于一个prewarmed商会27 ~ 30°C至少30分钟。编程电血压计(毒品就近,Inc .)、休斯顿、美国)是自动充气和放气,和尾巴袖口来自传感器的信号自动收集使用IITC装置(模型47、IITC Inc .,加利福尼亚,美国)。每个血压测量作为两个读数的平均每10分钟。有超过160毫米汞柱的收缩压的老鼠被定义为高血压(29日)。

2.8。免疫组织化学分析,背根神经节(drg)和皮肤

免疫组织化学分析drg和皮肤进行了如前所述(26,30.)。总之,30分钟后双边围刺激老鼠,C5-8的drg和手腕的皮肤内关穴位(5×5×5毫米)被移除后灌注与磷酸盐(PBS)和4%多聚甲醛。的DRG样本cryosectioned 10μm的厚度。μm 5点皮肤样本石蜡包埋和切片厚度。幻灯片是安装在poly-L-lysine-coated玻片(热科学、马、美国)。幻灯片孵化了鼠标anti-TRPV1抗体(1:50 0,圣克鲁斯生物技术),兔子anti-calcitonin相关基因肽(CGRP怎样,1:1000 Abcam) anti-lectin IB4 Alexa萤石488共轭FITC(1:50 0,表达载体),兔子anti-neurofilament 200 (NF200、1:1000 Sigma-Aldrich)和小鼠单克隆抗体PGP 9.5 (1:1000;Abcam,剑桥,英国;ab8189)一夜之间在4°C,其次是孵化与二次抗体(1∶Alexa萤石488驴anti-rabbit IgG抗体),热科学,妈,美国产品# - 21206;1∶Alexa萤石^®594年驴anti-mouse免疫球蛋白抗体,热科学、产品# - 21203,驴anti-mouse免疫球蛋白Cy3(1:50 0、133644、表达载体)。幻灯片是清洗和cover-slipped Vectashield硬套安装介质与DAPI (4′, 6-diamidino-2-phenylindole,蓝色,向量,美国产品# h - 1500)。所有DRG、皮肤样本取自从每个动物3 ~ 5部分。所有图片都是用荧光显微镜(BX51;奥林巴斯,汉堡,德国)和积极的像素在一个字段的值区域的300×240像素计算ImageJ(版本1.44 d软件美国国立卫生研究院的贝塞斯达,MD)。

2.9。数据分析

所有数据显示为均值±SEM(平均数标准误差),并分析了由一个——或者双向方差分析(方差分析)图基的紧随其后事后测试或成对或未配对t检验,在适当的地方。所有统计计算GraphPad棱镜6 (GraphPad软件公司,圣地亚哥,美国)。决心是统计学意义的差异p值< 0.05。

3所示。结果

3.1。温度测量在针灸针的尖端围操作和佤邦

取暖设备是新建针灸针来模仿传统的温暖的针灸针,由控制单元(图1一个)和一个加热单元(图1 b)。确保热量传递到针在预设温度稳定,温度在针尖端加热测量通过使用一个温度监测系统结合热电极针(图1 c)。后围温度设定在52°C或42°C,温度测量进行了20分钟。围时设置为52°C,针尖端的温度开始为23.51±0.4524°C,稳定在600年代达到了52.69°C±0.3127。围时设置为42°C,针尖端的温度开始23.40°C±0.5252和600年代后达到了42.13°C±0.6221 (图1 d)。这些数据表明,围成功导致针尖端所需的温度。另一方面,提示在温暖的针灸针的最高温度(WA)约为52°C点火后5分钟(图1 e)。

3.2。影响热针针刺内关在收缩压IMH鼠模型

探讨围刺激在两种不同温度的影响,42或52°C,高血压,收缩压后围刺激以老鼠的尾巴IMH通过使用无创血压监测系统(图2一个,B)。老鼠的血压IMH显著增加从119.33毫米汞柱178毫米汞柱相比,在接下来的几个小时之前的值IMH或正常组(图2 c)。围刺激时42°C或52°C应用针插入内关,52°C围群表现出显著的衰减比对照组高血压。然而,围在42°C未能抑制刺激的发展IMH老鼠(双向方差分析;集团F(19)= 29.73,p< 0.0001;时间F(13247)= 87.28,p< 0.0001;交互F(39247)= 4.675,p< 0.0001)。

图2

图2。影响热针针刺内关在收缩压(BP)在固定压力诱导高血压大鼠(IMH)。(一)示意图显示了实验过程中的测量收缩压IMH的大鼠模型。(B)英国石油公司代表测量的例子在计算机控制系统中。(C)影响热针针灸仪器(WAI)刺激42°C (n= 6)或52°C (n= 6)内关在老鼠IMH的发展。正常组(n= 6,无限制的),^{* * * *}p< 0.0001与控制(n= 6,只固定);42°C围,围的刺激内关在42°C;52°C围,围的刺激内关在52°C。(D)比较传统的温暖的针灸针(传统的WA)和围刺激内关在高血压大鼠的发展。^{* * * *}p< 0.0001和控制。每组5老鼠。(E)原理对传统热针针刺内关。(F)围内关的示意图。(G)代表)染色图像的正常和52°C围刺激内关。酒吧= 100μm规模。

与我们的新开发的围(确定刺激图2 f)是一样有效的传统热针针灸、围刺激在52°C的影响高血压比较与传统的温暖的针灸针(图2 e)。而固定化老鼠显示高血压(控制)的发展,围刺激温暖以及传统针灸针(传统的WA)内关明显阻止高血压的发展50分钟后刺激与IMH老鼠相比,控制大鼠(图2 d)(双向重复方差分析;集团F(2168)= 71.72,p< 0.0001;时间F(13168)= 22.84,p< 0.0001;交互F(26168)= 3.383,p< 0.0001)。组织学检查显示,围在52°C没有造成刺激形态组织损害(图2 g)。

3.3。抗高血压作用的中介的正中神经c fibers围刺激内关

探索的可能中介正中神经c fibers围的降压效应刺激内关,qx - 314和辣椒素的混合物,特别是抑制c fibers (27)围神经的注入大鼠正中神经的IMH (图3一)。对照组显示高血压的发展遵循固定的压力(qx - 314 +辣椒素,n= 5),由围减毒刺激在52°C。围的降压效果刺激几乎完全被预处理QX314和辣椒素(qx - 314 +辣椒素+围双向重复方差分析;集团F(2168)= 121.3,p< 0.0001;时间F(13168)= 94.21,p< 0.0001;交互F(26168)= 6.717,p< 0.0001;图3 b)。

图3

图3。效果的qx - 314和辣椒素注射前正中神经内关温暖针针灸仪器(WAI)电极刺激诱发的抑制IMH老鼠。(一)示意图为阻止c fibers管理qx - 314和辣椒素的混合物进入正中神经。(B)预处理的效果与内关围qx - 314和辣椒素的抑制电极刺激诱发的高血压。^{* * * *}p< 0.0001和车辆+围(n= 5)。qx - 314 +辣椒素,qx - 314和辣椒素注入正中神经(n= 5);qx - 314 +辣椒素+围qx - 314和辣椒素注入52°C围前正中神经刺激内关(n= 5);车辆+围(52°C),车辆被注入围前正中神经刺激(n= 5)。

3.4。外围TRPV1受体参与围的降压效果刺激内关在有IMH的老鼠

探讨围的降压效应是否刺激内关是通过外围TRPV1受体介导,TRPV1拮抗剂capsazepine被注入内关穴位40分钟前实验。高血压的发展被围减毒的刺激内关与IMH在老鼠52°C (图4一;车辆+ WAI),由预处理废除capsazepine (CPZ +围,双向重复方差分析;F组(2168)= 65.96,p< 0.0001;F (13168) = 53.13,p< 0.0001;交互F (26168) = 4.301,p< 0.0001)。另一方面,当基底血压之前注射(基地)与价值40分钟后注入(0,立即固定之前),CPZ到基底PC6本身并不影响血压。同时,CPZ注入本身并不影响高血压的发展(图4一)。进一步确认是否激活TRPV1受体的内关本身可以产生降压效应,TRPV1受体激动剂辣椒素是注入内关10分钟前固定压力。注射辣椒素内关减毒老鼠IMH的发展。先前的研究显示激活TRPV1受体在48°C (31日,32),我们测试是否围在48°C注射辣椒素产生类似的降压效果。对高血压的影响辣椒素注入PC6类似于围刺激在48°C(双向重复方差分析;集团F(2210)= 131.3,p< 0.0001;时间F(13210)= 65.10,p< 0.0001;交互F(26210)= 4.639,p< 0.0001。)(图4 b)。观察刺激激活TRPV1的围在48°C,免疫组织化学,TRPV1的drg C6-T2在另一组进行的动物。drg被围刺激后30分钟48°C和分析。几乎2倍增加TRPV1发现围组与正常组(t检验,F= 4.806,p< 0.0001;图4 c,D)。

图4

图4。影响激活TRPV1的内关在大鼠收缩压与固定压力诱导高血压(IMH)。(一)预处理的效果与TRPV1受体拮抗剂capsazepine (CPZ,n= 5)内关温暖针针灸仪器(WAI)电极刺激诱发抑制高血压。^{* * *}p< 0.001和车辆+围(n= 5)。CPZ, capsazepine内关;CPZ, capsazepine内关之前围刺激内关;车辆+围,车辆注入内关之前围刺激。(B)影响TRVP1辣椒素受体激动剂(n= 6)或48°C应用程序(n= 6)内关穴位对高血压的发展与IMH老鼠。^{* * * *}p< 0.0001与控制(固定,n= 6)。(C, D)免疫组织化学TRPV1在drg围刺激内关。immunopositive神经元的荧光强度在正常(n= 7)和围(n= 7)组(C)。^{* * * *}p< 0.0001和正常。代表epifluorescent图像显示TRPV1的表达(绿色)的背根神经节(drg)的正常和围组(D)。酒吧规模:100μm。

3.5。激活围小传入神经纤维的刺激内关

探索的亚型TRPV1-expressing DRG神经元被激活围刺激内关,TRPV1 double-staining和神经元标记CGRP怎样(肽能的小神经元标记),IB4 (nonpeptidergic小神经元标记)或NF200(感觉有髓纤维的标志)。TRPV1-immunoreactive神经元的荧光强度与与CGRP怎样显著的高于WAI-stimulated集团(n=比正常组(6)图5一个,B)(t以及,F= 3.164,p< 0.001),并与IB4 double-labeled TRPV1神经元的数量明显高于围组(n=比正常组(6)图5 e,F)(n= 6,t检验,F= 1.249,p< 0.05)。另一方面,一些神经元double-labeled NF200和TRPV1在正常组织或围集团(图5 c,D)。

图5

图5。TRPV1的免疫组织化学和/或CGRP怎样,NF200和IB4背根神经节(drg)后温暖针针灸仪器(WAI)刺激内关。(A, B)荧光强度和代表TRPV1的图像和CGRP怎样double-stained DRG神经元(黄色)在正常(n= 6)和围(n= 6)组。^{* * *}表明p < 0.001的显著性水平与正常。TRPV1 Immunofluorescent图像(红色)和CGRP怎样(绿色)(C, D)荧光强度和TRPV1的形象代表,NF200-positive DRG神经元的正常(n= 6)和围(n= 6)组。TRPV1(红色)和NF200 Immunofluorescent图片(绿色)(E, F)荧光强度和TRPV1的形象代表,IB4-positive DRG神经元的正常(n= 6)和围(n= 6)组。^*p< 0.05和正常。由TRPV1 Double-stained细胞(黄色)(绿色)/ IB4(红色)。酒吧规模:100μm。

3.6。抑制PC-6-stimulation降压效果的去除与RTX TRPV1

确定是否消融的外围TRPV1通道内关抑制围的降压效果刺激内关,RTX,降低TRPV1受体(24)注入内关与IMH老鼠。而围的刺激内关在52°C明显减毒高血压(车+ WAI)的发展,与对照组(RTX)相比,这种效应被注入RTX阻止内关前1天实验(车+围;双向方差分析;集团F(2168)= 128.5,p< 0.0001;时间F(13168)= 128.5,p< 0.0001;交互F(26168)= 5.104,p< 0.0001;图6)。TRPV1的免疫组织化学显示增强的TRPV1的表达引起围刺激内关是抑制通过预处理前RTX围刺激(单向方差分析;F= 13.22,p< 0.0001;图6 b,C)。

图6

图6。resiniferatoxin效果(RTX)注射前内关温暖针针灸仪器(WAI)电极刺激诱发抑制固定压力诱导高血压(IMH)在大鼠。(一)影响RTX注射前的IMH内关围电极刺激诱发的抑制老鼠。^{* * *}p< 0.0001和车辆+围(n = 5)。(B, C)TRPV1-positive神经元的车辆(n= 5)、车辆+围(n= 5),RTX (n = 5)和RTX +围(n= 5)组。代表图像的TRPV1神经元(C)。(D, E)双重染色降钙素相关基因肽(CGRP怎样,绿色)9.5蛋白基因产物(PGP 9.5,红色)。免疫荧光强度CGRP怎样/ PGP 9.5阳性神经元在RTX(黄色)(n= 5),RTX +围(n= 5)、汽车(n= 5)和车辆+围(n= 5)组。^{* * * *}p< 0.0001和车辆。酒吧= 100μm规模。

调查是否皮肤的神经纤维被RTX化学烧灼,我们double-stained神经纤维anti-PGP 9.5抗体(一般表皮内的神经纤维的标志)和anti-CGRP抗体(外围肽能的神经纤维的标志)。注射RTX内关的荧光强度显著降低PGP9.5 / CGRP怎样车辆相比,治疗(单向方差分析;F= 61.12,p< 0.0001;图6 d,E)。

4所示。讨论

我们开发了一个小说temperature-controllable围模仿传统温暖针刺针灸(WA)。围的刺激内关在52°C明显减轻固定压力诱发高血压的发展相比,在42°C。围的抗高血压作用刺激内关是类似传统的温暖的针灸针。内关与TRPV1拮抗剂capsazepine预处理前52°C围刺激阻塞围的降压效果刺激内关。此外,激活TRPV1受体的内关由辣椒素或48°C围刺激产生降压效应。免疫组织化学分析表明,围刺激TRPV1的表达增加CGRP怎样——或者IB4-positive打钻。外围TRPV1的抑制RTX注入围的降压效果刺激内关预防。目前的研究发现,温暖针针刺内关招募外围TRPV1受体来减弱固定的发展压力诱导高血压大鼠。

温暖的针灸针是有效治疗各种疾病结合热刺激的影响与手动针灸,机械刺激穴位(11)。几项研究试图量化的温度温暖针针灸来确定其作用机理(30.,33)。然而,它可能不容易确定最优有效条件在传统热针针灸,因为温暖的体温针的尺寸或重量取决于艾(30.,34)。在先前的研究中,据报道,高温刺激在47°C或52°C产生显著的镇痛效果与炎症小鼠相比,低温刺激在37°C或42°C (35)。艾灸刺激在46岁°C明显改善心功能,布满肥大细胞比38°C刺激(36)。在目前的研究中,刺激内关的围了抗高血压效应以及传统温暖针刺针灸,和围刺激在52°C更显著地抑制IMH的发展比围刺激大鼠42°C。与我们的研究结果相似,帮派等人建议干针针灸在44°C是有效的治疗慢性肌筋膜疼痛综合征的临床试验(37),并在cmp的鼠模型中,干针针灸在44°C TRPV1的mRNA表达明显增加,PKC和il - 6与刺激温度超过43°C (38)。此外,在HEK 293个细胞异种的表达鼠TRPV1,细胞的当前值从44°C增加到53°C随温度而变的方式(39)。

TRPV1钠/钙离子通道,对有毒热(> 43°C)、内源性镇痛物质和香草酸受体激动剂辣椒素和DRG神经元的表达是一个族群(23)。之前的研究表明,EA刺激增加TRPV1活动和调节交感神经兴奋性心血管反应通过中央自主调节功能(40)。我们之前的研究也显示,内关TRPV1受体激动剂辣椒素刺激的补丁降低血压高血压参与者(15)。在目前的研究中,在DRG神经元TRPV1的表达显著增加后48°C围刺激内关与正常组相比。注入capsazepine TRPV1受体拮抗剂,在穴位内关了围的降压效果。此外,刺激和48°C围一片含有1%辣椒素,TRPV1受体激动剂,抑制高血压的发展IMH老鼠。TRPV1是一个打开的离子通道蛋白在温度超过43°C和辣椒素。离子通道激活TRPV1允许钠离子和钙离子进入细胞,和离子浓度的差异产生电信号传送到中枢神经系统。据报道,皮下神经纤维表达TRPV1在nonacupoint穴位皮肤高于控制皮肤和显示TRPV1和C−/ A-δ纤维colocalization。此外,针灸刺激神经纤维(TRPV1的表达增加41,42)。吴等人发现,TRPV1在ST36高度表达,参与与针灸相关镇痛,和辣椒素注入ST36复制针灸镇痛效应(43)。这些研究结果的基础上,我们建议围刺激内关增加了活动的外围TRPV1产生降压效应与IMH老鼠。此外,尽管先前的研究报道,躯体痛苦TRPV1激活能产生交感反应导致血压的增加(44),目前的研究表明,焦激活TRPV1受体在PC6产生降压效应。在先前的研究中,应用电针刺激PC6点覆盖正中神经在reflex-induced高血压患者最有效,而点覆盖桡神经的刺激或深腓神经不是有效或少有效(45,46)。我们之前的研究也表明,在PC6 TRPV1的化学刺激正中神经降低收缩压。降低收缩压更深刻的局部刺激后正中神经刺激后的尺骨神经。它可能表明,特定的中介的正中神经神经电极刺激诱发的降低BP升高和TRPV1受体在正中神经的一个关键贡献PC6-mediated BP的减少。

虽然电刺激内关穴位可以激活一个c fibers正中神经(15,47),有人建议的影响(EA)和经皮电神经刺激(十)心血管疾病是由C-fiber激活(46)。例如,EA在间使~ 6穴位正中神经的反射抑制兴奋性胃膨胀引起的心血管反应(46),EA的心血管效应是由新生儿减少C-fiber封锁与辣椒素治疗(48)。我们之前的研究发现,阻断a纤维在高血压参与者并没有阻止TENS-induced降血压效果,但由辣椒素刺激c fibers内关穴位产生acupuncture-like对高血压的影响(15)。在目前的研究中,我们使用的混合物qx - 314和辣椒素的选择性地阻止c fibers正中神经。理论上,qx - 314和辣椒素共同TRPV1通道打开的毛孔辣椒素和变得足够大,可以有选择地传输qx - 314或疼痛的神经元,大分子和利多卡因通过导数qx - 314有选择地块钠离子通道(49),导致兴奋抑制痛觉受器,因此,有选择地块感觉神经元数量的功能。在目前的研究中,围的降压效果刺激内关被qx - 314和辣椒素预处理的正中神经,表明中介的c fibers围需要正中神经刺激内关产生降压效应。RTX, TRPV1受体激动剂,导致持续涌入的钠和钙通过TRPV1通道和导致的损失TRPV1-expressing DRG神经元及其纤维终端通过通道脱敏和calcium-induced细胞毒性(50)。在目前的研究中,RTX的政府内关抑制TRPV1活动和抑制围的降压效果刺激内关。TRPV1通道发挥重要作用在各种疾病,如疼痛、抑郁、压力、肥胖和焦虑(51),已知参与各种针灸的效果。先前的研究已经显示,针灸刺激增加表皮神经纤维(TRPV1活动41通过激活TRPV1)和减少体重肥胖小鼠模型(52)。这些研究结果的基础上,我们建议围刺激内关激活TRPV1通道和c fibers外围的正中神经,从而产生降压效应。

总之,我们现在的结果表明,温暖针针灸产生降压效应通过激活c fibers通过外围TRPV1在正中神经活动的老鼠模型固定压力引起的高血压。

数据可用性声明

原始数据支持了本文的结论将由作者提供,没有过度的预订。

道德声明

动物研究是审查和批准机构动物保健和使用委员会东方医学研究所。

作者的贡献

香港,你和某人导致概念和设计的研究。某人、SC、SS、XJ S-YK进行了实验。K-HC SJC进行统计和分析。某人,你和香港写的手稿。所有作者的文章和批准提交的版本。

资金

本研究在东方医学研究所的支持下,韩国(KSN1823212)和韩国国家研究基金会(NRF)授予由韩国政府(MSIT)(2020号r1c1c1006534)。

的利益冲突

作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。

出版商的注意

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。

引用

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