高分子量葡萄糖花椰菜均聚物(芸苔属植物oleraceavar。italica)刺激无脊椎动物和哺乳动物的免疫系统
Atsushi Miyashita
1,
Keiko Kataoka2,Toshio Tsuchida2,
Akihiko另小笠原群岛
3,Hiroto及其2,Megumu高桥4和
那种Sekimizu
2、5*- 1研究所的医学真菌学,军事大学,东京,日本
- 2基因组药物研究所有限公司,日本东京
- 3日本Berumu有限公司,日本东京
- 4国家农业和食品研究机构,日本茨城县
- 5学院Pharma-Science、药物发现蚕模型、军事大学,东京,日本
有广泛兴趣休物质的免疫刺激性影响,预计将有助于改善人类健康。西兰花(芸苔属植物oleraceavar。italica)已被证明含有的多糖开发食品材料和免疫调节功能。在这项研究中,免疫刺激性活动之前无特征的西兰花多糖是由蚕(家蚕)免疫测定(使用肌肉收缩指数)在10商业和17个实验品种的西兰花。商业品种,具体活动有显著变化(单位/毫克,silkworm-based免疫测定)。实验品种,品种“冬季穹顶”显示最高的活动。我们进一步纯化的免疫刺激性多糖凝胶过滤“冬季穹顶”。使用silkworm-based分析,我们发现,最高分数(“第二部分”)包含活性物质与特定活动高于之前报道的活性物质(如葡聚糖)。这种物质出现超过270 kDa的异构分子量。分数的主要糖成分二世是葡萄糖,表明葡萄糖均聚物负责活动。此外,分数II诱导细胞因子产品在蚕(生产活动b .森麻痹肽(BmPP)在活的有机体内)和鼠标(TNFα的生产在体外)的免疫系统。这些结果表明,葡萄糖均聚物的西兰花诱发细胞因子在昆虫和哺乳动物免疫系统,提供分子的见解对我们理解植物的物质如何与动物的免疫系统。
1介绍
先天免疫是一种机制,迅速消除外国或不必要的物质(如细菌、真菌、病毒和癌细胞)身体不使用的抗体,和它的分子设计的进化类群从无脊椎动物到哺乳动物(Miyashita et al ., 2012;Miyashita et al ., 2014;Miyashita et al ., 2015;Miyashita et al ., 2018;Miyashita et al ., 2019)。增强免疫功能,可用口头物质可能导致人类健康预防不必要的微生物感染。它还有助于确保食品质量和安全,目前受指南(Bondoc 2016),通过定义物质影响动物生理学。我们以前报道,家蚕麻痹肽(BmPP)通路,导致肌肉收缩,是先天免疫途径对蚕的外源性物质,b .森(Ishii et al ., 2008;Ishii et al ., 2010)。BmPP多功能肽激素,引起肌肉收缩和激活免疫细胞(即传播。蚕,通过姬氏)。BmPP利用这个特性,我们之前开发的实验方法来量化肌肉收缩活动(作为BmPP激活的标志),提出了一种方法来寻找天然产物刺激使用蚕先天免疫(Dhital et al ., 2011;Fujiyuki et al ., 2012)。尽管多糖的免疫调节功能一直感兴趣的研究领域(Horsfall和钻石,1957;BolouriMoghaddam范,2012;施et al ., 2021;王et al ., 2021;Zhang et al ., 2021;Cai et al ., 2022;Taoerdahong et al ., 2022),我们的经验知识对植物衍生的多糖免疫刺激性作用,当管理在动物的身体仍是断断续续的。因此我们有蚕模型应用于寻找化合物与潜在人类应用,鉴于先天免疫系统的守恒特性无脊椎动物和脊椎动物之间。
使用silkworm-based试验系统,我们演示了酵母β-glucans (Fujiyuki et al ., 2012)和酸性西兰花(芸苔属植物oleraceavar。italica)多糖(Urai et al ., 2017)是免疫刺激性药物,因为它们激活BmPP蚕血淋巴和诱导肌肉收缩的。西兰花,pectin-like酸性多糖的免疫刺激性影响了与特定活动的130单位/毫克(单位是定量确定silkworm-based化验如前所述在这个研究)(Urai et al ., 2017)。在文献中,不仅酸性多糖,中性多糖也被报道使用细胞测定免疫刺激性影响在体外(例如,脾细胞增殖,一氧化氮的生产,等。)(倪et al ., 2010;易et al ., 2012;李et al ., 2014;Zhang et al ., 2020)。这些报告同意长期承认的概念在免疫学,一些多糖是公认的免疫系统的免疫反应性的模式分子在有机门(Horsfall和钻石,1957;梁et al ., 2006;BolouriMoghaddam范,2012;李et al ., 2014;李,王,2015年;太et al ., 2016;Urai et al ., 2017)。最近,高分子量(大约300 kDa)从鳞翅类昆虫酸性多糖(Antheraea yamamai和b .森)已被证明刺激哺乳动物先天免疫(太et al ., 2016;阿里et al ., 2018),这是符合我们的建议为免疫刺激性多糖通过屏幕上的多糖传感功能守恒的蚕。
在我们之前的研究中,我们报告的热水提取食用西兰花的一部分显示免疫刺激性活动高于其他植物蚕(Urai et al ., 2017)。在这项研究中,活性成分是第一个被乙醇沉淀,然后受到diethylaminoethyl (DEAE纤维素柱层析法),并将其绑定分数(Urai et al ., 2017)。建议的化学结构是一个pectin-like酸性多糖(Urai et al ., 2017)。另一方面,一些non-acidic(中性)多糖在不同植物材料最近报道的生理影响先天免疫系统(倪et al ., 2010;易et al ., 2012;李et al ., 2014;Zhang et al ., 2020),但没有这样的报道花椰菜。在目前的研究中,我们检测是否有生物活性的中性多糖的流通型分数deae纤维素柱层析法使用的热水提取西兰花。我们还在花椰菜品种免疫刺激性活动相比,我们进一步纯化活性物质通过凝胶过滤柱层析法和测试是否这种物质的免疫反应性的影响在无脊椎动物和哺乳动物中很常见。
2结果
2.1先天immunity-stimulating物质集中在花椰菜的萌芽
总免疫刺激性活动(由silkworm-based测量肌肉收缩试验方法部分)中所描述的每个部分的西兰花所示表1(见图1 a, B西兰花的图形细节部分和样品制备)。每100 g(湿重)的材料开始,味蕾的热水提取包含1700000±450000单位(n= 3),茎含有40000±20000台(n= 3),茎含有6600±2100单位(n= 3)。每个西兰花中使用的实际湿重味蕾的实验是120±5.8克,150±23 g茎,茎和84±13 g。因此,大多数的活动存在于芽芽为97%,茎茎,为2.8%和0.26%(见表1三个实验的结果复制)。
表1。总免疫刺激性活动中发现的热水提取西兰花(每100克每一部分的湿重)。
图1。(一)西兰花嫩芽、茎和茎。这幅画代表了西兰花的三个部分(芽、茎和茎)在材料和方法部分描述。在这项研究中,西兰花是分为三个部分,热水提取物是单独准备。每一部分的免疫刺激性活动总结表1。(B)西兰花的中性多糖制备的方案。所示的面板是一种简化的方案从西兰花中性多糖的制备:PCI, phenol-chloroform-isoamyl酒精;DEAE diethylaminoethyl。每个步骤的详细描述,请参考材料和方法部分。(C)免疫刺激性效果(蚕肌肉收缩试验)中性多糖的西兰花。图表显示了存在剂量依赖的相关性免疫刺激性影响中性多糖样品准备的花椰菜品种1号(见也表2其他品种的结果列表)。三个独立实验复制(复制# 1,# 2,复制和复制# 3)所示的面板。纵轴代表了C值(见材料与方法对我们如何确定C值),和水平轴代表了样品测定中使用的剂量。(D)西兰花中性多糖刺激哺乳动物的免疫细胞。图表显示了中性多糖的免疫刺激性活动从西兰花对小鼠巨噬细胞细胞。纵轴代表了tnf浓度检测老鼠巨噬细胞细胞的培养基(pg / mL)。每个情节都代表每个测量的技术复制。实验方法部分中描述的细节。两组之间存在统计上的显著差异(学生的学习任务p值= .00013)。(E)免疫刺激性活动不同的西兰花和花椰菜品种。每个条形图表示免疫刺激性活动的数量/重量(单位/毫克),与一个错误栏表示标准偏差。每个品种名称显示在图的底部。
免疫刺激性活动是由silkworm-based肌肉收缩试验。SD:标准差。有一个显著差异(方差分析(方差分析);p= .00011)在三个部分(从实验得到的值使用芽120克、150克茎,茎84克)。活动中发现的味蕾是明显高于其他部分(事后t以及;p= .00026与茎p= 4.2×10−5比杆)。
2.2免疫刺激性non-acidic多糖从品种组# 1的影响
品种设置# 1,DEAE流通型分数(即免疫刺激性的活动。,non-acidic polysaccharide fraction) was determined for each cultivar using the silkworm muscle contraction assay (图1 c品种1号,别人中列出表2)。所示表2所有品种的样本显示,活动但不同的具体活动(即。,amount of activity per sugar amount), ranging from a maximum of 13,000 units/mg sugar (cultivar No. 1) to a minimum of 840 units/mg sugar (cultivar No. 3). We further assessed the immunostimulatory activity of the sample from cultivar No. 1 on mouse macrophage cells. As demonstrated in图1 d,tnf浓度培养基的老鼠巨噬细胞细胞高时被样品(意味着= 585 pg / mL, sd = 77 pg / mL)比治疗时的车辆(意味着= 77 pg / mL, sd = 4.2 pg / mL)。差异具有统计学意义(p在学生的学习= .00013)。
表2。花椰菜品种及其免疫刺激性活动列表用于品种设置# 1(十个商业品种)。跨品种有显著差异;Akaike信息准则(AIC (AIC)完整的模型完整的=−272.8)低于零模型(AIC零=−256.8)。
2.3选择“冬季穹顶”品种为净化/特性在品种设置# 2
因为每个品种的详细信息是不可用的品种设置# 1,然后培养不同品种(品种设置# 2)提供发布信息(有关详细信息,请参阅材料和方法部分)。non-acidic多糖的免疫刺激性活动分数(即。,DEAE flow-through fraction) were determined for the cultivar set #2 (15 broccoli and 2 cauliflower cultivars,图1 e)。每个糖重量(即免疫刺激性的活动。,specific activity) distributed between 260 and 11000 units/mg, with the cultivar “winter dome” showing the highest specific activity (图1 e)。我们因此决定使用“冬季穹顶”品种进行以下分析。
2.4免疫刺激性中性多糖的纯化花椰菜
使用品种“冬天圆顶”,我们纯化免疫刺激性物质。由凝胶过滤柱层析法(我们合用的第二部分所示图2一个),具体的活动增加了3.6倍相比,加载DEAE流通型分数。活动的收益率为50% (图2一个;表3)。所示图2一个,活动出现在不同位置的凝胶过滤,表明多糖具有不同分子大小大于270 kDa显示免疫刺激性的效果。
图2。(一)洗脱Sephacryl s - 1000的凝胶过滤柱层析法。凝胶过滤柱层析洗脱图的图所示。的x设在代表洗脱体积(mL),y相互重合代表糖浓度(µg /毫升)的分数(左轴)和收缩值(右轴)。色谱方法细节,糖量化,收缩值估计方法部分中描述。黑色的圆圈表示糖浓度,和红色方块表示收缩值。如图表所示,我们汇集分数分为三个分数:Fr。I, II, III。在这项研究中,Fr。二世是用于进一步分析。也请看到表2净化的表。(B)糖的成分分析纯化免疫刺激性中性多糖(Fr II)。图中所示的是糖成分分析的高效液相色谱图。的x设在代表保留时间(分钟)。红图代表了高效液相色谱模式从ABEE-labelled糖(单糖)混合物。每个峰带注释的方法部分中描述。黑图代表了高效液相色谱模式从ABEE-labelled水解样品(Fr II)。如图,Fr。2显示一个信号从ABEE-labelled葡萄糖,和其他单糖检测极限。看到这个实验的方法部分技术细节。(C)麻痹的激活肽(BmPP)应对broccoli-derived中性多糖(Fr II)。蚕血淋巴样本运行在一个SDS-polyacrylamide凝胶和活跃BmPP被使用anti-PP抗体免疫印迹分析检测。血淋巴样本收集3分钟后样本(Fr。2)或车辆(生理盐水)注入。种植前的凝胶图像所示补充图S1(请见补充材料)。(D)纯化的免疫刺激性效果分数(Fr。2)在小鼠巨噬细胞的细胞。小鼠巨噬细胞细胞(RAW264.7)暴露在TNF-α数量的样本,测量培养基。的y设在代表TNF-α浓度(pg / mL)。同样的实验都使用了缓冲,我们用于凝胶过滤柱层析法,当我们获得Fr。二世(缓冲控制),在两三个复制由RAW.264.7细胞诱导TNF-α生产。北达科他州,not detected. There was a statistically significant difference between the two groups (p= .0035,学生的学习任务)。
表3。净化表。
2.5糖成分分析纯化的中性多糖(fr II)。
后加酸水解和Fr ABEE标签。第二,我们执行一个高效液相色谱分析,它显示一个峰来源于ABEE-labeled葡萄糖。其他单糖低于检出限(图2 b)。这个结果表明non-acidic多糖的化学结构出现在Fr。二是葡萄糖均聚物,它是一个中性多糖,也就是说,可能不是DEAE纤维素列绑定。我们还观察到一个诱导活性BmPP回应intra-haemocoel蚕Fr。二世(图2 c),确认Fr。二世会刺激先天免疫系统通过细胞因子的生产。
2.6西兰花的中性多糖(第二部分)从老鼠巨噬细胞细胞诱导细胞因子释放
我们进一步评估的免疫刺激性影响西兰花中性多糖(第二部分)在哺乳动物细胞。所示图2 d、tnf浓度培养基的老鼠巨噬细胞细胞被分数更高,当治疗II(意味着= 205 pg / mL, sd = 30 pg / mL)比被缓冲区用于凝胶过滤所有三个复制(在检出限)。差异具有统计学意义(p= 0.0035,学生的学习任务)。
3讨论
在目前的研究中,我们首先检查non-acidic多糖分数(DEAE纤维素柱层析法的流通型分数使用热水/ PCI提取西兰花的开始材料)的免疫刺激性的活动。结果表明,中性多糖的存在,在先天免疫花椰菜。此外,在目前的研究中,我们比较的活动在三个可食用部分(芽、茎和茎)了解活性物质的分布。结果表明,味蕾包含大部分的活跃分子(见表1)。然而,相对较大的变异(大标准差)观察茎和茎,和护理应采取在评估其实际百分比。然而,在任何情况下,结果表明:西兰花芽有潜在应用作为功能性食品配料。这是第一个报告生物活性中性多糖的西兰花,引起肌肉收缩的蚕在活的有机体内(即。,activation of the insect cytokine BmPP) and cytokine release from mouse macrophage cells在体外。
在这项研究中,我们进一步纯化获得的活性物质,其化学结构的信息根据分子大小估计在凝胶过滤柱层析法和糖成分分析的结果。西兰花的结果表明,活性多糖(“冬季穹顶”品种)是中性的葡萄糖均聚物分子大小超过270 kDa。在植物和真菌除了花椰菜、多糖等可食用的材料蛹虫草(Zhang et al ., 2020),石香薷对(李et al ., 2014),人参(倪et al ., 2010),花芽龙眼(易et al ., 2012)已报告有免疫刺激性影响。尽管如此,他们的化学结构是信息匮乏,这项研究提供信息关于我们如何净化活性多糖和它们的化学结构。目前,我们不知道上面的物种的生物活性多糖化学结构(即分享。,葡萄糖均聚物)。
在目前的研究中,我们也比较了(即免疫刺激性活动。,silkworm muscle contraction) of the DEAE flow-through fractions obtained from 27 cultivars (cultivar set #1 and #2). The results demonstrated differences among the cultivars for the specific activity (i.e., amount of activity per sugar quantity), and whether this difference is due to the amount of active substance or to the presence of active substances with different chemical structures needs further investigation. The DEAE flow-through fraction of the cultivar “winter dome”, which showed the highest specific activity (图1 e;应该小心在解释这些值,考虑到大的标准差所示图1 e),是通过凝胶过滤进一步纯化。结果,我们发现的活性物质纯化分数(Fr。(二)显示异构分子量大于270 kDa 32000单位/毫克和特定的活动。我们一直使用蚕肌肉收缩作为识别先天免疫指标活化剂在各种食品材料,和这个值(即。32000单位/毫克)似乎是杰出的。例如,西兰花的中性多糖的特定活动分数超过300倍的农业,具有β-(1,3)葡聚糖(葡萄糖均聚物)结构和被认为是一个最活跃的多糖的免疫刺激性影响蚕试验系统。可能有一个独特的化学结构的葡萄糖均聚物显示这样杰出的特定活动。同时,综合使用RNA序列基因表达分析技术在蚕以及小鼠的免疫细胞来确认西兰花葡萄糖均聚物的多方面的影响将会是一个有前途的未来为这一研究方向。
两组真核生物、真菌和植物,拥有大量的结构称为细胞壁多糖。多糖在真核生物中扮演一个重要的角色在防御致病真菌。凝集素和补充蛋白质被称为分子识别在真菌多糖(Snarr et al ., 2017)。据报道,α-(1,3)产生的葡聚糖荚膜组织胞浆菌从检测有助于毒性通过隐藏免疫刺激性β-glucans主机吞噬细胞(Rappleye et al ., 2007)。事实上,在我们的分析系统测量免疫激活使用蚕肌肉收缩能力作为一个指标,我们报道了活动的强度取决于β-glucans的来源和化学结构(Fujiyuki et al ., 2012)。进一步的调查将会扩大我们的理解不同的多糖物质之间的相互作用和动物的免疫系统。
使用多糖食品补充剂的未来方向是可能需要进一步研究,以便更好地理解不同类型的多糖的具体健康福利以及他们如何可以用于改善食品的营养价值(也看到最近的评论在这个领域(Lomartire Goncalves, 2022;邱et al ., 2022;来同西et al ., 2022)]。然而,缺乏信息和人体临床试验在功能食品限制了多糖的广泛使用。例如,海藻几个世纪以来一直用于治疗目的,但直到最近,先进的技术使人们有可能的潜在属性提取和研究其生物活性化合物(Lomartire Goncalves, 2022)。此外,研究可能会专注于开发新方法从天然来源中提取和纯化多糖,如水果,蔬菜和谷物,以使它们更适合作为食品补充剂。本研究将是其中的一个尝试。更多的研究是进行多糖的健康益处,预计我们将看到一个增加数量的食品含有多糖作为功能性配料。
4材料和方法
4.1花椰菜品种
以下4.4.1品种设置# 1
十个商业花椰菜品种(1 - 10)提供的坂田种子公司(日本横滨)被用于本研究的第一部分。品种1号,我们进行了两个实验使用不同批次的西兰花(一个实验来比较三个部分的西兰花,另一个用于制备DEAE流通型分数)。实验和植物样品收集符合军事大学的指导方针。
4.1.2品种设置# 2
开始寻找材料进一步纯化和表征(如糖成分分析),我们使用15花椰菜品种(b . oleraceavar。italica菜花)和两个品种(b . oleraceavar.葡萄孢属)提供的国家农业和食品研究机构(日本筑波)(高桥et al ., 2021)。春季作物被用于这项研究。这些品种的列表所示图1 e。实验和植物样品收集符合军事大学的指导方针。
4.2的西兰花多糖热水提取味蕾,茎和茎
我们执行一个热水提取如前所述(Fujiyuki et al ., 2012)。西兰花(复制# 1,品种第一)分为两个可食用部分(小花蕾,茎)和一个不能吃的部分(秸秆)用剪刀,煮2分钟(在实验室的沸点),然后浸在冰水降温(ca。0°C)。图1一个是一个摄影西兰花的每个部分的描述。小花蕾被分开使用剪刀,从茎和芽的重量,茎,茎被测量。15克的每一部分拍摄和均质使用polytron Milli-Q 30毫升的水。匀浆样品然后热压处理过的15分钟在121°C进行热水提取、和上层清液收集(8590克在4°C)为10分钟。
4.3 Silkworm-based肌肉收缩试验
免疫调节活性测定使用silkworm-based试验之前报道(Urai et al ., 2017;李et al ., 2022)。在这个实验中,我们测量蚕肌肉收缩的指数BmPP(昆虫细胞因子)的水平。肌肉标本由饲养5龄蚕人工饮食(Silkmate 2 s,日本Nosan Kogyo东京,日本)5天自从上次蜕皮(Urai et al ., 2017)。样品溶液(50µl)注入肌肉标本使用结核菌素与27-gauge针注射器(1毫升),和身体长度是10分钟监控。收缩值(C = (x - y) / x)计算长度的蚕开始实验[x (cm)]和长度最大收缩[y (cm)]。收缩值(值)对各种样品剂量(6 - 10剂量为每一个样本,蚕是用于每个剂量)从图上看,和样品体积含量值的估计,及其活动被确定为一个单位。
4.4制备材料的deae纤维素柱层析法
请参阅图1 b整个过程的简化方案。两卷的PCI(酚/氯仿/异戊醇)被添加到热水提取的花椰菜,和水层离心后收集(8590克,5分钟在4°C)。两卷的乙醇添加到水层,并形成的沉淀离心(8590克,10分钟在4°C)是溶解在10毫米Tris-HCl (pH值7.9)缓冲区,并加载DEAE纤维素柱(通用电气医疗集团,床体积= 20毫升)平衡同样的缓冲,我们收集了主要材料部分(图1 b)。
4.5凝胶过滤柱层析法
流通型分数从DEAE柱层析法(我们使用“冬季穹顶”品种对这次试验)集中通过乙醇沉淀,然后应用于凝胶过滤柱(Sephacryl s - 1000,直径= 15毫米,高度= 1080毫米,床体积= 190毫升)。列是由10毫米的时候三羟甲基氨基甲烷/液盐酸(pH = 7.9)提前缓冲区和缓冲区用于洗脱。分数大小2毫升/分数,每个分数受到糖量化(重复实验)和蚕肌肉收缩试验(每个分数的值来自于一位重复试验)。糖量化执行根据之前报道的方法(Urai et al ., 2017)。活动分数池获得三个分数(分数# 30 - # 45我分数,分数# 46 - # 80作为第二部分,和分数# 81 ~ # 100为第三部分所示图2一个)。我们使用第二部分作进一步鉴定,分数显示特定的活动(请增加也看到净化表所示表2)。
4.6糖成分分析
糖成分分析都使用4-aminobenzoic酸乙酯(ABEE)标记方法如前所报道(Urai et al ., 2017)。酸水解后纯化多糖部分(第二部分),ABEE-labeled样本使用反相高效液相色谱分析的列。单糖标准被用作控制,每个单糖被确定基于洗脱时间。进一步验证峰值注释,样本与ABEE标记葡萄糖混合样品和由高效液相色谱分析,我们证实每个样品的峰重叠。
4.7检测活性BmPP免疫印迹分析
我们以前报道的方法检测活动BmPP (Miyashita et al ., 2015)。五龄(第五天)蚕幼虫注射50µl第二部分(从凝胶过滤柱层析法)或生理盐水(车辆)。3分钟孵化后,血淋巴被收集,直接通过削减蚕腹部腿,到1.5毫升管预热加热块在100°C(1管/幼虫)。10分钟后热处理在100°C,样本在10000 g 10分钟旋转和上层的收集。同等体积的集中,从每组三种动物血液和15µl池中的血液是电泳用于每个车道。西方墨点法进行检查乐队被anti-paralytic肽(BmPP)抗体。
4.8 tnf诱导试验采用小鼠巨噬细胞的细胞
我们保持RAW264.7细胞,小鼠macrophage-derived细胞系在37°C公司为5%2使用rpmi - 1640(热费希尔科学株式会社,Tokyo, Japan) with 10% fetal bovine serum (FBS). When performing the TNF-alpha induction assay, we inoculated RAW264.7 cells (1✕105在rpmi - 1640细胞/)(+ 10%的边后卫)乘96孔板,在37°C和培养24小时。然后,我们删除了媒介,并立即把样本(即。,10 times diluted DEAE flow-through fraction) or the buffer used for the chromatography (10 mM Tris-HCl, pH = 7.9) suspended in RPMI 1640 (non-FBS) medium, and cultured the cells for 6 h. We collected the cell culture supernatant and measured the TNF-α concentration using Mouse TNF-α Quantikine ELISA Kit MTA00B (R&D SYSTEMS).
数据可用性声明
最初的贡献提出了研究中都包含在这篇文章/补充材料,进一步的调查可以直接到相应的作者。
作者的贡献
研究和设计概念:我和KS。采集的数据:是,KK, TT, AO,接下来的。数据的分析和解释:是,KK、AO和KS。起草文稿:是。关键的修订:点,太,KS。
确认
我们感谢基因组药物研究所有限公司为技术支持,也感谢坂田种子公司提供材料。这项工作是由一个jsp支持KAKENHI(格兰特# 20 k16253和22 k15461),和一个jsp KAKENHI(格兰特# 21 h02733) KS。
的利益冲突
作者KK, TT, HN, KS受雇于该公司基因组药物研究所有限公司有限公司和作者AO受雇于公司日本Berumu有限公司有限公司
其余作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
出版商的注意
本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。
补充材料
本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/frfst.2023.1012121/full补充材料。
缩写
ABEE 4-aminobenzoic酸乙酯;BmPP,家蚕麻痹肽;DEAE diethylaminoethyl;肿瘤坏死因子,肿瘤坏死因子;高效液相色谱法,高效液相色谱法;另类投资会议,akaike的信息标准。
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关键词:蚕,免疫力,西兰花,多糖、生物化学
引用:Miyashita, Kataoka K, Tsuchida T,小笠原群岛AA,中岛以H,高桥M和Sekimizu K(2023)高分子量葡萄糖花椰菜均聚物(芸苔属植物oleraceavar。italica)刺激无脊椎动物和哺乳动物的免疫系统。前面。食物。科学。抛光工艺。3:1012121。doi: 10.3389 / frfst.2023.1012121
收到:2022年8月05;接受:2023年1月27日;
发表:2023年2月15日。
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