提取bioactives从棕色海藻使用子和超临界流体:影响提取的鱼油丰富蛋黄酱的贮存稳定性gydF4y2Ba

1介绍gydF4y2Ba

脂质氧化在食物、化妆品、和消费产品是这些产品质量恶化的主要因素,导致不必要的脱臭和味(gydF4y2Ba弗兰克尔,1998gydF4y2Ba)。脂质氧化食品水包油(o / w)乳剂,像蛋黄酱,可以控制添加抗氧化剂。这些抗氧化剂的分区在o / w型乳剂对整体抗氧化功效是至关重要的。根据极性的抗氧化剂可以位于水或油阶段,和/或在油水界面。过渡金属如铁蛋黄酱的存在表明水相中的金属络合的抗氧化剂,这些食物最有效的系统(如。乙二胺四乙酸(EDTA)],阻碍铁gydF4y2Ba^{2 +gydF4y2Ba}催化氧化脂质(gydF4y2Ba雅各布森et al ., 2001gydF4y2Ba)。然而,其他研究表明,表面活性化合物如冻干酚类化合物有前途的抗氧化功效蛋黄酱由于其位置在油/水界面与其他抗氧化剂以及潜在的协同效应,例如,天然维生素e油相(gydF4y2Ba阿雷曼et al ., 2015gydF4y2Ba)。最后,脂溶性抗氧化剂如类胡萝卜素和天然维生素e的优点是位于油相的脂质氧化的传播可以发生,从这些抗氧化剂可以作为激进的食腐动物(gydF4y2Ba黄et al ., 1996gydF4y2Ba)。然而,生育酚单独没有有效的抗氧化剂在蛋黄酱(gydF4y2Ba雅各布森et al ., 2000gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

几种抗氧化剂,如EDTA、非常高效的合成抗氧化剂,旨在阻止脂质氧化。然而,由于限制使用一些合成抗氧化剂和增加消费者意识,有一个趋势自然添加剂的使用和清洁标签。因此,在过去的几十年中,几项研究已经发表在抗氧化剂的提取和应用程序获得从自然资源在食品及相关产品(gydF4y2BaSabeena Farvin et al ., 2012gydF4y2Ba)。海洋环境是一个相对较少探讨的具有抗氧化性能的天然生物活性化合物包括酚类化合物,萜类,硫酸多糖和色素取代合成化合物(gydF4y2BaTziveleka et al ., 2021gydF4y2Ba;gydF4y2Ba奥利维拉et al ., 2022gydF4y2Ba)。这些化合物可以在如海藻。gydF4y2Ba

岩藻vesiculosusgydF4y2Ba是一个棕色海藻的潮间带水域中发现如北欧国家,如波罗的海。棕色海藻,像gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba包含几个生物活性的化合物,如类胡萝卜素色素,酚类化合物,多不饱和脂肪酸、多糖(gydF4y2BaHoldt Kraan, 2011gydF4y2Ba)。传统上海藻生物活性化合物已经使用有机溶剂提取。然而,使用有机溶剂有几个缺点包括使用大量溶剂,提取时间长,降解oxygen-sensitive化合物的提取是在一个开放的系统中进行的。另一个问题是有机溶剂的选择性较低(gydF4y2BaGetachew et al ., 2018gydF4y2Ba)。为了减轻这些挑战,近年来一些研究已经进行了从海藻生物活性化合物的提取使用新兴技术(gydF4y2BaGetachew et al ., 2020gydF4y2Ba)。这些技术包括微波萃取(gydF4y2BaCharoensiddhi et al ., 2015gydF4y2Ba),ultrasound-assisted萃取(gydF4y2BaMoreira et al ., 2017gydF4y2Ba)、脉冲电场辅助提取(gydF4y2Ba罗宾et al ., 2018gydF4y2Ba)、欧姆加热(gydF4y2Ba佩雷拉et al ., 2021gydF4y2Ba),共晶和自然深深低共熔溶剂(gydF4y2BaDas et al ., 2016gydF4y2Ba;gydF4y2BaObluchinskaya et al ., 2019gydF4y2Ba)、超临界二氧化碳萃取(gydF4y2BaSaravana et al ., 2017gydF4y2Ba),亚临界水(加压液相萃取)(gydF4y2BaSumampouw et al ., 2021gydF4y2Ba)。其中提取技术,与子和超临界流体萃取得到越来越多的关注。这些提取技术的使用可以帮助缓解毒性问题与使用有机溶剂和选择性的问题。使用超临界二氧化碳萃取可以选择性地提取亲脂性的化合物如颜料和其他脂溶性化合物(gydF4y2BaGetachew et al ., 2020gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

一项研究评估的摘录gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba通过固液萃取(SLE),作为抗氧化剂在鱼oil-enriched蛋黄酱FO模型系统(15%)在28天的存储(黑暗和室温)(gydF4y2BaHermund et al ., 2015gydF4y2Ba)。获得的水提取物显示抗氧化活性形成的脂质氢过氧化物和二次挥发性氧化鱼油产品丰富蛋黄酱(浓度:2.0 g干燥提取/公斤蛋黄酱)。这是与金属螯合能力的水提取自金属螯合在蛋黄酱中是一个重要的抗氧化机制阻碍脂质氧化。gydF4y2Ba

系统性红斑狼疮具体提取方法不如上面提到的其他人。因此,在目前的研究中,目的是提取两种不同分数的抗氧化剂具有不同极性和评估他们在蛋黄酱的抗氧化功效。因此,亲脂性的一部分gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba获得了用超临界CO吗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba用乙醇作为co-solvent。提取水溶性抗氧化剂使用亚临界水萃取干燥gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba从超临界CO或残留物gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取,为潜在的multi-extraction方法。提取被添加到鱼oil-enriched蛋黄酱模型系统(2 g / kg蛋黄酱)来评估他们的能力来改善氧化和物理存储期间稳定的蛋黄酱。亲脂性的之间的协同效应和蛋黄酱亲水提取物也评估模型系统(2 + 2 g / kg蛋黄酱)。提取物的抗氧化功效评估在蛋黄酱与著名的抗氧化配方,EDTA,积极控制,没有抗氧化剂加入蛋黄酱是包括作为一个消极的控制。这一研究获得的结果是第一的,将有助于研究作成的抗氧化剂的食物容易脂质氧化。gydF4y2Ba

2材料和方法gydF4y2Ba

2.1海藻收集和样品制备gydF4y2Ba

棕色海藻gydF4y2Ba岩藻vesiculosusgydF4y2Ba于2020年5月收获从贝尔维尤海滩(55°46′17.4 N 12°35′48.4 E),丹麦。收获海藻后立即送往实验室用自来水冲洗去除沙子和附生植物海藻和立即冻结在−40°C。时间从收获到冻结了大约2 h。冷冻海藻后来冻干在基督里冷冻干燥机β1 - 8(德国)2天,然后用捣碎机粉(VWR)和已筛去除大颗粒(>Ø1毫米)。存储的海藻粉是冻结在−20°C与氮后清除,以避免氧化。gydF4y2Ba

2.2提取gydF4y2Ba岩藻vesiculosusgydF4y2Ba

得到了三种类型的提取使用先进、高效、绿色开采技术。超临界有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取被用来提取脂质部分和高脂溶性抗氧化剂,如类胡萝卜素。亚临界水萃取提取极性化合物,也可能在其他酚类抗氧化剂,抗氧化多糖和蛋白质/多肽。潜在的脂溶性抗氧化剂和极地multi-extraction被包括在研究亚临界水萃取进行干海带和超临界CO后的残留物gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取。gydF4y2Ba

2.1.1超临界有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取gydF4y2Ba

的提取gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba进行了使用超临界流体系统连接MV-10 ASFE系统(水域,米尔福德,马01757,美国)。进行了提取与之前提取条件进行了优化。,10 g的干和接地海藻粉(< 1毫米)是用25毫升提取血管连接到超临界COgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba进口和提取输出线然后放在烤箱。有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba被注入到提取容器达到所需的压力使用液体输送模块(水域Corp .,曼彻斯特,英国)经过冷却热交换器。的有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和co-solvent(乙醇)流量分别7毫升/分钟和1.5毫升/分钟。提取温度和压力分别为40°C和250条。提取是在一个周期进行静态(10分钟)和动态提取(110分钟)。动态提取阶段是在不同条件下进行的。第一100分钟的提取,提取了co-solvent的存在和过去10分钟,co-solvent停止的流动,同时保持相同的流量有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba删除所有剩余溶剂提取。提取完成后,系统减压收集提取和残渣。剩下的溶剂使用氮气流中提取获得最终的提取编码SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2Bae .最后,提取和残渣被保存在一个冰箱在−20°C到需要进行进一步分析。gydF4y2Ba

2.1.2亚临界水萃取gydF4y2Ba

使用加速溶剂提取器提取了ASE (ASE 350年Dionex桑尼维尔,美国)。对于每一个实验,1 g的干海带粉(代码:SCWE)或海藻粉残留(代码:SCWE-R)在超临界COgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取和2 g渥太华砂混合并加载到10毫升提取细胞配有玻璃纤维过滤器的底部。每个实验使用最大操作压力的10条,冲洗量60%,100年代的清洗时间。提取温度为160°C。提取时间是5分钟。平衡所需的时间的提取条件提取完成后,后9分钟。提取收集瓶的自动提取收集并存储在−20°C。提取干在冷冻干燥机(基督冷冻干燥机β1 - 8,德国)被冻结在−后1天20°C。gydF4y2Ba

2.3提取characterization-Antioxidant化合物和gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba抗氧化性能gydF4y2Ba

2.3.1总酚含量gydF4y2Ba

总酚含量(TPC)决心使用Folin-Ciocaltau试剂进行量化。协议是根据我们之前的研究(gydF4y2BaSabeena Farvin雅各布森,2013gydF4y2Ba)。简而言之,100年µL适当稀释提取的混合750µL Folin-Ciocalteu试剂在水中(10% v / v) 1.5毫升塑料microcuvette。孵化后的混合5分钟在黑暗中,在室温下750µL碳酸钠(NagydF4y2Ba_2gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba_3gydF4y2Ba在水中,7.5% w / v)补充道。这个解决方案完全混合和孵化90分钟。最后,这种混合物的吸光度为725 nm使用分光光度计(日本岛津公司紫外线mini 1240,杜伊斯堡,德国)。每个提取的TPC价值以一式三份(n = 3)均值±标准差和报告。没食子酸的TPC被计算为毫克当量(毫克GAE)每100克干海藻或残留物从第一个提取基于六点浓度标准曲线不同的高卢(7.81 -250μg /毫升)gydF4y2Ba

2.3.2色素成分gydF4y2Ba

色素分析是根据(gydF4y2BaLjubic et al ., 2019gydF4y2Ba),小的修改。简单地说,SCCO大约10毫克gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE在离心管重,包含二叔丁基对甲酚添加10毫升的甲醇,在声波降解法和混合一直浴(Buch &河中沙洲/ S、丹麦)10分钟5±2°C到完全溶解提取。颜料的分析是由使用安捷伦1100液相色谱仪,高效液相色谱二极管阵列检测器(爸爸)(安捷伦科技,圣克拉拉,CA,美国)。进行分离Zorbax Eclipse C8柱150 mm×46毫米×3.5μm (Phenomenex Inc . Santa Clara,美国)60°C。流动相的混合70%甲醇+ 30%的0.028米叔丁基醋酸铵在水和甲醇流量1.1毫升的分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}总收购时间40分钟。济色素标准混合(济实验室产品,Horsholm、丹麦)是用于峰的识别。检测叶绿素和类胡萝卜素在660 nm和440 nm)完成,分别为内部标准(二叔丁基对甲酚)280海里。色素提取的报告为毫克/ g。分析进行了一式两份(n = 2)和结果报告为±SD方法。gydF4y2Ba

2.3.3gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba抗氧化性能gydF4y2Ba

2.3.3.1自由基清除能力gydF4y2Ba

萃取物的DPPH自由基清除活性是评价后我们之前的研究(gydF4y2BaGetachew et al ., 2022gydF4y2Ba)。简单地说,一个整除(100µL)的提取浓度2毫克/毫升蒸馏水被转移到96 -微量滴定板。在乙醇100µL DPPH(0.1毫米)被添加到每个。这些混合物在室温下培养30分钟之后在黑暗条件下,每一个混合物的吸光度测量的波长517 nm BioTek Eon标(Winooski VT,美国)。一式三份的分析(n = 3),结果在抑制%浓度2毫克/毫升甲醇/去离子水提取。二叔丁基对甲酚作为彻底清除控制(0.2毫克/克)有效的结果(抑制74.07%)。gydF4y2Ba

2.3.3.2亚铁螯合性能gydF4y2Ba

提取的铁螯合亚铁能力评估后我们之前的研究(gydF4y2BaGetachew et al ., 2022gydF4y2Ba)。总之,100μL抗氧化提取物浓度的2毫克/毫升用移液器吸取到一个96 -微量滴定板其次是增加110μL蒸馏水和20μL氯化亚铁溶液(0.5毫米)。3分钟后孵化20μL ferrozine解决方案(2.5毫米)被添加到每个。板是孵化在室温下10分钟的黑暗。最后,吸光度测量在562 nm BioTek Eon标(Winooski VT,美国)。一式三份的分析(gydF4y2BangydF4y2Ba= 3),结果在抑制%的浓度2毫克/毫升甲醇/去离子水提取EDTA是包括一个金属螯合控制(0.2毫克/克)有效的结果(抑制% = 99.8)。gydF4y2Ba

2.4准备蛋黄酱和颜色的决心gydF4y2Ba

六种不同类型的蛋黄酱(80%石油w / w, 1:4鱼油:菜籽油)准备根据(gydF4y2Ba迈耶et al ., 1996gydF4y2Ba)做了一些调整。gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba显示了不同的配方,这阶段不同抗氧化剂补充道。的颜色的蛋黄酱准备根据后立即测量gydF4y2BaPoyato et al。(2017)gydF4y2Ba获取颜色坐标L, a, b。的测量进行了一式三份。gydF4y2Ba

2.5测量的物理和氧化稳定性gydF4y2Ba

2.5.1液滴大小分布gydF4y2Ba

液滴尺寸分析,每个蛋黄酱(1 g)分散在9 g的SDS缓冲区(10毫米不gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba阿宝gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba7、5毫米SDS、pH值)和解决方案是旋转的在室温下混合0.5分钟。之后,样本被放置在一个超声波浴(30°C, 20分钟)。这种基因混合过程再次重复。的油滴大小的蛋黄酱决心使用激光衍射Mastersizer 2000(莫尔文仪器有限公司,伍斯特,英国)根据描述的方法gydF4y2Ba雅各布森et al。(1999)gydF4y2Ba在7天、28天的评分。结果随着表面加权(D[3 2])和成交量加权(D [4 3]) (gydF4y2BangydF4y2Ba= 2)。gydF4y2Ba

2.6脂质相分离gydF4y2Ba

的脂质阶段蛋黄酱被离心分离(1620gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟4°C)解冻后的冷冻蛋黄酱。浮在表面的油阶段是收集并用于生育酚和过氧化值分析(gydF4y2BaHermund et al ., 2015gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

2.7生育酚含量gydF4y2Ba

蛋黄酱的油相溶解在庚烷和分析了高效液相色谱法(安捷伦1100系列,安捷伦科技)根据(gydF4y2Ba家出版社,1997年gydF4y2Ba)量化的内容α-、β-、γ-和δ-tocopherols样本(γ-和δ-tocopherols结果gydF4y2Ba补充表S1gydF4y2Ba)。这些生育酚同系物分离使用硅胶柱(水域,爱尔兰都柏林,150毫米,4.6毫米,3µm二氧化硅膜)。股票的解决方案添加10毫克天然维生素e(α-、β-、γ-和δ-tocopherols)每升准备和用于量化。分析是在重复做(gydF4y2BangydF4y2Ba= 2)和结果报告为µg生育酚/ g蛋黄酱。天然维生素e的相对变化(RC %)从0到28天计算。gydF4y2Ba

2.8主要氧化产品:过氧化值(PV)gydF4y2Ba

所有的蛋黄酱的PV使用方法所描述的决心gydF4y2Ba到了和德克尔(1994)gydF4y2Ba。获得的油相如2.6节所述用于分析光伏随后测量脂质提取通过分光光度计比色测定的硫氰酸铁(日本岛津公司,紫外线mini 1240,日本京都)在500海里。复制(gydF4y2BangydF4y2Ba= 2)从同一样品进行了测量。结果PV表示为毫克当量OgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba/公斤石油。gydF4y2Ba

2.9二次氧化产品:挥发性化合物gydF4y2Ba

Tenax GR™包装管被用来收集动态顶空挥发性化合物。挥发性化合物的集合进行了样本(包括使用4 g的蛋黄酱。int.std 30毫克。4-methyl-1-pentanol)。挥发性次生氧化产品收集60°C之后,用氮气冲洗(150毫升/分钟的流量)30分钟将水从Tenax管(gydF4y2BangydF4y2Ba= 3),蛋黄酱样本,挥发性酸被删除0.1 g KOH在顶部空间集合,用KOH S-tube的连接,所述gydF4y2BaHartvigsen et al。(2000)gydF4y2Ba。被困挥发物眠使用自动热解吸塔(atd - 400,优秀的,诺沃克,CT)连接到一个安捷伦惠普5890气相色谱仪花絮”模型配备了5972质量选择检测器。色谱分离挥发性化合物进行DB1701列(ID 30 m×0.25毫米×0.5µm膜厚度,J&W科学、福尔松的,CA,美国)使用氦气流(1.3毫升/分钟)。蛋黄酱的温度程序如下:3分钟35°C, 3°C /分钟从35到120°C, 7°C /分钟120 - 160°C, 15°C /分钟160 - 200°C, 4分钟在200°C。牛奶的温度程序:5分钟45°C, 1.5°C /分钟从45到55°C, 2.5°C /分钟从55到90°C, 12°C /分钟从90年到200°C, 4分钟在200°C。9.2 psi autosampler收集器设置细节,出口分裂:5.0 mL / min,和解吸流程:60毫升/分钟。量化,校准曲线是准备从外部标准加入蛋黄酱不添加海藻提取物。然后,挥发物以同样的方式收集样品。分析了一式三份(gydF4y2BangydF4y2Ba= 3),结果给出了ng / g的蛋黄酱。gydF4y2Ba

2.10统计分析gydF4y2Ba

统计分析使用起源软件(OriginPro 2021)。根据不同的数据集进行了单向和双向方差分析Bonferroni紧随其后gydF4y2Ba事后gydF4y2Ba分析来确定之间的显著差异的存在意味着不同的值。所有重要的水平进行了分析gydF4y2BapgydF4y2Ba值≤0。。gydF4y2Ba

3结果与讨论gydF4y2Ba

三个在目前的研究中得到了提取;SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE,亲脂性的分数,这是获得使用超临界COgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取和SCWE SCWE-R,极地分数,与亚临界水提取。SCWE是干gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba和SCWE-R超临界CO后的残渣gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取提取后的亲脂性的分数。gydF4y2Ba

图1gydF4y2Ba显示结果的特征提取。的SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE和SCWE显示最高的和最低的TPC 85.31±0.48, 35.78±0.67毫克GAE / g提取分别与没食子酸当量GAE意义。与超临界提取有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba补充了乙醇作为助溶剂。这可以提高酚类化合物的溶解度,从而增加TPC (gydF4y2BaSaravana et al ., 2017gydF4y2Ba)。GAE TPC更低(36.9毫克/ g海藻)报道了gydF4y2BaSumampouw et al。(2021)gydF4y2Ba谁使用与hydroethanolic加压液相萃取溶剂提取。在另一项研究中,gydF4y2BaAgregan et al。(2017)gydF4y2BaGAE报道11.5毫克/克海带海藻相同类型的物种在室温下使用水作为提取溶剂。然而,更高的TPC被报道gydF4y2BaPoyato et al。(2017)gydF4y2Ba那些报道,143.7毫克GAE / ggydF4y2Baf . vesiclusosgydF4y2Ba使用传统方法提取采用100%水作为提取溶剂。TPC取决于类型的海草,地理位置,丰收的季节,海藻的收获阶段,提取方法用于获得提取(gydF4y2BaGetachew et al ., 2022gydF4y2Ba)。不同溶剂萃取的方法,本研究中使用的方法能够选择性地提取亲脂性的和亲水性分数。gydF4y2Ba

表2gydF4y2Ba显示了SCCO色素含量gydF4y2Ba_2gydF4y2Bae .总共九个不同颜料被确定。叶绿素a显示值最高,其次为墨角藻黄素脱镁叶绿素和130.75±11.07,44.86±.09点,分别为22.59±0.52毫克/克的提取。从这些报道这些值是不同的gydF4y2BaHermund et al。(2015)gydF4y2Ba发现更低价值10.0±1.5毫克/克叶绿素的提取和几乎同样的价值观的岩藻黄质(43.0±1.9毫克/克提取)。差异可能是由于提取方法用于获得提取。在gydF4y2BaHermund et al。(2015)gydF4y2Ba提取是利用传统的系统性红斑狼疮中恢复过来。观察到的差异的另一个原因可能是海藻的收获季节。亚临界水萃取得到的提取物不包含任何叶绿素或没有分析。gydF4y2Ba

表3gydF4y2Ba显示了提取物的抗氧化活动。抗氧化剂测定的DPPH自由基清除能力和亚铁螯合能力2毫克/毫升的浓度。标准铜线和SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE显示最高的和最低的DPPH自由基清除能力为83.5±1.7,77.5±22.8%,分别。一个SCWE期望较高的抗氧化活性,因为不同于标准铜线,TPC等化合物,这有助于抗氧化活性,不删除。然而,没有显著差异(gydF4y2BapgydF4y2BaSCWE和标准铜线之间的< . 05)。这样做的原因可能是细胞的结构由超临界COgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba,这将使其余化合物提取更容易接受。同样,这两个提取物也表现出最高的二价铁螯合能力与ca。50%的抑制。SCCO的黑色铁螯合能力gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE显著不同的亚临界水萃取得到的提取物。我们之前的研究(gydF4y2BaGetachew et al ., 2022gydF4y2Ba在亚临界水萃取gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba显示大量的多糖藻朊酸盐,最后提取。在这项研究中,提取显示与IC DPPH自由基清除活性gydF4y2Ba_50gydF4y2Ba值为0.14毫克/毫升和金属螯合能力集成电路gydF4y2Ba_50gydF4y2Ba提取获得的1.39 mg / mL值分别为160°C和120°C。多糖如摘要研究和海藻酸、蛋白质和肽可以有金属螯合能力。的黑色铁螯合能力的差异提取可能是由于这种多糖的存在和其他金属螯合物种在亚临界水提取。gydF4y2Ba

3.1贮存稳定性的鱼oil-enriched蛋黄酱gydF4y2Ba

3.1.1在存储物理特性和稳定性gydF4y2Ba

SCCO如上所述gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE提取叶绿素a含量很高,因此有一个绿色的颜色。因此,添加SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba导致了绿色的蛋黄酱。亚临界水提取(SCWE和SCWE-R)给了蛋黄酱褐色的颜色(包括没有色素的数据)。gydF4y2BaPoyato et al。(2017)gydF4y2Ba发现棕色颜料水提取物中占据主导地位gydF4y2Ba岩藻vesiculosusgydF4y2Ba(2.17毫克/毫克提取叶黄素和胡萝卜素,1.72毫克/毫克提取)相比,绿色色素(叶绿素,0.46毫克/毫克提取)导致褐色的颜色当提取物添加到护肤乳液。控制蛋黄酱没有提取和蛋黄酱添加了EDTA更白(l值高gydF4y2Ba表4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

在gydF4y2Ba表4gydF4y2Ba蛋黄酱的颜色测量样本所示。绿色与SCCO彩色的蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba结合SCWE-R时E添加(也)有明显高于b值比其他样本。此外,这些样本绿色(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)显示一个较低的值和最黑暗的所有样本(l值明显降低)。SCCO的绿色gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE与叶绿素尤其是叶绿素含量高(130.75±11.07毫克/克),而在更高的程度上提取与超级重要的公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba提取的亲脂性的分数。单独添加时,水提取物(SCWE和SCWE-R)显著增加了红色(值)的蛋黄酱相比其他样品,导致褐色蛋黄酱样本。此外,蛋黄酱和样品SCWE和SCWE-R明显暗比控制和蛋黄酱(l值)与EDTA补充道。这表明水提取物含有更多比SCCO水溶性色素gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE。gydF4y2BaHonold et al。(2016)gydF4y2Ba表明,水提取物从SPE获得含有胡萝卜素a和b而ethanolic提取包含更多的叶绿素。这些结果支持色素成分的差异取决于萃取溶剂。gydF4y2Ba

油滴粒径分布(DSD)也是影响提取的蛋黄酱。gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba显示了D [4 3] (a)和D (3 2) (b)后的蛋黄酱样本值7和28天的存储。D(3 2),液滴的表面意思,没有显著改变从7天到28天,和样品之间没有显著差异,表明油滴大小的蛋黄酱样本存储期间并没有改变。D(3 2)与SCCO蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE和标准铜线添加组合有一大批标准差表明可能存在相分离,这使得它难以衡量DSD。当看着D(4 3)值,与SCCO蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE添加显示显著更高的价值比控制(和样品添加EDTA)。此外,价值显著增加从7天到28只与SCCO蛋黄酱样本gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE补充道。当添加SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE结合SCWE-R 8 x值高于所有其他样品,但没有从第七天增加到28个。因此,这个示例有高比例的大液滴比其他样本,导致更高的D(4 3)值。大液滴有更高的体重比D D[4 3](3 2),这就解释了为什么相同的样本之间的差异和存储天没有观察到D(3 2)至于D [4 3]。D(4 3)和D(3 2)的蛋黄酱样本值在7天(除了蛋黄酱SCCO2E和标准铜线添加相结合),在协议withpreviousfindings这种类型的食品系统(gydF4y2Ba雅各布森et al ., 2001gydF4y2Ba)。DSD增加一些蛋黄酱样本28天7天,表明乳剂的不稳定。gydF4y2Ba

3.1.2氧化稳定性在存储gydF4y2Ba

氧化的蛋黄酱的变化确定贮存脂质氢过氧化物的发展期间,维生素e和二次氧化挥发性产品。gydF4y2Ba

脂质氢过氧化物的发展蛋黄酱存储被确定为发展中过氧化值(PV)为每个示例所示gydF4y2Ba图3gydF4y2Ba。脂质氢过氧化物的控制蛋黄酱显著增加(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)中存储从0±0到22.8±0.5毫克当量OgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba/公斤石油。没有明显的(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)增加光伏在蛋黄酱和75 ppm EDTA补充道,而在蛋黄酱添加了海藻提取物(2 g / kg SCWE SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE, SCWE-R或SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE + SCWE-R)显著增加(gydF4y2BapgydF4y2Ba在发现了PV < . 05)。光伏与EDTA样本、SCWE或SCWE-R添加从大约0.0毫克当量增加OgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba/公斤石油2.1±0.5,15.8±0.5,14.5±0.3毫克当量OgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba/公斤石油分别为28天,。光伏与SCCO样本gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE或SCCO2E结合SCWE-R (SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE + SCWE-R)有显著较高的初始光伏(PV第0天)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)为5.1±0.2,4.4±0.1毫克当量OgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba/公斤石油分别比其他样本。这些样本的高初始PV表明脂质氢过氧化物的形成已经在生产蛋黄酱或SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE含有过氧化物本身。此外,降低光伏观察后21天与SCCO示例gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE增加,表明脂质氢过氧化物的分解二级氧化产品。gydF4y2Ba

滞后阶段光伏发展的观察样本,除了与EDTA补充说,因为没有显著增加光伏从第0天、28天。3天的滞后阶段被发现与SCCO蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE或当SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE是结合SCWE-R补充道。控制和蛋黄酱添加了SCWE迟滞期是7天,当SCWE-R添加了迟滞期是14天。EDTA、SCWE SCWE-R显示抗氧化活性与氢过氧化物的形成,降低形成的PV时观察到这些化合物被添加到蛋黄酱相比控制。另一方面,与SCCO样本gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE或SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE + SCWE-R补充道,prooxidant活动观察PV的形成是高相比,这些样本的控制。这表明SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE是prooxidative。基于这些结果似乎只有SCWE和SCWE-R能够减少脂质氢过氧化物的形成。SCWE和SCWE-R非常相似的抗氧化性能(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba),比如中度到高金属螯合能力。都溶于水相,在那里他们可以作为次要的抗氧化剂,防止脂质氧化的起始螯合过渡金属如铁。其他的研究也发现滞后阶段形成的主要氧化产品7天当水提取物gydF4y2Ba岩藻vesiculosusgydF4y2Ba作为抗氧化剂加入蛋黄酱(gydF4y2BaHermund et al ., 2015gydF4y2Ba;gydF4y2BaHonold et al ., 2016gydF4y2Ba)。然而,gydF4y2BaHermund et al。(2015)gydF4y2Ba发现光伏在28天蛋黄酱添加了水提取物(浓度的2 g / kg),类似于PV对蛋黄酱添加EDTA在目前的研究中,表明较低的亚临界水萃取得到的提取物的抗氧化功效比传统的SPE。gydF4y2Ba

尽管SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE没有显示抗氧化活性与脂质氢过氧化物的形成,这种提取物对脂质氢过氧化物的分解成二次氧化产品。SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE是将位于油相化合物像岩藻黄质(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)可能清除脂质氧化中间体氢捐赠。因此,为了更好地理解海藻提取物的抗氧化机制加入蛋黄酱,我们调查的形成次生氧化产品。gydF4y2Ba

气味和味道恶化引起的脂质包含产品主要是由挥发性次生氧化化合物的存在,它有一个在极低的浓度对气味和风味的影响。化合物形成的脂质氢过氧化物的分解存储可以与不饱和脂质反应形成稳定的和无害的化合物或进行破碎在不饱和醛和酮导致酸败矩阵(gydF4y2Ba弗兰克尔,1998gydF4y2Ba)。在目前的研究中,12个挥发性次生氧化产品从样品确认,其中大多数曾经伴随着氧化fish-oil-enriched蛋黄酱(gydF4y2BaHartvigsen et al ., 2000gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba图4gydF4y2Ba显示了两个代表(戊醛和1-penten-3-ol)挥发性次生氧化产品的开发。gydF4y2Ba

脂质氢过氧化物的发展趋势一样(gydF4y2Ba图3gydF4y2Ba)被发现戊醛的发展,但有一个例外;即SCWE有轻微prooxidative影响戊醛形成(戊醛浓度明显高于3和21天(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)控制)和抗氧化剂相比,影响脂质氢过氧化物的形成。蛋黄酱和SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE添加单独或结合SCWE-R显示更高的初始浓度和没有迟滞期戊醛,戊醛的浓度是5 - 6倍的存储相比其他样品,清楚地表明SCCO prooxidant活动gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE。gydF4y2Ba

当SCCO初始值越高gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE添加可能表明该提取包含一些氧化产品本身。SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE是产生高压,这可能会导致某种程度的氧化提取,因此氧化产品可能出现在最终的提取。gydF4y2BaHermund et al。(2015)gydF4y2Ba还发现高初始浓度的初级和二级氧化产品添加提取时通过SPEgydF4y2Ba岩藻vesiculosusgydF4y2Bafish-oil-enriched牛奶。这些牛奶样本通过高压均质化与鱼油,引起氧化形成的产品已经在生产样品。这表明一些海藻萃取液中化合物prooxidative在特定条件下。类似的反应可以发生亲脂性的SCCOgydF4y2Ba_2gydF4y2BaE在生产和氧化产品可能已经在这个阶段形成。然而,这值得进一步的研究。当EDTA加入蛋黄酱没有显著增加戊醛或1-penten-3-ol被观察到。1-penten-3-ol形成的所有样本提取addedshowed迟滞期7天,但最终浓度较低的样品相比,控制。因此,与戊醛,没有SCCO prooxidant活动gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE观察1-penten-3-oil的形成。因此,所有的海藻提取物显示抗氧化活性的形成1-penten-3-ol从14天(gydF4y2BapgydF4y2Ba< . 05)。以来,脂质氢过氧化物从n - 3 PUFA接受β-scission形式戊醛和1-penten-3-ol 1-penten-3-one(可以进一步降低),戊醛浓度越高与SCCO蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE添加表明戊醛存在提取,还讨论了以上。gydF4y2Ba

图5gydF4y2Ba显示了不同的PCA bi-plot中等挥发性以及它们与样品氧化产品。示例添加了EDTA远离挥发性化合物,这意味着他们有低价值的挥发物,也是所示gydF4y2Ba图5gydF4y2Ba非常低浓度的挥发物在整个存储在这个示例。与SCCO样品gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE添加戊醛,1-pentanol和2-heptenal高度,而控制和示例包含SCWE或SCWE-R提取物添加其他挥发性化合物(2-ethylfuran 1-penten-3-one,戊醛,1-penten-3-ol, 2-pentenal, 1-pentanol,乙醛,2-hexenal,庚醛,2-heptenal, 2, 4-heptadienal, t, c - 2, 6-nonadienal)。gydF4y2Ba

SCCO的抗氧化活性gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE对1-penten-3-ol的形成可以提取的位置有关,在油相,减少脂质氢过氧化物的分解1-penten-3-ol相比在更高的程度上控制比它可以防止脂质氢过氧化物的分解戊醛等其他挥发性氧化产品。这种差异的确切机制需要进一步研究。gydF4y2Ba

没有协同效应观察到通过使用水和油溶性提取物的组合。然而,可以自SCCO没有明确的结论gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE本身可能有高浓度的氧化产品。在之前研究海藻提取物添加到护肤品乳剂与杏仁油(水包油乳状液),生育酚在油相之间的协同效应(自然)和表面活性的酚类化合物或色素(从海藻萃取液)被发现和被认为是由于生育酚的氧化再生皮肤护理tocopheroxyl自由基氧化过程中形成乳剂含海藻提取物(gydF4y2BaPoyato et al ., 2017gydF4y2Ba)。因此,它不能排除,两亲性抗氧化化合物将更有效而不是石油或水溶性抗氧化剂蛋黄酱。这需要进一步的研究,例如,在一个分区研究抗氧化剂的提取。gydF4y2Ba

表5gydF4y2Ba显示了不同的生育酚同系物(阿尔法、β和γ)中发现的样本,包括相对变化(RC %)期间观察到的存储。天然维生素e油中用于生产蛋黄酱。天然维生素e的消费在存储的样品指示使用这些抗氧化剂和氧化发生(gydF4y2Ba弗兰克尔,1998 bgydF4y2Ba)。α-生育酚含量减少从第0天、28天的蛋黄酱,控制与SCCO和蛋黄酱gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE或SCWE-R补充说,当这两种提取物的总和。这表明α-生育酚作为抗氧化剂和氧化水平在这些样本可能会更高。gydF4y2Ba阿雷曼et al。(2015)gydF4y2Ba还发现在蛋黄酱α-tocopherol退化存储28天。研究结果部分在协议与其他氧化结果在目前的研究中,当SCCO显示更多的氧化gydF4y2Ba_2gydF4y2BaE是添加到蛋黄酱。gydF4y2Ba

4结论gydF4y2Ba

脂质氧化和后续质量退化的食物和其他消费产品在含有不饱和脂类的产品是一个重大的挑战。为了解决这个挑战,antioxidants-mostly合成背景添加到减缓脂氢过氧化物的形成及其退化/二次氧化产品。然而,越来越多的消费者意识的合成抗氧化剂的副作用导致追求从天然抗氧化剂来源。在这项研究中,亲水和疏水从北欧海藻提取抗氧化剂gydF4y2Baf . vesiculosusgydF4y2Ba利用超临界二氧化碳和亚临界水萃取技术。蛋黄酱配方的提取物被添加在不同阶段旨在阻碍脂质氧化在蛋黄酱。亲水和疏水分数显示缺陷的脂质氧化与亲水提取物显示出更好的性能。SCWE和标准铜线提供同样好的抗氧化效果,可能由于高水平的金属螯合物种在这些提取物。没有协同作用观察之间的亲水亲脂的提取。然而,需要进一步的研究来理解哪些类化合物的提取负责制定蛋黄酱中脂质氧化的缺陷。gydF4y2Ba

数据可用性声明gydF4y2Ba

原始数据支持了本文的结论将由作者提供,没有过度的预订。gydF4y2Ba

作者的贡献gydF4y2Ba

概念化,DH、AG)和CJ;正式的分析。王;原创作品草稿准备,DH和AG);writing-review和编辑,CJ和SH。所有作者已阅读及同意发布版本的手稿。gydF4y2Ba

资金gydF4y2Ba

这项工作已经收到了欧盟的资助下地平线2020研究和创新项目玛丽·斯卡洛多斯卡·居里没有授予协议。713683 (COFUNDfellowsDTU)。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。gydF4y2Ba

出版商的注意gydF4y2Ba

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。gydF4y2Ba

补充材料gydF4y2Ba

本文的补充材料在网上可以找到:gydF4y2Bahttps://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/frfst.2022.1082490/full补充材料gydF4y2Ba

引用gydF4y2Ba