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原始研究的文章gydF4y2Ba

前面。杂志。,16 January 2023
秒。鸟类生理gydF4y2Ba
卷14 - 2023 |gydF4y2Ba https://doi.org/10.3389/fphys.2023.1091520gydF4y2Ba

的蛋喂养的影响绿原酸在产后肉鸡抗氧化能力gydF4y2Ba

www.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2Ba心直口快的锅gydF4y2Ba 1、2gydF4y2Ba,gydF4y2Bawww.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2Ba海林gydF4y2Ba 1、2gydF4y2Ba,gydF4y2Bawww.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2BaHongchao娇gydF4y2Ba 1、2gydF4y2Ba,gydF4y2Bawww.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2BaJingpeng赵gydF4y2Ba 1、2gydF4y2Ba和gydF4y2Bawww.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2Ba小娟王gydF4y2Ba 1、2gydF4y2Ba*gydF4y2Ba
  • 1gydF4y2Ba山东省重点实验室动物生物技术和疾病控制和预防动物科学技术学院,山东农业大学,中国gydF4y2Ba
  • 2gydF4y2Ba重点实验室非谷类饲料资源高效利用的(由省和省Co-construction),农业部和农村事务部,泰安,中国gydF4y2Ba

在这项研究中,绿原酸(注册会计师)的羊膜腔注射到鸡胚蛋喂养的影响研究的注册会计师在产后肉鸡的抗氧化能力。胚胎的年龄17天,共有300名健康肉用鸡肥沃的鸡蛋和类似的权重随机接受五组如下;在蛋注入0.5毫升注册会计师4毫克/蛋排气口(4)或7毫克/蛋排气口(7)或10毫克/蛋排气口(10)、或sham-injection盐水(积极的控制,PC)或没有注射(消极的控制,数控)。每组十有六个复制胚胎。六个健康与类似的身体重量孵出小鸡从每个复制选择长大,直到热应力处理(35°C±1°C, 8 h / d)在28-42天的年龄。结果表明,在孵化率没有显著差异之间的组(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。排气口热应力治疗后,4组显示改善肠道形态由高了十二指肠绒毛高度和更高的空肠绒毛高度/隐窝深度比,与NC组(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。鸡的抗氧化能力是提高蛋喂以来,注册会计师4 CGA降低血浆丙二醛(MDA)含量(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),然而,它增加了超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和过氧化氢酶(CAT)活性与NC组(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。此外,MDA含量不同的注射组的二次效应,与排气口4组MDA含量最低(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05)。在十二指肠,4注册会计师注入的mRNA表达显著增加gydF4y2Ba核因子红细胞两个相关因子2 (Nrf2)、血红素加氧酶1 (H O(1),谷胱甘肽合成酶(GSS),gydF4y2Ba和gydF4y2BaSOD1gydF4y2Ba相比,数控和PC组(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。mRNA表达gydF4y2Ba谷胱甘肽还原酶(GSR)gydF4y2Ba和gydF4y2BaGPX7gydF4y2Ba在所有CGA-treated组相比显著增加电脑集团(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),而mRNA的表达gydF4y2Ba猫gydF4y2Ba显著增加了排气口4组比NC组(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。epigenetic-related基因的mRNA表达,gydF4y2Ba一千零一十一年易位1和2 (Tet1和Tet2),gydF4y2Ba和gydF4y2BaDNA-methyltransferase 3α(DNMT3A)gydF4y2Ba4注册会计师的十二指肠注入组显著增加相比,数控和PC组(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。mRNA表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba,gydF4y2BaSOD1gydF4y2Ba,gydF4y2BaTet2gydF4y2Ba表现出显著的二次效应,排气口4组具有最高的表达式(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05)。总之,蛋喂养的缓解热应激肠道氧化损伤。注入与注册会计师4毫克/蛋被认为是最有效的由于其行动在改善肠道抗氧化能力,尤其是在十二指肠。的抗氧化作用在蛋CGA产后heat-stressed肉鸡可能与监管有关的表观遗传机制。因此,这项研究提供了技术知识支持的蛋给注册会计师减轻氧化应激在产后heat-stressed肉鸡。gydF4y2Ba

介绍gydF4y2Ba

近年来,天然植物和草药物质的有益特性日益得到了研究的兴趣。其中,多酚吸引了太多的关注,因为他们的抗氧化性能。绿原酸是最常见的一种多酚类化合物中发现的饮食。它广泛存在于各种水果和蔬菜,如咖啡、苹果、蓝莓、茄子和菊苣(gydF4y2BaClifford et al ., 2017gydF4y2Ba;gydF4y2Ba燕et al ., 2017gydF4y2Ba)。此外,绿原酸是许多中药的有效成分,如gydF4y2Ba杜仲叶、金银花粳稻FlosChrysanthemi indicigydF4y2Ba和gydF4y2Ba茵陈蒿gydF4y2Ba研究(gydF4y2Ba王et al ., 2020 agydF4y2Ba)。在动物中,绿原酸可以提高生长性能、免疫、肠道屏障和提高生物学功能,如抗炎、抗菌、抗氧化、调节脂质代谢(gydF4y2Ba陈et al ., 2018 agydF4y2Ba;gydF4y2Ba陈et al ., 2018 bgydF4y2Ba)。一些研究还表明,绿原酸可以抑制细菌gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba,因此绿原酸可部分替代抗生素和激素类药物(gydF4y2BaSantana-Galvez et al ., 2017gydF4y2Ba)。同时,绿原酸具有保护作用通过调节氧化应激相关通路。与脑缺血再灌注损伤大鼠,它是证明,绿原酸可以激活核转录因子红细胞两个相关因子2 (Nrf2)通路,促进的表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和gydF4y2Ba血红素加氧酶1 (H O (1)gydF4y2Ba,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性,降低丙二醛(MDA)含量(gydF4y2Ba刘et al ., 2020gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

在蛋喂指在胚胎阶段提供刺激化合物或营养启动表观遗传变化和提高家禽的健康和成长在孵化(gydF4y2BaUni et al ., 2005gydF4y2Ba;gydF4y2BaJha et al ., 2019 agydF4y2Ba;gydF4y2BaBednarczyk et al ., 2021gydF4y2Ba)。胚胎开始在羊水的17天胚胎年龄适合蛋喂食。营养的羊膜腔注入鸡胚胎,然后被小肠吸收通过胚胎吞下(gydF4y2Ba赵et al ., 2018gydF4y2Ba;gydF4y2BaZhang et al ., 2020 agydF4y2Ba)。虽然肠的发展是一个精确的、有序的过程,小肠的功能只能开始开发后胚胎燕子羊水孵化后期阶段(gydF4y2Ba王et al ., 2020 bgydF4y2Ba)。因此,营养的羊膜腔注射到孵化后期可以运到小肠改善肠道的开发(gydF4y2BaWillemsen et al ., 2010gydF4y2Ba)。研究表明,绿原酸能自行或通过其代谢产物。在老鼠和人类,咖啡酸在等离子体绿原酸摄入量之后迅速出现,表明绿原酸水解在胃肠道的上部(gydF4y2BaAzuma et al ., 2000gydF4y2Ba;gydF4y2Ba纳尔迪尼et al ., 2002gydF4y2Ba)。使用一个gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba肠道灌注模型,证实,绿原酸是有效的大鼠小肠的吸收,水解的粘膜,恢复自由在等离子体中酚酸(gydF4y2BaLafay et al ., 2006 agydF4y2Ba)。绿原酸还可以吸收在大鼠胃的完整形式,并且它还确定了老鼠的等离子体口服后不久金银花提取物(gydF4y2Ba孟et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2BaLafay et al ., 2006 bgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

随着全球气候变化,环境变化对动物生产已经成为一个重要的挑战。环境温度是最重要的环境因素影响动物生产和健康,尤其是在夏季在大多数亚热带和热带地区。家禽业是影响最大的行业之一,由环境温度的增加(gydF4y2Ba高尔et al ., 2021gydF4y2Ba)。高环境温度下热中性范围之外的一个最致命的压力在家禽育种(gydF4y2Ba妞妞et al ., 2009gydF4y2Ba)。此外,由于羽毛覆盖和没有汗腺,家禽调节体温的能力很差在高温环境和热应力(尤其敏感gydF4y2Ba胡锦涛等人。,2019年gydF4y2Ba)。据报道,热应力可以发生在各个年龄段的家禽和不同品种(gydF4y2Ba英国人et al ., 2018gydF4y2Ba)。比较不同年龄的动物发现年老的动物(42天)比年轻的动物更容易受到热应力(21天),21-day-old肉鸡抗氧化能力远远大于42-day-old肉鸡暴露在热应力(gydF4y2Ba德尔Vesco et al ., 2017gydF4y2Ba)。热应力会导致减少食物摄取和肠道功能障碍(gydF4y2Ba有着et al ., 2006gydF4y2Ba;gydF4y2Ba歌et al ., 2013gydF4y2Ba)。因此,维护肠道健康是至关重要的减少热应力损伤。氧化应激是指生产过剩的活性氧(ROS)和抗氧化防御的不平衡(gydF4y2BaLykkesfeldt斯文森主持,2007gydF4y2Ba)。在热应力,身体调节更多的血液流向皮肤,而不是内部器官为了便于散热,导致胃肠道缺氧,导致活性氧过剩然后肠道损伤(gydF4y2Ba刘et al ., 2016gydF4y2Ba;gydF4y2Ba古普塔et al ., 2017gydF4y2Ba;gydF4y2BaMcGarry et al ., 2018gydF4y2Ba)。此外,热应激可以诱导脂质过氧化反应(gydF4y2Ba黄et al ., 2015gydF4y2Ba)。这打破了平衡氧化和抗氧化系统(gydF4y2BaZhang et al ., 2018 agydF4y2Ba),并最终导致氧化应激。研究表明,饮食添加抗氧化剂可以降低家禽肠热应力造成的损害(gydF4y2Ba程et al ., 2019gydF4y2Ba;gydF4y2Ba杨et al ., 2021gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba,热应力也被广泛用作诱导的氧化应激(gydF4y2Ba李et al ., 2019gydF4y2Ba;gydF4y2BaYu et al ., 2019gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

缓解热应力的问题,一些研究调查的膳食补充抗氧化物质heat-stressed肉鸡。根据报告的绿原酸和抗氧化性能的影响在蛋喂肠道发展,认为绿原酸的蛋喂养可能提供一个有效的和具有成本效益的方法缓解热应力在家禽。因此,在目前的研究中,在蛋喂养技术被用来补充鸡胚的绿原酸。此后,孵小鸡受到热应激氧化应激为了探索胚胎绿原酸的影响和机制在产后肉鸡的抗氧化能力。gydF4y2Ba

材料和方法gydF4y2Ba

动物和治疗gydF4y2Ba

共有300名健康肉用鸡肥沃的鸡蛋(阿伯英亩,gydF4y2Ba背带家gydF4y2Ba)和类似的体重(平均59 g)是将从本地鱼种场购买(山东六合育种有限公司,中国),随机分为5组,每组有六个复制和10个鸡蛋在每个复制。鸡蛋都是设置在一个孵化器,六个复制(即6托盘)每个治疗组的随机分布在六层的孵化器。羊膜腔注射了17天的胚胎年龄为0.5毫升绿原酸(Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)4毫克/蛋排气口(4)或7毫克/蛋排气口(7)或10毫克/蛋排气口(10)或sham-injected盐水(阳性对照组,PC),或身体组(消极的控制,数控)。绿原酸的剂量计算和确定根据以前的报告由陈(gydF4y2Ba陈et al ., 2021 agydF4y2Ba)。肥沃的蛋在孵化37°C下60% - -70%的相对湿度。gydF4y2Ba

六个健康雏鸡孵化后从每个复制选择类似的身体重量和提高间歇热应力处理(35°C±1°C, 8 h / d,相对湿度60%)在28-42天的年龄。小鸡受到间歇热应力,以更好地模拟环境温度的日变化在夏天季节。小鸡在环境控制管理室和美联储与商业饮食从当地购买饲料工厂(中国山东Zhongcheng)。提供饲料和水gydF4y2Ba随意gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

羊膜腔注射gydF4y2Ba

肥沃的鸡蛋的蛋中蛋注入在无菌环境中执行。小电钻被用来钻一个洞,1毫米直径的顶部鸡蛋气室,1毫升注射器,一次性无菌牙科注射针(0.5×38 TWLB L)被用来将溶液注入到鸡蛋的羊膜腔洞,与注射的深度约25毫米。注射后的孔是用石蜡密封。中绿原酸解制备注射用生理盐水和加热到37°C。gydF4y2Ba

样品收集gydF4y2Ba

孵化时间,小鸡孵出的数量,和小鸡的体重记录。孵化后,每周在1-27鸡的生产性能没有热应力和28-42 d在热应力都被记录下来。27岁时(在热应力)和42 d(热应力),八个健康肉鸡具有类似体重被随机选择从每个治疗称重和取样。禁食后6 h,收集的血翼静脉用5毫升肝素化注射器。血浆样品离心后得到400gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟在4°C和存储在-20°C进行进一步分析。此后,小鸡是由颈椎脱位牺牲和放血。肝脏、心脏、十二指肠、空肠、回肠,胸肌,大腿肌肉被孤立和体重。的长度十二指肠、空肠和回肠测量,约2厘米的每个小肠段的中间部分是降低和固定在4%多聚甲醛溶液histomorphological观察。部分十二指肠、空肠和回肠采样,立即snap-frozen在液态氮,并存储在-80°C进行进一步分析。gydF4y2Ba

等离子体参数分析gydF4y2Ba

等离子体活动的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白的浓度(铝青铜)测量与商业诊断包(四川迈克生物科技工程有限公司,中国)。等离子体活动SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和MDA含量、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)和测量spectrophotometrically与商业诊断试剂盒(南京建成生物工程研究所、中国)。gydF4y2Ba

肠道histomorphological分析gydF4y2Ba

肠道组织形态学观察苏木精和伊红染色被王et al。(gydF4y2Ba黄et al ., 2015gydF4y2Ba)。短暂,肠组织在4%多聚甲醛固定的传统,脱水,嵌入在石蜡。De-paraffinated部分的厚度4μm与哈里斯苏木精和伊红染色(Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)。部分检查下重庆麦克光电子仪器XDS-1B倒置显微镜(中国重庆)。gydF4y2Ba

总RNA提取和实时PCR分析gydF4y2Ba

总RNA提取肠使用商业套装(Xinsaimei、苏州、中国)。核糖核酸的浓度是衡量分光光度法(埃普多夫,汉堡,德国)和RNA纯度验证了通过计算吸光度值之间的比例在260年和280海里(A260/280≈1.75 - -2.01)。接下来,使用总RNA进行逆转录(1μg)互补脱氧核糖核酸合成的装备(Cowin,北京)。互补脱氧核糖核酸在20-μL PCR反应放大系统根据制造商的指令(Cowin,北京)。实时PCR在ABI QuantStudio 5 PCR机(应用生物系统公司,卡尔斯巴德,CA)。实时PCR进行predenaturation 30年代在95°C,紧随其后的是40个周期,每个周期在95°C组成的变性5 s和退火和延伸60°C 30年代。所有样品都是在重复运行,和特异性扩增产品验证的标准曲线和溶解曲线。引物用于本研究使用引物5.0软件设计和合成Sangon生物技术(上海,中国,gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。引物对GAPDH被用作内部控制,比较CT和mRNA表达量化方法(2gydF4y2Ba- - - - - -△△CtgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表1gydF4y2Ba
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表1gydF4y2Ba。Gene-specific底漆的相关基因。gydF4y2Ba

统计分析gydF4y2Ba

数据分析是由单向方差分析使用SAS统计软件SAS 9.1版本;SAS研究所Inc ., 2004)。差异意味着使用邓肯的多个范围测试进行评估。所有的值都表示为±SE。正交多项式用于趋势对比测试研究绿原酸注射不同浓度的线性和二次效应。gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05意味着差异显著,和0.05 pgydF4y2Ba< 0.1意味着有一个倾向的意义。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

孵化性能gydF4y2Ba

排气口的孵化高峰时间4组比早些时候4 h NC组和2 h比早些时候电脑集团(gydF4y2Ba图1一个gydF4y2Ba)。孵化率没有显著差异,在孵化蛋的体重,体重组(孵化小鸡的gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05,gydF4y2Ba图1罪犯gydF4y2Ba)。没有明显班轮或二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba> 0.05;gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)。gydF4y2Ba

图1gydF4y2Ba
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图1gydF4y2Ba。绿原酸的蛋喂养对孵化的影响肉鸡的性能。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba孵化时间;gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba孵化率,gydF4y2BangydF4y2Ba= 6;gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba在孵化蛋的重量,gydF4y2BangydF4y2Ba= 6;gydF4y2Ba(D)gydF4y2Ba孵化肉鸡的体重,gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

生产性能和死亡率gydF4y2Ba

之间没有显著差异生产性能绿原酸治疗和控制(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05),但饲料/获得1-27 d与绿原酸的浓度增加,线性效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba< 0.05)。组(尽管没有显著区别gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05),死亡率最高的NC组(19.44%)和排气口最低4组(8.33%)。没有明显的二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表2gydF4y2Ba
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表2gydF4y2Ba。蛋喂养的绿原酸的影响肉鸡的生产性能和死亡率。gydF4y2Ba

器官发育gydF4y2Ba

27岁d没有热应力时,心脏的肉鸡比例显著增加排气口在10(0.48%)组比PC组(0.38%)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),空肠比例线性效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba< 0.05),而且没有观察到的变化对其他器官(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。蛋喂养的绿原酸对所有器官重没有显著影响heat-stressed肉鸡在42 d的年龄(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。没有明显的二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表3gydF4y2Ba
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表3gydF4y2Ba。绿原酸的蛋喂养对器官的影响比例的肉鸡。gydF4y2Ba

27 d-broilers没有热应力,排气口4组(277.68毫克/厘米)空肠指数高于NC组(243.76毫克/厘米)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。相对于数控(140.15毫克/厘米)或PC组(140.34毫克/厘米),回肠指数显著增加排气口4组(163.09毫克/厘米)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),而没有发现变化42 d-heat强调肉鸡肠道器官指数(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。没有明显班轮或二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba> 0.05;gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)(gydF4y2Ba表4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表4gydF4y2Ba
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表4gydF4y2Ba。绿原酸的蛋喂养对肠道的影响肉鸡的质量指标。gydF4y2Ba

等离子体生化参数gydF4y2Ba

42 d-heat强调肉鸡,AST活性在排气口4组(253.88 U / L)显著降低与NC组(328.50 U / L)和PC组(309.75 U / L) (gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。高山的内容在所有绿原酸治疗组(平均1232.35 U / L)明显低于NC组(2110.75 U / L) (gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。然而,没有观察到变化为其他生化参数(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。没有明显班轮或二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba> 0.05;gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

图2gydF4y2Ba
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图2gydF4y2Ba。绿原酸的蛋喂养对等离子体的影响42 d-heat强调肉鸡的生化参数。gydF4y2Ba(一)gydF4y2BaALT;gydF4y2Ba(B)gydF4y2BaAST;gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba高山;gydF4y2Ba(D)gydF4y2BaCK;gydF4y2Ba(E)gydF4y2BaLDH;gydF4y2Ba(F)gydF4y2BaTP;gydF4y2Ba(G)gydF4y2Ba铝青铜。*表示治疗之间的显著差异(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

等离子体氧化和抗氧化参数gydF4y2Ba

42 d-heat强调肉鸡,排气口的MDA含量4组(0.58 nmol /毫升)和排气口7组(1.31 nmol /毫升)显著降低与NC组(1.86 nmol /毫升)和PC组(1.93 nmol /毫升)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。同时,排气口的MDA含量4组(0.58 nmol /毫升)明显低于排气口的7组(1.31 nmol /毫升)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。MDA含量不同的注射组的二次效应,与排气口4组MDA含量最低(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05)。与NC组(SOD 10.97 U /毫升;GPX 1585.95 mol / L), SOD、GPX活动在所有绿原酸洗组(平均SOD 14.15 U /毫升;(GPX 1973.57 mol / L)显著高于gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。猫的活动在排气口4组(6.34 U /毫升)明显高于对照组(平均4.66 U /毫升)和其他绿原酸洗团体(平均4.05 U /毫升)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。然而,没有明显改变T-AOC水平与谷胱甘肽含量gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05)。没有明显衬效果(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba> 0.05)(gydF4y2Ba图3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

图3gydF4y2Ba
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图3gydF4y2Ba。绿原酸的蛋喂养对等离子体的影响42-heat强调肉鸡的氧化和抗氧化参数。gydF4y2Ba(一)gydF4y2BaMDA;gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba草皮;gydF4y2Ba(C)gydF4y2BaT-AOC;gydF4y2Ba(D)gydF4y2Ba猫;gydF4y2Ba(E)gydF4y2Ba谷胱甘肽;gydF4y2Ba(F)gydF4y2BaGPX。*表示治疗之间的显著差异(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

肠道形态学gydF4y2Ba

42 d-heat强调肉鸡,十二指肠绒毛高度的排气口4组(1743.57μm)明显高于NC组(1447.81μm) (gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05,gydF4y2Ba图4 a, DgydF4y2Ba)。在空肠绒毛高度隐窝深度的比值明显高于排气口4组比NC组(9.36)(7.56)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05,gydF4y2Ba图4 b, FgydF4y2Ba)。在回肠,绒毛高度隐窝深度的比值在排气口4组(5.73)高于在PC组(4.40)(gydF4y2BapgydF4y2Ba= 0.0971,gydF4y2Ba图4 c、FgydF4y2Ba)。隐窝深度没有明显变化(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05,gydF4y2Ba图4 egydF4y2Ba)。没有明显班轮或二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba> 0.05;gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba> 0.05)。gydF4y2Ba

图4gydF4y2Ba
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图4gydF4y2Ba。影响绿原酸在肠道形态学蛋喂养的42 d-heat强调肉鸡。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba十二指肠;gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba空肠;gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba回肠;gydF4y2Ba(D)gydF4y2Ba绒毛高度;gydF4y2Ba(E)gydF4y2Ba隐窝深度;gydF4y2Ba(F)gydF4y2Ba绒毛高度/隐窝深度。*表示治疗之间的显著差异(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

肠道mRNA表达gydF4y2Ba

十二指肠的42 d-heat强调肉鸡(gydF4y2Ba图5一个gydF4y2Ba),mRNA的表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和gydF4y2BaH O 1gydF4y2Ba排气口都显著的高于4组(1.56;1.43)相比,数控(gydF4y2Ba燕et al ., 2017燕et al ., 2017gydF4y2Ba)和PC组(1.1;1)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。此外,mRNA的表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba排气口4组(1.56)显著高于在排气口7 cga(1.14)和10 (0.92)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)组。mRNA表达gydF4y2Ba谷胱甘肽合成酶(GSS)gydF4y2Ba和gydF4y2BaSOD1gydF4y2Ba排气口在4组(1.37;1.59)排气口和7组(1.31;1.54)明显高于数控(gydF4y2Ba燕et al ., 2017燕et al ., 2017gydF4y2Ba)和PC组(0.96;0.9)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),而mRNA的表达gydF4y2BaSOD2gydF4y2Ba倾向于增加(gydF4y2BapgydF4y2Ba= 0.0933)。相比之下,PC组(0.7;0.88),mRNA的表达gydF4y2Ba谷胱甘肽还原酶(GSR)gydF4y2Ba和gydF4y2BaGPX7gydF4y2Ba在所有绿原酸洗组(平均1.27;(1.59)显著高于gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。所以,mRNA的表达gydF4y2BaGPX7gydF4y2Ba排气口排气口7组(1.67)和10组(1.57)显著高于NC组(gydF4y2Ba燕et al ., 2017gydF4y2Ba)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。mRNA表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和gydF4y2BaSOD1gydF4y2Ba在不同的注射组有显著的二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05),排气口和4组最高。此外,mRNA的表达gydF4y2BaGSRgydF4y2Ba和gydF4y2BaGPX7gydF4y2Ba在不同的注射组线性效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba< 0.05),与绿原酸的浓度增加。mRNA的表达gydF4y2Ba猫gydF4y2Ba排气口4组(2.01)显著高于NC组(gydF4y2Ba燕et al ., 2017gydF4y2Ba)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。然而,没有明显差异在mRNA的表达antioxidant-related绿原酸洗组和对照组之间的基因(gydF4y2BapgydF4y2Ba在空肠和回肠(> 0.05)gydF4y2Ba图5 b, CgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

图5gydF4y2Ba
www.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2Ba

图5gydF4y2Ba。蛋喂养的影响绿原酸antioxidant-related基因的mRNA表达42 d-heat强调肉鸡。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba十二指肠;gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba空肠;gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba回肠。*表示治疗之间的显著差异(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

相比之下,数控(gydF4y2Ba燕et al ., 2017gydF4y2Ba)和PC组(1.01),mRNA的表达gydF4y2Ba一千零一十一年易位1 (Tet1)gydF4y2Ba高(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)在所有绿原酸治疗组(平均1.68)的十二指肠42 d-heat强调肉鸡(gydF4y2Ba图6gydF4y2Ba)。mRNA的表达gydF4y2BaTet2gydF4y2Ba和gydF4y2BaDNA-methyltransferase三个α(DNMT3A)gydF4y2Ba排气口在4组(2.41;1.88)也显著高于数控(gydF4y2Ba燕et al ., 2017燕et al ., 2017gydF4y2Ba)和PC组(1.37;1.07)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),而mRNA的表达gydF4y2BaTet2gydF4y2Ba在排气口4组(2.41)显著高于10 cga组(1.45)(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。与NC组(gydF4y2Ba燕et al ., 2017gydF4y2Ba),mRNA的表达gydF4y2BaDNMT1gydF4y2Ba在排气口4组(1.66)倾向于增加(gydF4y2BapgydF4y2Ba= 0.0557)。然而,没有明显差异的mRNA的表达gydF4y2BaTet3gydF4y2Ba和gydF4y2BaDNMT3BgydF4y2Ba绿原酸洗组和对照组之间(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05);mRNA表达gydF4y2BaTet2gydF4y2Ba在不同的注射组有显著的二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05),排气口和4组最高。此外,mRNA的表达gydF4y2BaTet1gydF4y2Ba在不同的注射组线性效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba< 0.05),与绿原酸的浓度增加。在空肠和回肠(gydF4y2Ba图6 b, CgydF4y2Ba),没有显著差异的mRNA表达DNA methylation-related绿原酸治疗组和对照组之间的酶(gydF4y2BapgydF4y2Ba> 0.05);空肠的mRNA的表达gydF4y2BaTet3gydF4y2Ba在不同的注射组二次效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba二次gydF4y2Ba< 0.05),排气口,4组最低mRNA的表达。此外,空肠的mRNA的表达gydF4y2BaDNMT1gydF4y2Ba有一个线性效应(gydF4y2BaPgydF4y2Ba线性gydF4y2Ba< 0.05)在不同的注射组,因此,它是绿原酸的浓度的增加而增加。gydF4y2Ba

图6gydF4y2Ba
www.雷竞技rebatfrontiersin.orggydF4y2Ba

图6gydF4y2Ba。影响绿原酸在mRNA表达的蛋喂养的DNA methylation-related 42 d-heat强调肉鸡的酶。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba十二指肠;gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba空肠;gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba回肠。*表示治疗之间的显著差异(gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05),gydF4y2BangydF4y2Ba= 6。gydF4y2Ba

讨论gydF4y2Ba

在蛋喂养的绿原酸的影响增长,产后肉鸡的发展和新陈代谢gydF4y2Ba

虽然一些研究已经讨论了添加绿原酸肉用鸡饮食的重要性,目前实验研究绿原酸的影响gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba第一次在蛋喂养。蛋喂养的结果表明,绿原酸并没有对肉鸡孵化性能的不利影响,从而确定在蛋饲养技术的可靠性。gydF4y2Ba

热应力扰乱人体的体内平衡,导致负面影响生理、免疫、肠道形态,由此降低生产和增加死亡率家禽(gydF4y2Ba徐et al ., 2018gydF4y2Ba)。绿原酸是以前用作抗氧化剂由于其抗氧化性能。在过去的几年中,研究人员研究了绿原酸的饮食补充,但其对生长性能的影响是不一致的。陈等人。gydF4y2Ba陈et al ., 2021 bgydF4y2Ba)表明,在饮食中加入绿原酸2周没有显著影响的每日平均增益和平均日采食量小鸡急性热应激。然而,gydF4y2BaZhang et al。(2020 bgydF4y2Ba)发现后将绿原酸添加到饮食,每日平均增益提高,平均日采食量和饲料/增益显著降低肉鸡感染gydF4y2Baperfringens梭状芽胞杆菌gydF4y2Ba在21天的年龄。gydF4y2Ba赵et al . (2019gydF4y2Ba)还表明,饮食的gydF4y2Ba杜仲gydF4y2Ba叶提取物(主要含有绿原酸)肉鸡的平均每日增加,增加和减少饲料/增益,但对平均日采食量没有显著影响。在这项研究中,在生产性能没有显著差异。在整个喂食期间,排气口4组的死亡率最低的为8.33%,而对照组最高为19.44%。绿原酸对肉鸡的生长性能没有影响,这可能是由于人口稀少的实验动物和实验条件的差异,动物物种和死亡率。这些因素之间的关系需要在将来的研究中进一步证实。显然,蛋喂养的绿原酸是有利于发展的心脏,空肠和回肠产后没有热应激肉鸡。gydF4y2Ba

小肠是最重要的网站对动物消化和吸收营养gydF4y2BaLv et al ., 2021gydF4y2Ba)。肠粘膜功能和健康可以反映肠道形态学指标,包括绒毛高度、隐窝深度,绒毛高度隐窝深度的比值(gydF4y2BaJha et al ., 2019 bgydF4y2Ba)。更高的绒毛促进肠道营养吸收,和浅墓穴有利于肠道上皮细胞的成熟gydF4y2Bavan der Hulst et al ., 1998gydF4y2Ba)。绒毛高度/隐窝深度增加比率反映了改善肠道黏膜结构和增强肠粘膜吸收功能(gydF4y2Ba威廉姆斯et al ., 2015gydF4y2Ba)。Zhang et al。(gydF4y2BaZhang et al ., 2018 bgydF4y2Ba)表明,膳食的绿原酸有积极影响断奶仔猪的肠道形态,增加展示的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度在十二指肠和空肠,然而,十二指肠腺窝深度降低。同样的,gydF4y2Ba阮et al . (2014gydF4y2Ba)表明,绿原酸的加入可以改善肠道形态学lipopolysaccharide-treated空肠和回肠的老鼠。在目前的研究中,4 cga的绒毛高度增加十二指肠和空肠绒毛高度/隐窝深度的和回肠相比对照组2周后的热应力。这些蛋喂养的结果表明,绿原酸有积极影响产后肉鸡肠道形态的热应力。gydF4y2Ba

血液生化指标通常包括血糖、肝功能,肾功能指标,反映人体的健康状况(gydF4y2Ba廖et al ., 2007gydF4y2Ba)。总蛋白主要由清蛋白和球蛋白,比率显示蛋白质代谢和免疫功能(gydF4y2Ba本性,et al ., 2019gydF4y2Ba;gydF4y2Ba吉野et al ., 2019gydF4y2Ba)。血ALT, AST,高山通常用于评估肝脏氧化损伤的程度,以及他们的活动是减少表明改进的氧化还原状态(gydF4y2BaDalia et al ., 2017gydF4y2Ba;gydF4y2Ba潘伟迪et al ., 2022gydF4y2Ba)。LDH和CK主要存在于心肌细胞和心肌细胞受损时可以被释放。因此血液LDH和CK是重要的指标来衡量心肌损伤gydF4y2Ba唐et al ., 2018gydF4y2Ba;gydF4y2Ba阴et al ., 2020gydF4y2Ba)。目前的结果表明,经过2周的热应力,AST和高山的血液活动减少CGA-treated团体,特别是在排气口4组。这表明蛋喂养的绿原酸可以减轻产后热应力的氧化损伤肝脏。gydF4y2Ba

的蛋喂养的影响绿原酸在产后肉鸡的抗氧化能力gydF4y2Ba

热应力破坏氧化与抗氧化系统之间的平衡从而诱导脂质过氧化反应,生产过剩和活性氧。因此,热应力被广泛用于建立gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba氧化应激模型(gydF4y2Ba黄et al ., 2015gydF4y2Ba;gydF4y2Ba刘et al ., 2016gydF4y2Ba;gydF4y2Ba古普塔et al ., 2017gydF4y2Ba;gydF4y2BaZhang et al ., 2018 agydF4y2Ba;gydF4y2BaMcGarry et al ., 2018gydF4y2Ba;gydF4y2Ba李et al ., 2019gydF4y2Ba;gydF4y2BaYu et al ., 2019gydF4y2Ba),在这项研究中提出的。gydF4y2Ba

抗氧化酶,尤其是SOD和CAT可以抑制活性氧的积累和保护细胞不受氧化应激。T-AOC反映了机体的总抗氧化能力(gydF4y2Ba陈et al ., 2012gydF4y2Ba)。谷胱甘肽是一种重要的抗氧化剂,进行清除过氧化氢和活性氧(gydF4y2Ba王et al ., 2015gydF4y2Ba),而GPX是一个强大的自由基清除剂和抗氧化防御系统的一个重要酶(gydF4y2BaZhang et al ., 2018 bgydF4y2Ba)。MDA是氧化脂质过氧化的产物,和MDA含量可以直接反映脂质过氧化水平和自由基引起的脂质过氧化程度(gydF4y2BaLv et al ., 2021gydF4y2Ba)。多酚,绿原酸作为一种有效的中和剂清除自由基(ROS的gydF4y2Ba姚明et al ., 2019gydF4y2Ba)。研究表明,绿原酸可以增加T-AOC的血清水平,促进SOD、GPX活动,抑制MDA含量,有效地减轻氧化应激所致gydF4y2Baperfringens梭状芽胞杆菌gydF4y2Ba感染(gydF4y2BaZhang et al ., 2020 bgydF4y2Ba)。一致地,gydF4y2Ba周et al . (2016gydF4y2Ba)发现,绿原酸能增加GPX的活动和SOD的T-AOC HgydF4y2Ba2gydF4y2BaOgydF4y2Ba2gydF4y2Ba全身的肠道线粒体损伤的老鼠。绿原酸的抗氧化活性的分子机制可能取决于其专门的化学结构。绿原酸能提供氢原子减少自由基,抑制氧化反应,然后迅速稳定共振氧化后(gydF4y2Ba梁和基茨,2015年gydF4y2Ba)。在这项研究中,经过2周的热应力,等离子体氧化产物MDA显著降低,表现出明显的二次效应,与排气口4组MDA水平最低。抗氧化酶的活动包括SOD、GPX和猫被排气口4组显著增加,表明蛋喂养的绿原酸能发挥抗氧化作用gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba增加抗氧化酶的活动。gydF4y2Ba

我们进一步探讨绿原酸的抗氧化作用的潜在机制。Nrf2是一个重要的转录因子的基因表达调节抗氧化酶(gydF4y2Ba金正日et al ., 2010gydF4y2Ba)。Nrf2通路发挥抗氧化作用的调控的一系列内源性保护基因(gydF4y2Ba吴et al ., 2017gydF4y2Ba)。HO-1是关键之一cytoprotective酶在细胞防御。它是一个关键的蛋白质和扮演重要的角色在细胞氧化应激适应引起的各种病理事件(gydF4y2Ba黄和宋,2010gydF4y2Ba;gydF4y2BaIbanez说et al ., 2014gydF4y2Ba)。许多研究已经证实的老年病HO-1有助于细胞抵御氧化损伤(gydF4y2Ba李et al ., 2012gydF4y2Ba;gydF4y2Ba徐et al ., 2015gydF4y2Ba;gydF4y2Ba汉et al ., 2017gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba刘et al . (2020gydF4y2Ba)发现,绿原酸促进了蛋白质的表达Nrf2 HO-1,提高SOD活性,减少MDA浓度通过激活Nrf2通路与脑缺血再灌注损伤大鼠。目前的研究表明,经过2周的热应力,mRNA的表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和抗氧化酶gydF4y2BaH O 1 GSS GSR, GPX7 SOD1,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba猫gydF4y2Ba十二指肠的排气口4组显著增加,而mRNA的表达gydF4y2BaSOD2gydF4y2Ba也倾向于增加。此外,该mRNA的表达gydF4y2BaGSRgydF4y2Ba和gydF4y2BaGPX7gydF4y2Ba在不同的注射组线性效应。mRNA表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和gydF4y2BaSOD1gydF4y2Ba有一个显著的二次效应,排气口和4组最高。这些结果表明,绿原酸激活Nrf2通路,促进了mRNA的表达gydF4y2BaNrf2gydF4y2Ba和gydF4y2BaH O 1gydF4y2Ba,从而提高他们的下游抗氧化酶的表达。,蛋喂养的结果表明,绿原酸的抗氧化能力,改善产后肉鸡受到热应力通过调节Nrf2通路。gydF4y2Ba

绿原酸的蛋喂养对表观遗传学的影响肉鸡gydF4y2Ba

表观遗传学是指可遗传的基因表达的变化并不是由DNA序列的变化引起的(gydF4y2Ba霍利迪,1987gydF4y2Ba)。RNA干扰,它主要包括DNA甲基化和组蛋白修饰(gydF4y2BaEgger et al ., 2004gydF4y2Ba),其中DNA甲基化是最著名的(gydF4y2Ba阴et al ., 2013gydF4y2Ba)。DNA甲基化是由DNA甲基转移酶催化(DNMTs)在中央人民政府的胞嘧啶序列。在DNA复制,添加甲基胞嘧啶的甲基化胞嘧啶的互补DNA链DNMT1,并添加到修改的甲基胞嘧啶的CpG序列种能阻碍DNMT3B DNMT3A和(gydF4y2Ba李et al ., 1992gydF4y2Ba;gydF4y2Ba冈et al ., 1999gydF4y2Ba)。此外,甲基化胞嘧啶被Tet1氧化,Tet2,和Tet3春节家庭,尤其是在小鼠胚胎发育的早期阶段,和变成5-hydroxymethylcytosine (gydF4y2BaTahiliani et al ., 2009gydF4y2Ba;gydF4y2Ba井上,2011张gydF4y2Ba)。基因分析表明,鸡基因组甲基化胞嘧啶,丰富和含有同源基因的老鼠DNMT1, 3 a、3 b;和Tet1, 2和3 (gydF4y2Ba李et al ., 2011gydF4y2Ba;gydF4y2Ba恩et al ., 2021gydF4y2Ba)。在这项研究中,mRNA的表达gydF4y2BaTet1gydF4y2Ba,gydF4y2BaTet2,gydF4y2Ba和gydF4y2BaDNMT3AgydF4y2Ba十二指肠的排气口4组显著增加,而mRNA的表达gydF4y2BaDNMT1gydF4y2Ba在排气口4组也倾向于增加。mRNA表达gydF4y2BaTet2gydF4y2Ba在不同的注射组显示二次效应与排气口4组具有最高的表达式。这表明蛋喂养的绿原酸的影响可能与肉鸡的表观遗传学。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba

这项研究显示,在蛋喂养的绿原酸可以缓解热应激在肠道组织氧化损伤,促进肉鸡抗氧化防御能力。重要的是,绿原酸注射4毫克/蛋被发现是最有效的。蛋喂养的绿原酸的抗氧化作用在产后heat-stressed肉鸡可能与表观遗传学,然而,这种现象的潜在机制需要进一步探讨。gydF4y2Ba

数据可用性声明gydF4y2Ba

最初的贡献提出了研究中都包含在本文/辅料,可以针对相应的作者进一步询问。gydF4y2Ba

道德声明gydF4y2Ba

动物研究是审查和批准的机构山东农业大学动物保健和使用委员会(2001002)的“实验动物指南”科技部(中国,北京)。gydF4y2Ba

作者的贡献gydF4y2Ba

YP、HL黄建忠、生理和XW设计研究。YP进行了实验,分析了实验数据并起草手稿。XW抛光的手稿。所有作者阅读和批准最终的手稿。gydF4y2Ba

资金gydF4y2Ba

这项工作得到了中国国家重点研发项目(2018 yfe0128200),中国国家自然科学基金(32172787)和山东省的关键技术研究与开发项目(2019 jzzy020602)。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。gydF4y2Ba

出版商的注意gydF4y2Ba

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。gydF4y2Ba

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关键词:gydF4y2Ba烤肉,绿原酸,在蛋喂食,热应力,抗氧化剂,表观遗传机制gydF4y2Ba

引用:gydF4y2Ba焦锅Y,林H, H,赵J和王X(2023)蛋喂养的影响绿原酸在产后肉鸡抗氧化能力。gydF4y2Ba前面。杂志。gydF4y2Ba14:1091520。doi: 10.3389 / fphys.2023.1091520gydF4y2Ba

收到:gydF4y2Ba2022年11月23日;gydF4y2Ba接受:gydF4y2Ba2023年1月06;gydF4y2Ba
发表:gydF4y2Ba2023年1月16日。gydF4y2Ba

编辑:gydF4y2Ba

吴ShugenggydF4y2Ba中国、饲料研究所(CAAS)gydF4y2Ba

审核:gydF4y2Ba

Chunqi高gydF4y2Ba华南农业大学,中国gydF4y2Ba
阿里舍希德拉其普特人gydF4y2Ba巴基斯坦,穆罕默德纳瓦兹Shareef农业大学gydF4y2Ba
林张gydF4y2Ba、南京农业大学、中国gydF4y2Ba

版权gydF4y2Ba©2023盘,林娇,赵、王。这是一个开放分布式根据文章gydF4y2Ba知识共享归属许可(CC)。gydF4y2Ba使用、分发或复制在其他论坛是允许的,提供了原始作者(年代)和著作权人(s)认为,最初发表在这个期刊引用,按照公认的学术实践。没有使用、分发或复制是不符合这些条件的允许。gydF4y2Ba

*通信:gydF4y2Ba小娟,gydF4y2Bawangxj@sdau.edu.cngydF4y2Ba

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