的腺苷2受体拮抗剂KW6002明显调节视网膜神经节细胞形态在开发和新生儿出生后的炎症
Shisi胡1、2、3、4
__
李遥遥发
1、2、3
__
Yuanjie张1、2、3
如意石1、2、3
萍唐1、2、3
Di张1、2、3
14旷1、2、3
Jiangfan陈
1、2、3
瞿贾
2、3*
应高
1、2、3*- 1分子神经药理学实验室和Eye-Brain研究中心,眼科学国家重点实验室,视光学和视觉科学,温州医科大学、温州,中国
- 2眼科学国家重点实验室,视光学和视觉科学,温州医科大学、温州,中国
- 3眼科和视光学和眼科医院、温州医科大学,中国温州
- 4海南眼科医院眼科学重点实验室,中山眼科中心,中山大学,海口,中国
腺苷一2受体(2Rs)出现在视网膜产后早期发育,但的角色2Rs的形态发生不同类型的视网膜神经节细胞(RGCs)在开发和新生儿出生后的炎症反应仍未确定。RGCs相当异类的形态和功能在视网膜上,我们采取Thy1-YFPH转基因小鼠神经元和三维(3 d)重建调查如何2Rs调节三种形态的形态发生不同类型的RGCs(即类型I, II, III)在开发和新生儿出生后的炎症。我们发现一个2R拮抗剂KW6002没有改变的比例三种RGC在视网膜的发展过程中,但产生了双向影响树突的复杂性I型和III RGCs和细胞type-specifically改变他们的形态与I型树突密度减少,降低了树突II和III型字段区域,增加树突三世RGCs类型的密度。此外,新生儿炎症条件下,KW6002专门类型的比例增加我和增强RGCs树突的表面积和体积的比例与扩大了II型RGCs soma面积和周长。因此,一个2Rs施加不同的控制RGC形态细胞type-specifically微调RGC树突在正常发展,但主要是抑制RGC soma和树突体积下新生儿炎症。
1介绍
腺苷、内源性核苷是一种神经调质和胞内信使,广泛出现在中枢神经系统,包括视网膜。腺苷可以调节神经元兴奋性,神经递质释放和突触活动表演四腺苷酸受体的亚型,即A1, A2,一个2 b和A3受体(陈et al ., 2013)。其中,腺苷2受体(2R)出现在视网膜早期发育,这是发现在胚胎天6只小鸡胚胎视网膜(布里托et al ., 2012),也表示对视网膜广泛,如光感受器,内部核层神经元,亮光无长突细胞和视网膜神经节细胞(RGCs)。以前的研究已经表明视网膜2Rs在调节施加控制dark-adaption感光耦合(李et al ., 2013),杆视蛋白mRNA的表达在老虎蝾螈(Alfinito et al ., 2002),谷氨酸的释放杆光感受器(Stella et al ., 2003),视网膜电流图的生成和b-waves和振荡电位(OPs) (琼森和Eysteinsson, 2017)和视网膜的生成和调制波(黄et al ., 2014)。
这两个在体外和在活的有机体内研究表明,A2在大脑发育(Rs扮演着重要的角色席尔瓦et al ., 2013;里贝罗et al ., 2016;Alcada-Morais et al ., 2021)。我们先前的研究发现2Rs调节突触修剪microglia-mediated retinogeniculate通路的背外侧膝状体在产后发展(苗族et al ., 2021)。然而,的确切作用2Rs视网膜神经元的发展包括不同RGC类型仍不清楚。RGCs,而异构,分为30多个不同类型,根据其树突打颤;功能特性或转录组特性(巴登et al ., 2016;Bae et al ., 2018;Goetz et al ., 2022;黄et al ., 2022)。此外,视网膜2Rs也参与不仅视网膜的正常发展,而且发展下在视网膜的病理过程,如神经炎症和视网膜病变炎症反应。而腺苷的参与和一个2R在大脑调节小胶质细胞在两个新生儿神经炎症的老鼠模型(Colella et al ., 2018)已经被研究过,更不用说被注意的影响2新生儿炎症后Rs RGCs的发展。
在目前的研究中,我们研究如何2Rs调节RGCs的形态在开发和新生儿视网膜炎症,使用Thy1-YFPH转基因小鼠神经元加上三维(3 d)重建方法。我们证明了在正常的人体发育进程中,A2R拮抗剂KW6002主要减少RGC形态发生明显的减少树突字段的类型II和III RGCs,和I型的树突密度但类型III RGCs树突密度的增加。此外,在新生儿炎症,KW6002专门类型的比例增加我和增强了树突RGCs表面积和体积和II型RGCs的比例放大soma面积和周长。因此,一个2Rs明显调节RGC形态通过微调RGC树突细胞特定类型的方式在正常的人体发育进程中,但主要是抑制RGC soma和树突卷下新生儿炎症。
2材料和方法
2.1动物
所有动物协议被动物保护委员会批准了温州医科大学。转基因小鼠的YFPH行获得杰克逊实验室(应变:B6。Cg-Tg (Thy1-YFPH) 2青年队/ J;缅因州巴尔港)。所有的老鼠随意获得食物和水在12 h光/暗周期与50 - 60%湿度。出生的日子算作产后第0天(P0)。
Thy1-YFPH同窝出生的小鼠随机分为两组。幼崽收到腹腔内注射(IP)的一个2R拮抗剂KW6002(10毫克/公斤体重,刚做好的二甲亚砜(DMSO,σ),乙氧基蓖麻油(σ)和磷酸盐(PBS)的比例为15%:15%:70% (苗族et al ., 2021)每天从P4 P6。对照组实施相应的车辆在相同的体积。新生儿在Thy1-YFPH诱导炎症小鼠的腹腔内注射脂多糖(LPS, 1毫克/公斤,大肠杆菌055年:B5;σ)在P4 KW6002治疗后4分钟。
2.2免疫组织化学的视网膜包埋
免疫组织化学实验进行了如前所述(高et al ., 2018)。短暂,Thy1-YFPH小鼠麻醉后,眼睛是无核的第21页和固定在4%多聚甲醛(PFA) 30分钟。从眼球视网膜是孤立的,固定在PFA 4%额外的10分钟,孵化H为3%2O220分钟。之后被屏蔽在阻止溶液(5%正常驴血清+ 1% BSA, 0.2%甘氨酸,赖氨酸0.2%,和0.3% Triton x - 100)在室温下2 h,视网膜孵化了山羊多克隆抗体GFP (1:50 0, nb100 - 1770,罗福斯生物制剂)在4°C 2天。然后视网膜顺序是生物素化的驴抗体抗体孵育,avidin-biotin复杂(Vectastain ABC精英设备;向量实验室,美国),3,3′-diaminobenzidine(涂平板电脑,σ),最后在玻片上flat-mounted水安装介质(IMMCO诊断公司)。
2.3三维重建和定量形态测量学
完全和强烈彩色YFP-positive RGCs(达到标准的详细形态分析)是随机选择和重构,而那些微弱的染色和未完成的结构被丢弃。利用Neurolucida RGCs的形态学重建系统(美国MicroBrightField Inc .)和亮场光学显微镜的放大(德国蔡司)×63,(如前所述)(高et al ., 2018)。一连串的形态参数提取从251年全面重建RGCs NeuroExplorer(美国MicroBrightField Inc .)。Sholl分析树突RGCs也表现在Neuroexplorer使用“Sholl分析”(Sholl 1953)。树突的空间分布和同心圆的交集圈地区被量化了的距离从soma(10μm)。
2.4统计分析
结果表示为均值的平均值±标准误差(SEM)。克鲁斯卡尔-沃利斯单向方差分析(k)样品,独立的学生t以及和卡方检验是由SPSS 26。被设定为显著水平p< 0.05的比较。
3的结果
3.1的2R拮抗剂KW6002没有改变的比例在开发RGC形态类型
自RGCs相当异类在视网膜上,我们利用Thy-1 YFPH转基因线,这表达了黄色荧光蛋白(YFP)只在一小部分RGCs (Barnstable德尔格,1984;冯et al ., 2000),学习的效果2R RGCs的发展。在视网膜的发展过程中,Thy-1 YFPH新生儿接受腹腔内注射的2R拮抗剂KW6002 P4 P6和P21牺牲(图1一个)。3 d重建well-stained YFP+细胞(n = 120)进行了详细的形态学分析P21在视网膜上(图1 b)。如前所述,我们分类这些Thy1-positive RGCs贴上YFP分成三个主要形态类(类型I, II和III),基于树突的形态特征字段和树突密度(高et al ., 2018)。I型有一个小树突区域和树突密度高,而第三类型有一个大的树突场区域但是树突密度较低。II型只是I型和III之间(图1 c)。定量分析进一步证实三种RGC类型之间的显著差异(* *p< 0.01,* * *p< 0.001,图1 d, E)。成分之间的三种RGC相似KW6002-treated和对照组(n = 12 I型:控制,22.22% vs KW6002, n = 22日33.33%;II型:控制,n = 26日与KW6002 48.15%, n = 30, 45.45%;类型III:控制、n = 16 29.63%比KW6002, n = 14人,21.21%;p> 0.05;图1 f)。因此,KW6002没有影响这些RGC形态类型的比例在视网膜的发展。
图1。的影响2R拮抗剂KW6002 RGCs比例的不同形态类型的发展。(一)时间表的KW6002(或车辆)政府在转基因Thy-1 YFPH老鼠。(B)代表flat-mounted整个视网膜显示三种不同形态类型的RGCs用不同的颜色从转基因Thy-1 YFPH老鼠(红、I型;蓝色、II型;绿色类型III)。个人的形态学RGC Neurolucida被免疫组织化学显示,重建的系统。μm酒吧,规模500人。(C)代表三种形态类型的3 d重建RGCs b所示规模酒吧,100μm。(D, E)定量评价的树突区域(D)和树突密度(E)在不同形态的RGCs类型。(F)的比例不同的形态类型的RGCs控制和KW6002-treated老鼠在开发。值意味着±扫描电镜;* *p< 0.01,* * *p< 0.001。54 RGCs从六个视网膜(3 vehicle-treated老鼠)和66年RGCs八视网膜(4 KW6002-treated老鼠)分析了控制和KW6002-treated组,分别。平均9 RGCs分析了每只眼睛在对照组,而每眼8.25 RGCs KW6002-treated组进行了分析。
3.2 KW6002主要减少RGC减少树突形态发生的字段的类型II和III RGCs,和I型的树突密度但类型III RGCs树突密度的增加
在RGC somata有不同的形状,如三角形、圆形和椭圆形。RGCs不同形态形状使用不同的参数。我们首先研究了体细胞RGCs发展显著,发现KW6002 soma地区增加了18.69%在I型(控制,244.04±15.10μm2与KW6002, 289.66±13.04μm2;*p< 0.05;图2 a, B和补充表S1),而没有发现显著的影响在类型II和III (p> 0.05;图2 a, B)。与此同时,没有发现显著差异的soma周边三种形态类型的RGCs KW6002 (p> 0.05;图2 a, C)。这些结果表明,A2Rs可以调节不同的躯体发展RGCs在视网膜的发展。
图2。的影响KW6002体细胞形态的三种RGC在开发。(一)代表每个RGC somata类型检查车辆的照片处理和KW6002-treated组。规模的酒吧,20μm。(B,C)soma地区的比较分析(B)和周长(C)之间的不同类型RGC vehicle-treated和KW6002-treated老鼠。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05。
我们进一步比较了树突的形态特征,如树突状字段区域,树突密度,段数、长度、面积、体积等,两组之间(图3)。树突场面积减少了10.13%和10.99%,分别在II型(控制,78610 .04点μm±2295.942与KW6002, 70646 .83点μm±2472.022;*p< 0.05;图3 a, B)和类型III RGCs(控制,123035点μm±4269.092与KW6002, 109513 .94μm±2438.72;* *p< 0.01;图3 a, BKW6002治疗后),而没有发现显著的影响在I型(p >0.05;图3 b)。与对照组相比,KW6002树突密度衰减了12.00%(控制,9.50±0.48×1021 /µm)与KW6002, 8.36±0.28 (×1021 /µm);*p< 0.05;图3 c在I型RGCs),但诱导树突密度的增强19.62%(控制,3.72±0.14 (×1021 /µm)与KW6002, 4.45±0.24 (×1021 /µm);*p< 0.05;图3 c三世RGCs)类型。KW6002没有改变树突段数量和树突总长度的三种RGC在正常发展p >0.05;图3 d, E)。树突的表面积和体积,没有发现显著的影响在每个RGC类型KW6002治疗后在正常发展p >0.05;图3 f, G)。这些结果暗示2Rs可以重组的树突架构RGCs视网膜,这是依赖于RGC类型。
图3。KW6002不同期间RGCs的树突形态发展的影响。(一)代表3 d重建的三种RGC vehicle-treated和KW6002-treated老鼠。(B-G)比较分析树突领域的区域(B),树突密度(C),树突段数(D),树突长度(E),树突表面面积(F)和树突卷(G)在每个RGC vehicle-treated KW6002-treated集团之间的类型。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05;* *p< 0.01。μm酒吧,规模100人。
进一步调查的影响KW6002树突形态、空间分布的Sholl分析进行量化的树突十字路口和显示KW6002对I型和III RGCs双重影响。KW6002显著降低树突类型的十字路口我在30 - 50μm RGCs,但增加了他们在110 - 160年μm soma (*p< 0.05或* *p< 0.01;图4一)相反,三世RGCs类型,树突十字路口在50 - 70μm显著增加和100年μm但减少180 - 200μm soma (*p< 0.05或* *p< 0.01;图4 cKW6002治疗后)。同时,KW6002显著降低II型的树突路口RGCs主要是在120 - 170μm,远离soma (*p< 0.05或* *p< 0.01;图4 b)。这些结果表明调整的影响2Rs在视网膜RGCs树突发展发展。
图4。树突的复杂性RGCs不同改变了KW6002在开发。(两者)定量Sholl分析每个RGC的树突路口数据类型从vehicle-treated KW6002-treated集团在开发。插图,一系列的同心圆随着半径10μm一步被叠加在RGC。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05;* *p< 0.01。
3.3 KW6002 RGC形态类型的比例改变后新生儿炎症
除了它的生理作用,我们进一步研究的影响2R的发展后RGCs新生儿炎症。炎症诱导新生儿,新生儿收到一腹腔内注射LPS在P4 KW6002后立即治疗。然后他们管理KW6002以同样的方式,在正常条件和P21在牺牲了(图5一个)。的well-stained YFP+细胞在视网膜细胞(n = 131) 3 d重建P21在详细的形态学分析。新生儿LPS曝光后我们发现,作文的I型和II型RGCs显著增加,但类型III KW6002-treated组减少,相对于对照组(n = 9 I型:控制,14.29% vs KW6002, n = 16, 23.53%;II型:控制、n = 37 58.73%比KW6002, n = 45岁的66.18%;类型III:控制、n = 17 26.98%比KW6002, n = 7, 10.29%;*p <0.05;图5 b)。这些结果表明,A2Rs改变了成分后的三种RGC新生儿炎症。
图5。KW6002 RGC形态类型的比例改变后新生儿炎症。(一)时间轴的KW6002(或车辆)政府的腹腔内注射LPS在转基因Thy-1 YFPH老鼠。(B)RGCs的不同形态类型的比例控制和KW6002-treated老鼠后新生儿有限合伙人曝光。*p< 0.05。63 RGCs 14视网膜(7 vehicle-treated老鼠)和68年RGCs从12视网膜(6 KW6002-treated老鼠)控制和KW6002-treated组新生儿LPS曝光后,分别。平均4.5和5.67 RGCs每眼每组进行了分析。
3.4 KW6002 I型RGCs的比例增加,提高了树突表面积和体积和II型RGCs扩大soma新生儿后炎症
有限合伙人治疗后,KW6002显著扩大了soma面积19.10%(控制,303.54±16.96μm2与KW6002, 361.51±18.69μm2;*p< 0.05;图6 a, B和补充表S2soma周长)和10.73%(控制、69.64±1.79μm vs KW6002 77.11±2.01μm;* *p< 0.01;图6 c在II型)。然而,KW6002没有显著影响soma I型和III的周长、面积及新生儿接触有限合伙人(后p >0.05;图6 b, C)。在soma的旁边,我们还研究了树突形态,发现树突区域和树突总长度的三种形态类型RGCs没有受到KW6002新生儿接触有限合伙人(后p >0.05;图7 a, B, E)。有趣的是,KW6002显著增强树突密度(控制,5.73±0.17 (×1021 /µm)与KW6002, 6.32±0.19 (×1021 /µm);*p< 0.05;图7 c)和段数(控制、79.16±3.50 vs KW6002 92.29±4.03;*p< 0.05;图7 dII型RGCs),但不影响这些类型的新生儿LPS后我和类型III RGCs曝光。此外,KW6002显著增强树突的表面积和体积的I型RGCsμm(控制,3861.30±227.052与KW6002, 4700.80±283.86μm2;*p< 0.05;图7 f;控制,474.82±31.88μm3与KW6002, 629.75±40.26μm3;* *p< 0.01;图7 g)在新生儿接触有限合伙人,而没有发现明显的变化在其他两个RGC类型。这些结果表明,A2Rs诱导微分soma和树突架构的改变RGCs新生儿后炎症。
图6。KW6002放大后的II型RGCs soma新生儿有限合伙人曝光。(一)代表每个RGC somata类型检查车辆的照片后治疗和KW6002-treated组新生儿有限合伙人曝光。规模的酒吧,20μm。(B,C)soma地区的比较分析(B)和周长(C)之间的不同类型RGC vehicle-treated KW6002-treated老鼠后新生儿有限合伙人。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05;* *p< 0.01。
图7。RGCs KW6002的树突形态的影响新生儿LPS后曝光。(一)代表3 d重建的三种RGC vehicle-treated KW6002-treated老鼠后新生儿有限合伙人曝光。(B-G)比较分析树突领域的区域(B),树突密度(C),树突段数(D),树突长度(E),树突表面面积(F)和树突卷(G)在每个RGC类型vehicle-treated和KW6002-treated组新生儿LPS后曝光。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05;* *p< 0.01。μm酒吧,规模100人。
我们进一步执行Sholl分析研究KW6002在空间分布的影响新生儿LPS曝光后树突形态。我们发现KW6002只在110年和130年明显下降树突路口μm类型III RGCs (soma的*p< 0.05或* *p< 0.01;图8 c),而没有发现显著差异在I型和II型RGCs (p> 0.05;图8 a, B)。这些结果表明,A2Rs只有轻微影响新生儿LPS曝光后树突的复杂性。
图8。KW6002下降的树突复杂性类型III RGCs新生儿LPS后曝光。(两者)定量Sholl分析每个RGC的树突路口数据类型从vehicle-treated KW6002-treated组新生儿LPS后曝光。数据表示的意思是±SEM。*p< 0.05;* *p< 0.01。
4讨论
的一个2R是最近提议作为一个潜在的治疗目标为视网膜疾病(圣地亚哥et al ., 2020)。然而,确切的作用2R在视网膜的发展,尤其是RGC形态发生,仍不能完全阐明。简化分析的框架,而异构RGC类型在视网膜上,这里我们分类Thy1-positive RGCs从Thy-1 YFPH转基因小鼠倒入三大形态类型(类型I, II和III)我们之前的研究(高et al ., 2018)。我们发现一个2R拮抗剂KW6002产生主要是减少RGC形态发生明显的减少树突字段的类型II和III,和I型的树突密度但类型III(树突密度的增加图9)。树突字段表示输入接受区,而树突密度代表双相的强度和无长突轴突内输入RGCs接收覆盖地区。因此,一个2Rs可以调节RGC输入接受区和双极和在开发过程中无长突特异性的方式。此外,KW6002双向的影响树突I型的复杂性和类型III RGCs,暗示的微调能力2Rs RGCs树突上的发展。由于缺乏合适的一个2R抗体可靠和专门检测2在RGCs R,不同密度的2三种类型的Rs RGCs导致KW6002的不同影响的形态学RGCs在未来仍有待研究。鉴于I型细胞的形态相似性与W3B-RGC (金正日et al ., 2010),这是假定作为选择性特征检测器(Zhang et al ., 2012),与了持续αRGCs II型细胞(Bleckert et al ., 2014;Krieger et al ., 2017;Smeds et al ., 2019),和III型细胞和视网膜M2细胞(Sanes——Masland, 2015),我们推测2R活动可能调节局部边缘检测(RGC)型,单光子视觉信号传输到大脑的功能(II型RGC)和内在光敏研究RGC类型III (RGC)。三个RGCs的确切功能影响2R需要进一步功能研究的特征。
图9。摘要KW6002 RGC形态变化的生理和病理条件下一个2R拮抗剂KW6002不同改变这些形态参数的不同RGC类型在正常和新生儿炎症。由KW6002箭头意味着显著上升或下调,而水平线意味着没有显著差异。
我们进一步研究的影响2R在RGC形态学新生儿有限合伙人暴露和发现的对抗2R改变三种RGC的成分,虽然没有成分变化被发现在正常发展或新生儿炎症(后补充图S1)(高et al ., 2018)。先前的研究已经报道,2R拮抗剂防止RGC损失视网膜organotypic文化在接触有限合伙人(马德拉et al ., 2015)和视网膜神经退化的几个模型(马德拉et al ., 2016;Boia et al ., 2017;京et al ., 2019 a;京et al ., 2019 b)。这是可能的2R拮抗剂preferrentially保护I型和II RGCs从死亡后新生儿炎症,从而上调比例的两种类型。值得注意的是,新生儿炎症后,2R拮抗剂KW6002专门类型的比例增加我和增强了树突RGCs表面积和体积和II型RGCs的比例扩大了soma面积和周长,指示2R激活产生主要抑制在RGC soma和树突卷下新生儿炎症。RGC增加大小的I型和II KW6002可能与upregulation相关的细胞过程,如线粒体动力学抵抗细胞损失(比赛当天艳阳高照,比约克隆德,2016)。此外,调制模式2R拮抗剂在RGC形态非常不同于在正常发展图9),这表明一个2Rs有着截然不同的影响在生理和病理条件下RGC形态发展。这些不同的影响在RGC形态通过KW6002治疗可能属性不同的当地环境变化。事实上,不同的谷氨酸浓度可以开关的影响2R抗炎和促炎(戴et al ., 2010)。此外,这些不同的影响2Rs在RGC形态可能归因于不同的细胞类型KW6002的目标。在视网膜的正常发展,KW6002可能主要是阻止2R RGCs,从而影响RGCs的形态发展。然而,在新生儿KW6002可能作用于炎症2R小胶质细胞和小胶质细胞和RGCs调节RGCs的形态,因为之前的研究已经发现,炎症会导致显著增加小胶质2R (卡纳斯et al ., 2004;Wittendorp et al ., 2004)。是否直接KW6002对小胶质细胞的影响仍有待决定未来试验的遗传deleption小胶质2r .我们的结果与先前的研究显示,尤其是协议的复杂和微分作用2在生理和病理条件下R玩。例如,我们最近发现的基因失活2R变弱病理性血管生成在早产儿视网膜病变的发展,但这并不影响发育小鼠视网膜血管生成(刘et al ., 2010;Zhang et al ., 2017;Zhang et al ., 2022)。的影响2R的外围控制炎症和慢性神经炎症也相反(达2005)。因此,一个2R信号可能明显调节RGC发展在正常和病理条件下视网膜和底层机制在未来需要进一步调查。
总的来说,在开发过程中2R激活细胞特定类型的方式可以调节RGC形态学和微调树突发展双向调节树突I型和III RGCs的复杂性。新生儿炎症后,2R激活主要减少I和II型的soma和树突RGCs比例减少了他们,这是完全不同的角色扮演在开发。这些发现可能提供一个集成视图的多边形效应2R信号RGCs的形态,这是根据细胞类型和条件。
数据可用性声明
最初的贡献提出了研究中都包含在这篇文章/补充材料,进一步的调查可以直接到相应的作者。
道德声明
综述了动物研究和温州医科大学动物保健委员会批准。
作者的贡献
YG和金桥设计研究和协调实验。上海和我们进行了实验和分析数据。YZ, RS、PT和DZ导致获取三维重建数据集。XK为成像提出了建设性的建议。YG写的手稿。金桥修改了手稿。JC帮助编辑手稿和协助融资收购。所有作者评论的手稿。
资金
这项工作是支持的中国浙江省自然科学基金(批准号LY21H090014),中国国家自然科学基金(批准号81600991和81600991),国际资深科学家研究基金(批准号82150710558),并从温州医科大学基金(批准号KYYW202106)和海南省临床医疗中心。
的利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
出版商的注意
本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。
补充材料
本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2022.1082997/full补充材料
引用
宜,即D。Boia, R。,Rodrigues-Neves, A. C., Madeira, M. H., Marques, C., Ambrosio, A. F., et al. (2019a). Blockade of microglial adenosine A2A receptor suppresses elevated pressure-induced inflammation, oxidative stress, and cell death in retinal cells.神经胶质67 (5),896 - 914。doi: 10.1002 / glia.23579
宜,即D。,马德拉,m . H。Boia, R。,Rodrigues-Neves, A. C., Martins, J. M., Ambrosio, A. F., et al. (2019b). Intravitreal injection of adenosine A(2A) receptor antagonist reduces neuroinflammation, vascular leakage and cell death in the retina of diabetic mice.科学。代表。9日,17207年。doi: 10.1038 / s41598 - 019 - 53627 - y
Alcada-Morais, S。Goncalves, N。,Moreno-Juan, V., Andres, B., Ferreira, S., Marques, J. M., et al. (2021). Adenosine A2A receptors contribute to the radial migration of cortical projection neurons through the regulation of neuronal polarization and axon formation.Cereb。皮质31日(12),5652 - 5663。doi: 10.1093 / cercor / bhab188
Alfinito, p D。Alli, R。,和Townes-Anderson, E. (2002). Adenosine A(2a) receptor-mediated inhibition of rod opsin mRNA expression in tiger salamander.j . Neurochem。83 (3),665 - 672。doi: 10.1046 / j.1471-4159.2002.01162.x
巴登,T。,Berens, P., Franke, K., Roman Roson, M., Bethge, M., and Euler, T. (2016). The functional diversity of retinal ganglion cells in the mouse.自然529 (7586),345 - 350。doi: 10.1038 / nature16468
Bae, j . A。μS。,Kim, J. S., Turner, N. L., Tartavull, I., Kemnitz, N., et al. (2018). Digital museum of retinal ganglion cells with dense anatomy and physiology.细胞。173 (5),1293 - 1306。doi: 10.1016 / j.cell.2018.04.040
Barnstable c J。,和Dräger, U. C. (1984). Thy-1 antigen: A ganglion cell specific marker in rodent retina.神经科学11 (4),847 - 855。0306 - 4522 . doi: 10.1016 / (84) 90195 - 7
Bleckert,。,Schwartz, G. W., Turner, M. H., Rieke, F., and Wong, R. O. (2014). Visual space is represented by nonmatching topographies of distinct mouse retinal ganglion cell types.咕咕叫。医学杂志。24 (3),310 - 315。doi: 10.1016 / j.cub.2013.12.020
Boia, R。,Elvas, F., Madeira, M. H., Aires, I. D., Rodrigues-Neves, A. C., Tralhao, P., et al. (2017). Treatment with A2A receptor antagonist KW6002 and caffeine intake regulate microglia reactivity and protect retina against transient ischemic damage.细胞。死亡说。8 (10),e3065。doi: 10.1038 / cddis.2017.451
布里托,R。,Pereira, M. R., Paes-de-Carvalho, R., and Calaza, K. D. (2012). Expression of A1 adenosine receptors in the developing avian retina:在活的有机体内由负责受体和内源性腺苷调制。j . Neurochem。123 (2),239 - 249。doi: 10.1111 / j.1471-4159.2012.07909.x
卡纳斯,P。,Rebola, N., Rodrigues, R. J., Oliveira, C. R., and Cunha, R. A. (2004). Increased adenosine A2A immunoreactivity in activated rat microglia in culture.沼泽Abstr。2,A223-A229。
陈,j·F。,Eltzschig, H. K., and Fredholm, B. B. (2013). Adenosine receptors as drug targets-what are the challenges?Nat。启药物。12 (4),265 - 286。doi: 10.1038 / nrd3955
Colella, M。津尼,M。,Pansiot, J., Cassanello, M., Mairesse, J., Ramenghi, L., et al. (2018). Modulation of microglial activation by adenosine A2a receptor in animal models of perinatal brain injury.前面。神经。9日,605年。doi: 10.3389 / fneur.2018.00605
Cunha r . a (2005)。大脑中的神经保护的腺苷:从(1)受体激活(2 A)受体封锁。Purinergic信号。1 (2),111 - 134。doi: 10.1007 / s11302 - 005 - 0649 - 1
戴,S。,Zhou, Y. G., Li, W., An, J. H., Li, P., Yang, N., et al. (2010). Local glutamate level dictates adenosine A2A receptor regulation of neuroinflammation and traumatic brain injury.j . >。30 (16),5802 - 5810。doi: 10.1523 / jneurosci.0268 - 10.2010
冯,G。,Mellor, R. H., Bernstein, M., Keller-Peck, C., Nguyen, Q. T., Wallace, M., et al. (2000). Imaging neuronal subsets in transgenic mice expressing multiple spectral variants of GFP.神经元28 (1),41-51。doi: 10.1016 / s0896 - 6273 (00) 00084 - 2
高,Y。,Hu, S., Li, Q., Wang, M., Zhi, Z., Kuang, X., et al. (2018). Neonatal inflammation induces reorganization in dendritic morphology of retinal ganglion cells but not their retinogeniculate projection in mice.>。列托人。676年,34-40。doi: 10.1016 / j.neulet.2018.04.012
Goetz, J。,Jessen, Z. F., Jacobi, A., Mani, A., Cooler, S., Greer, D., et al. (2022). Unified classification of mouse retinal ganglion cells using function, morphology, and gene expression.细胞。代表。40 (2),111040。doi: 10.1016 / j.celrep.2022.111040
黄,p . C。,Hsiao, Y. T., Kao, S. Y., Chen, C. F., Chen, Y. C., Chiang, C. W., et al. (2014). Adenosine A(2A) receptor up-regulates retinal wave frequency via starburst amacrine cells in the developing rat retina.《公共科学图书馆•综合》9 (4),e95090。doi: 10.1371 / journal.pone.0095090
黄,W。徐问。苏,J。,Tang, L., Hao, Z. Z., Xu, C., et al. (2022). Linking transcriptomes with morphological and functional phenotypes in mammalian retinal ganglion cells.细胞。代表。40(11),111322年。doi: 10.1016 / j.celrep.2022.111322
琼森,G。,和Eysteinsson, T. (2017). Retinal A2A and A3 adenosine receptors modulate the components of the rat electroretinogram.粘度>。34岁E001。doi: 10.1017 / S0952523816000171
金,J。,张,Y。,Meister, M., and Sanes, J. R. (2010). Laminar restriction of retinal ganglion cell dendrites and axons: Subtype-specific developmental patterns revealed with transgenic markers.j . >。30 (4),1452 - 1462。doi: 10.1523 / jneurosci.4779 - 09.2010
Krieger B。乔,M。,Rousso, D. L., Sanes, J. R., and Meister, M. (2017). Four alpha ganglion cell types in mouse retina: Function, structure, and molecular signatures.《公共科学图书馆•综合》12 (7),e0180091。doi: 10.1371 / journal.pone.0180091
李,H。,Zhang, Z., Blackburn, M. R., Wang, S. W., Ribelayga, C. P., and O'Brien, J. (2013). Adenosine and dopamine receptors coregulate photoreceptor coupling via gap junction phosphorylation in mouse retina.j . >。33 (7),3135 - 3150。doi: 10.1523 / jneurosci.2807 - 12.2013
刘,x L。周,R。,Pan, Q. Q., Jia, X. L., Gao, W. N., Wu, J., et al. (2010). Genetic inactivation of the adenosine A2A receptor attenuates pathologic but not developmental angiogenesis in the mouse retina.投资。角膜切削。粘度科学。51 (12),6625 - 6632。doi: 10.1167 / iovs.09 - 4900
马德拉,m . H。Boia, R。,Elvas, F., Martins, T., Cunha, R. A., Ambrosio, A. F., et al. (2016). Selective A2A receptor antagonist prevents microglia-mediated neuroinflammation and protects retinal ganglion cells from high intraocular pressure-induced transient ischemic injury.Transl。Res。169年,112 - 128。doi: 10.1016 / j.trsl.2015.11.005
马德拉,m . H。埃尔娃,F。Boia, R。,Goncalves, F. Q., Cunha, R. A., Ambrosio, A. F., et al. (2015). Adenosine A2AR blockade prevents neuroinflammation-induced death of retinal ganglion cells caused by elevated pressure.j .神经炎症12日,115年。doi: 10.1186 / s12974 - 015 - 0333 - 5
苗族,Y。,Chen, X., You, F., Jia, M., Li, T., Tang, P., et al. (2021). Adenosine A2A receptor modulates microglia-mediated synaptic pruning of the retinogeniculate pathway during postnatal development.神经药理学200年,108806年。doi: 10.1016 / j.neuropharm.2021.108806
比赛当天艳阳高照,t . P。,和Bjorklund, M. (2016). Cellular allometry of mitochondrial functionality establishes the optimal cell size.Dev。细胞。39 (3),370 - 382。doi: 10.1016 / j.devcel.2016.09.004
里贝罗,F F。,Neves-Tome, R., Assaife-Lopes, N., Santos, T. E., Silva, R. F., Brites, D., et al. (2016). Axonal elongation and dendritic branching is enhanced by adenosine A2A receptors activation in cerebral cortical neurons.大脑结构。功能。221 (5),2777 - 2799。doi: 10.1007 / s00429 - 015 - 1072 - 1
Sanes——j·R。,和Masland, R. H. (2015). The types of retinal ganglion cells: Current status and implications for neuronal classification.为基础。启>。38岁,221 - 246。doi: 10.1146 / annurev -神经- 071714 - 034120
圣地亚哥,a。R。,马德拉,m . H。Boia, R。,一个ires, I. D., Rodrigues-Neves, A. C., Santos, P. F., et al. (2020). Keep an eye on adenosine: Its role in retinal inflammation.杂志。其他。210年,107513年。doi: 10.1016 / j.pharmthera.2020.107513
席尔瓦,c·G。Metin, C。,Fazeli, W., Machado, N. J., Darmopil, S., Launay, P. S., et al. (2013). Adenosine receptor antagonists including caffeine alter fetal brain development in mice.科学。Transl。地中海。5 (197),197 ra104。doi: 10.1126 / scitranslmed.3006258
Smeds, L。,Takeshita, D., Turunen, T., Tiihonen, J., Westo, J., Martyniuk, N., et al. (2019). Paradoxical rules of spike train decoding revealed at the sensitivity limit of vision.神经元104 (3),576 - 587。doi: 10.1016 / j.neuron.2019.08.005
斯特拉,s . L。,Bryson, E. J., Cadetti, L., and Thoreson, W. B. (2003). Endogenous adenosine reduces glutamatergic output from rods through activation of A2-like adenosine receptors.j . Neurophysiol。90 (1),165 - 174。doi: 10.1152 / jn.00671.2002
Wittendorp, m . C。、Boddeke h·W。,和Biber, K. (2004). Adenosine A3 receptor-induced CCL2 synthesis in cultured mouse astrocytes.神经胶质46 (4),410 - 418。doi: 10.1002 / glia.20016
张,S。李,B。,Tang, L., Tong, M., Jiang, N., Gu, X., et al. (2022). Disruption of CD73-derived and equilibrative nucleoside transporter 1-mediated adenosine signaling exacerbates oxygen-induced retinopathy.点。j .分册。192年,1633 - 1646。doi: 10.1016 / j.ajpath.2022.07.014
张,S。,Zhou, R., Li, B., Li, H., Wang, Y., Gu, X., et al. (2017). Caffeine preferentially protects against oxygen-induced retinopathy.美国实验生物学学会联合会J。31日(8),3334 - 3348。doi: 10.1096 / fj.201601285R
关键词:腺苷一2受体视网膜神经节细胞,形态、三维重建、发展,新生儿炎症
引用:胡年代,李Y, Y, R,唐P、D,高旷X,陈J, J和Y(2022)腺苷2受体拮抗剂KW6002明显调节视网膜神经节细胞形态在开发和新生儿出生后的炎症。前面。杂志。13:1082997。doi: 10.3389 / fphar.2022.1082997
收到:2022年10月28日;接受:2022年12月05;
发表:2022年12月16日。
编辑:
勇唐、成都中医药大学、中国版权©2022,李,张,Shi,唐、张高旷,陈,和。这是一个开放分布式根据文章知识共享归属许可(CC)。使用、分发或复制在其他论坛是允许的,提供了原始作者(年代)和著作权人(s)认为,最初发表在这个期刊引用,按照公认的学术实践。没有使用、分发或复制是不符合这些条件的允许。
*通信:应高,gaoying105@163.com;瞿贾,jia.qu@163.com
__这些作者对这项工作同样做出了贡献,分享第一作者