在AMLN Obeticholic酸和ferrostatin-1不同改善非酒精性脂肪肝饮食ob / ob老鼠
Shengjie李1
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Aoxiang诸葛
嘉夏
强强王
圣意汉
Lanjuan李- 1国家重点实验室的诊断和治疗传染病、国家传染病临床研究中心,协同创新中心传染病的诊断和治疗,第一附属医院,浙江大学医学院,杭州,中国
- 2济南山东发酵菌种生物医学实验室,济南,中国
作品简介:非酒精脂肪肝(NAFLD)和非酒精性脂肪肝(NASH)是常见的慢性肝脏疾病有限的治疗方案。
方法:Ob / Ob小鼠(6周)美联储控制饮食或糊精肝脏纳什(AMLN)饮食24周建立纳什的AMLN饮食小鼠接受obeticholic酸(亚奥理事会),ferrostatin-1 7周(Fer-1)或其组合。最后,评估不同的临床资料。
结果:我们的研究结果表明,Fer-1产生更好的影响改善体重、血糖水平、转氨酶水平和胰岛素抵抗与亚奥理事会。亚奥理事会对改善脂质积累有深远的影响。亚奥理事会和Fer-1不同抑制肝枯氏细胞和肝星状细胞的激活。亚奥理事会和Fer-1显著减少炎症和能保护小鼠免受肝脏氧化应激。亚奥理事会和Fer-1不同肠道菌群与影响肝lipidome重塑。
讨论:我们的研究比较亚奥理事会的影响,Fer-1及其组合在纳什不同的临床资料。这些数据表明,不同的药物组合结果的改进,这些发现为亚奥理事会的使用提供一个参考,Fer-1及其组合的临床治疗非酒精性脂肪肝/纳什。
1介绍
非酒精脂肪肝(NAFLD)与肝脂肪变性和纤维化,是一种常见的慢性肝脏疾病在世界范围内(raybet雷竞技下载地址弗里德曼et al ., 2018)。非酒精性脂肪肝的患病率增长随着肥胖和糖尿病的发展,以及全球流行目前估计为25% (Younossi et al ., 2018;Younossi 2019)。随着病情的发展,非酒精性脂肪肝可能发展成非酒精性脂肪肝(NASH),特征是炎症和纤维化;更糟糕的是,这些肝脏损伤可能会导致肝硬化,肝功能衰竭和肝癌(Margini杜福尔,2016)。由于高发病率和实质性的风险负担的医疗体系,迫切需要寻找更有效的治疗。
研究人员发现,多种因素参与NASH的发病和进展(弗里德曼et al ., 2018)。目前,仍然有缺乏药物食品和药物管理局(FDA)批准的治疗非酒精性脂肪肝/纳什,但是一些药物,如胰岛素增敏剂,抗氧化剂,lipotoxicity-based目标,调节胃肠激素和分子核转录因子,一直被认为是替代疗法(Raza et al ., 2021)。Obeticholic酸(亚奥理事会),一个有效的Farnesoid X受体(FXR)受体激动剂来自鹅去氧胆酸,改善非酒精性脂肪肝/纳什通过调节体内胆汁酸合成和肝肠循环(Mudaliar et al ., 2013)。一个多中心、双盲、安慰剂对照临床试验的纳什没有肝硬化患者表示,亚奥理事会增加血糖水平和胰岛素抵抗(Neuschwander-Tetri et al ., 2015)。3期临床试验表明,亚奥理事会(25毫克)显著提高纤维化和纳什在病人的关键组件,但它也引发了不良事件(瘙痒)(Younossi et al ., 2019)。据报道,亚奥理事会管理增加了胆石形成的风险(Al-Dury et al ., 2019)。因此,亚奥理事会改善纳什以多样化的方式,显示了巨大的潜力,但副作用也吸引了我们的注意力。
人们普遍认为肝细胞受损的lipotoxicity释放促炎因子和产生肝毒素的物质,引起应激反应,导致纳什(发,一天2017)。iron-dependent Ferroptosis,诱导的脂质积累活性氧(ROS),是一种新近发现的细胞死亡(迪克森et al ., 2012),最近被发现与NASH的发病(TsurUnited stateski et al ., 2019)。支持这一观点,ferroptosis抑制剂,如liproxstatin-1,被证明是为了减轻肝脏脂质过氧化作用和相关的细胞死亡在蛋氨酸/ choline-deficient饮食(MCD)治疗小鼠(Qi et al ., 2020)。此外,ferrostatin-1 (Fer-1)据报道,改善MCD食源性炎症、纤维化和肝损伤小鼠与纳什(李et al ., 2020)。然而,Fer-1对非酒精性脂肪肝的影响/纳什,以及潜在的机制,仍然需要进一步的研究。
各种各样的药物可能会影响不同的代谢和分子途径(风扇et al ., 2021;Raza et al ., 2021;林et al ., 2022);出于这个原因,结合治疗可能有利于患者通过瞄准不同的病理资料。我们假设与亚奥理事会相比,Fer-1可以分析改善并影响纳什通过不同机制的进展和预后。我们的研究探讨并比较亚奥理事会和Fer-1,单独或结合,影响肝脏组织学,脂质积累,和肝枯氏和星状细胞(HSC)激活以及这些药物对肠道微生物群的影响和肝脏lipidomics糊精肝脏引起的小鼠模型的纳什纳什(AMLN)饮食。
2材料和方法
2.1实验设计
Ob / Ob小鼠(6周大,n= 40)获得GemPharmatech(中国南京)和保存在一个特定的无菌环境与免费的水和食物。经过1周的适应,老鼠被随机分为两组。第一组的小鼠有24周的饮食控制(控制饮食集团,n= 9),而另一组的老鼠有一个AMLN饮食(Fanbo生物科技、上海、中国),由40%的千卡脂肪,w / w胆固醇千卡果糖20%和2%。在24周的时候,美联储AMLN饮食的老鼠被随机重新集结成四个新的子组:AMLN饮食组(n= 9),亚奥理事会集团(n= 9),Fer-1集团(n= 9)和亚奥理事会+ Fer-1集团(n= 10)。然后,亚奥理事会的小鼠组和亚奥理事会+ Fer-1组与obeticholic填喂法酸(亚奥理事会,阳光化工、武汉、中国)的剂量30毫克/公斤(甲基纤维素溶液溶解在0.1%)每日7周,而其他三组的老鼠强饲法同样体积的车辆。此外,老鼠Fer-1组和亚奥理事会+ Fer-1组腹腔注射ferrostatin-1 (Fer-1 Selleck,休斯顿,德克萨斯州,美国)的剂量1毫克/公斤(DMSO溶液溶解在0.1%)每日7周,而在其他三组小鼠腹腔注射同样体积的车辆。短暂的老鼠实验显示在时间表图1一个。在31周的最后一天,所有的小鼠麻醉后被牺牲(小鼠腹腔注射戊巴比妥钠的剂量50毫克/公斤,然后牺牲后证实保持仰卧位和眼睑反射消失)。收集血液,肝组织和盲肠的内容然后储存在−80 C,直到进一步的使用。所有实验动物保健和使用委员会批准第一附属医院,浙江大学医学院(许可证号码:2021 - 1411)。
图1。Fer-1对改善代谢状态的影响表现出优于亚奥理事会AMLN饮食诱导小鼠纳什。(一)实验方案。(B)治疗后体重(左)和治疗后体重增加的百分比(右)。(C)血糖曲线下面积(左)和IGTT(右)。(D)肝功能检测血清(ALT和AST)。(E)水平的PYY组在肝脏(左)和相对的表达PPARγ在肝脏组织。数据显示为±SEM。*p< 0.05,* *p< 0.01,* * *p< 0.001。
2.2葡萄糖耐量和胰岛素抵抗的分析
腹腔内葡萄糖耐量试验(IGTT)是在30周进行的。小鼠禁食过夜(16 h),然后测量空腹血糖水平(0分)第二天早上使用一个(罗氏、巴塞尔、瑞士)。然后,小鼠腹腔注射葡萄糖2 g /公斤,之后血糖水平在不同时间点测定(15分钟、30分钟、60分钟、90分钟)。肽的水平酪氨酸酪氨酸(PYY组)和glucagon-like peptide-1 (GLP-1)在肝脏被评估酶联免疫吸附试验(ELISA) (RayBiotech,亚特兰大,美国)。
2.3血清参数分析
血离心机在3000 rpm 15分钟4 C,然后,血清收集血清参数分析。血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、总胆汁酸(稍后通知)是由一个自动生物化学分析仪测量(迈瑞,bs - 220、深圳、中国)。鼠标Bio-Plex Pro试验(23-Plex面板,Bio-Rad,加利福尼亚,美国)进行测量血清il - 12水平(p40) IL-13, IL-17, TNF-α,角化细胞化学引诱物(KC)和单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)后,制造商的协议。
2.4组织学检查和免疫组织化学染色
肝组织固定在10%福尔马林(24小时),嵌入在石蜡,切成段(2μm),被苏木精和伊红染色())或天狼星红染色,在显微镜下和成像。α-smooth肌肉肌动蛋白免疫组织化学染色(α-SMA)是使用一个anti-α-SMA抗体(Abcam,剑桥,英国1/400稀释)标准程序。ImageJ (Rawak软件,斯图加特,德国)被用来分析正面面积的百分比。
2.5 Dihydroethidium(她)染色,油红O染色
肝组织固定在4%多聚甲醛(24小时),放置在15%蔗糖溶液4 C,然后转移到30%蔗糖溶液脱水和沉积的4 C。脱水组织是嵌入在10月的解决方案,放在一个速冻表,切成段(8 - 10μm),接受她和DAPI染色,荧光显微镜下观察。油红O染色进行油红O染色,并使用冰冻切片苏木精染色。ImageJ (Rawak软件,斯图加特,德国)是用于分析平均荧光强度。
2.6评估肝脏氧化应激
肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)是衡量ELISA (Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国;Abcam,剑桥,英国;中国上海Beyotime)。
2.7实时聚合酶链反应分析
RNeasy +工具包(试剂盒,杜塞尔多夫,德国)应用进行RNA提取肝脏组织根据制造商的建议。随后,提取的RNA是转化为互补使用逆转录化验(豆类、东京、日本)所需的条件。ViiA7实时PCR系统(应用生物系统公司)是用来确定目标基因的相对表达(标准化的看家基因GAPDH)使用SYBR试剂(豆类、东京、日本)。引物序列用于本研究中列出补充表S1。
2.8统计分析
我们应用GraphPad v棱镜。圣地亚哥8 (GraphPad软件公司美国)分析统计差异和画人物。Kolmogorov-Smirnov测试是用来进行正常测试。与正态分布,两组学生的学习任务是用来检查差异,否则,Mann-Whitney U测试使用;方差分析进行检查超过两组SDs相等,否则,Brown-Forsythe和韦尔奇进行了方差分析。结果提出了均值±SEM,和差异p值< 0.05被认为是具有统计学意义。
3的结果
3.1 Fer-1展品更好的影响改善体重、血糖水平、转氨酶水平比亚奥理事会和胰岛素抵抗
AMLN-feeding的过程中,一些老鼠死于纳什进展或其他原因(补充图S1)。AMLN饮食ob / ob老鼠显示稳定的体重没有任何治疗。亚奥理事会对控制体重的影响不大,而Fer-1减缓体重增加(图1 b)。老鼠相比,美联储控制饮食,AMLN饮食小鼠明显较弱的葡萄糖耐量,特点是高曲线下的血糖水平和地区(auc),而Fer-1但不是亚奥理事会治疗逆转这一趋势(图1 c)。同样的趋势是观察到的血清ALT和AST水平(图1 d)。抗胰岛素性分析表明,亚奥理事会和Fer-1显著增加PYY组的血清水平的相对表达PPARγ在肝脏(图1 e)。然而,GLP-1的血清水平显示了这些治疗后没有明显变化(补充图S2)。
3.2亚奥理事会和Fer-1显著改善脂质积累和炎症
作为图2一个所示,AMLN饮食引发更严重的炎症细胞浸润和脂质积累在肝脏比控制饮食。)染色显示,Fer-1稍微降低肝脏炎症,而亚奥理事会和亚奥理事会+ Fer-1明显减轻肝脏炎症。血清分析表明,亚奥理事会和Fer-1不同低水平的细胞因子和趋化因子,和亚奥理事会cotreatment Fer-1显著降低il - 12的水平p40、KC和MCP-1 (图2 b,补充图S3)。油红O染色显示,亚奥理事会和Fer-1明显减轻肝脂质积累(图2一个,图2 c)。一致,亚奥理事会和亚奥理事会+ Fer-1治疗有更好的影响降低血清TC, TG和稍后通知Fer-1治疗(图2 d)。
图2。亚奥理事会和Fer-1显著降低脂质积累和炎症。(一)代表)(上、规模酒吧:100μm)和油红O(低,上规模的酒吧:50μm)染色肝组织,中性粒细胞浸润面积扩大,指出与黑色的箭头(比例尺:50μm)。(B)血清细胞因子水平的il - 12 p40、TNF-αKC和MCP-1。(C)油红O染色的阳性区域。(D)血清TC, TG和稍后通知。数据显示为±SEM。*p< 0.05,* *p< 0.01,* * *p< 0.001。
3.3亚奥理事会和Fer-1不同抑制肝库弗尔细胞和肝星状细胞的激活
天狼星红染色和α-SMA免疫组织化学染色显示AMLN饮食组的小鼠表现出更严重的纤维化比在控制饮食组(图3一)。亚奥理事会和Fer-1差异减少肝纤维化的程度,减少小天狼星红积极区和α-SMA-positive区,但Fer-1展品优越的改进(图3 b)。AMLN饮食显著增加fibrosis-related基因的相对表达(Col1a1和Timp1)在肝脏,而Fer-1显著减少的相对表达Col1a1和Acta2 (图3 c)。
图3。亚奥理事会和Fer-1不同抑制肝Kuppfer细胞和肝星状细胞的激活(一)代表sirius-red染色(上)和α-SMA免疫组织化学(低)染色肝组织(比例尺:200μm)。(B)积极的区域小天狼星红染色和α-SMA染色。(C)相对纤维化相关基因的表达(Col1a1,Acta2和Timp1)在肝组织中。数据显示为±SEM。*p< 0.05,* *p< 0.01,* * *p< 0.001。
3.4亚奥理事会和Fer-1治疗能保护小鼠免受肝脏氧化应激
肝脏氧化应激评估显示,AMLN饮食显著减少肝脏谷胱甘肽的水平,这可能是由亚奥理事会和Fer-1治疗部分逆转。ELISA结果表明,亚奥理事会显著增加SOD水平,和Fer-1显著降低MDA的水平。此外,亚奥理事会和Fer-1治疗明显增加SOD活性,减少MDA的水平(图4一)。与此一致的是,亚奥理事会和Fer-1治疗降低了AMLN食源性肝ROS水平(图4 b,图4 c),显著提高抗氧化基因的表达猫,HO1 NQO1、GPX4在肝脏(图4 d)。
图4。亚奥理事会和Fer-1治疗保护小鼠肝脏氧化应激。(一)水平的氧化应激指标(谷胱甘肽、MDA和SOD)在肝脏。(B)ROS的平均荧光强度。(C)Dihydroethidium染色肝组织(比例尺:50μm)。(D)相对氧化应激相关基因的表达(猫,HO1,NQO1和GPX4)在肝组织中。数据显示为±SEM。*p< 0.05,* *p< 0.01,* * *p< 0.001。
3.5亚奥理事会和Fer-1不同重塑肠道微生物组
Chao1指数有下降趋势,优势度指数在亚奥理事会治疗后小鼠相比AMLN饮食组(图5一个)。PCoA分析表明显然独特的微生物群落的组成其中五组(图5罪犯)。LEfSe分析表明,AMLN饮食增加了丰富的BacteroidotaMuribaculaceae,Desulfovibrionaceae,Peptostreptococcaceae,Romboutsia和Rikenellaceae和减少大量的Erysipelotrichaceae,Dubosiella,厚壁菌门,Bifidobacteriaceae,Actinobacteriota和NK4A214_group(补充图S4A)。然而,亚奥理事会治疗增加了丰富的Mucispirillum,Deferribacteraceae,Lachnospiraceae_UCG_001,微球菌科,Akkermansiaceae,Verrucomicrobiota和Escherichia_Shigella和减少大量的Romboutsia,Peptostreptococcaceae,Desulfobacterota和Blautia(图5 e);亚奥理事会治疗后明显不同的类群丰度所示图5克。所示图5 f的丰度Prevotellaceae增加Fer-1治疗后,丰度的Dubosiella,UCG_010,Sutterellaceae和Parasutterella是降低了。类群Fer-1治疗后显著不同的丰度所示图5 h。LEfSe分析表明Dubosiella,Rikenellaceae,Alistipes,Deferribacteraceae,幽门螺杆菌和Akkermansia同时,丰富的亚奥理事会组吗乳酸菌,Prevotellaceae和Blautia丰富Fer-1组(补充图S4B)。老鼠接受亚奥理事会和Fer-1显示丰度的增加Prevotellaceae和Muribaculum丰度的增大而减小Desulfovibrionaceae,Dubosiella,Rikenella,Intestinimonas,UCG_010老鼠相比AMLN饮食组(图6);然而,单独接受了亚奥理事会治疗的小鼠相比,老鼠接受亚奥理事会和Fer-1显示丰度的增加Prevotellaceae,Blautia,Staphylococcaceae,葡萄球菌丰度的增大而减小Dubosiella,肠杆菌科,Erysipelatoclostridiaceae,Escherichia_Shigella,Providencia,Morganellaceae(图6 c)。类群明显不同丰度之间的亚奥理事会+ Fer-1组和AMLN饮食组或亚奥理事会+ Fer-1组和亚奥理事会所示图6 b, D,分别。
图5。亚奥理事会和Fer-1不同重塑肠道微生物组。(一)α多样性指数(Chao1和主导地位)的五组。(B)主坐标分析(PCoA)基于加权UniFrac距离。(C)改变类群的相对多度的家庭(F)和属(G)的水平。(E-F)LEfSe进化分枝图代表类群丰富的团体。(G)分类单元之间的显著差异AMLN饮食组和亚奥理事会组。(H)分类单元之间的显著差异AMLN饮食组与Fer-1组。数据显示为±SEM(D)。
图6。亚奥理事会和Fer-1不同重塑肠道微生物组。(一)在AMLN LEfSe进化分枝图代表类群丰富饮食组和亚奥理事会+ Fer-1组。(B)分类单元之间的显著差异AMLN饮食组和亚奥理事会+ Fer-1组。(C)LEfSe进化分枝图代表亚奥理事会的类群丰富组和亚奥理事会+ Fer-1组。(D)类群之间的显著差异亚奥理事会组和亚奥理事会+ Fer-1组。数据显示为±SEM。
3.6亚奥理事会和Fer-1不同调节肝lipidome
评估lipotoxic水平纳什模型,我们进行了lipidomics分析肝脂质中识别特定的变更资料,和1465脂质被确定。主成分分析显示明显的分离控制饮食组和AMLN饮食组,以及部分分离这些不同的治疗组(图7)。脂类成分表明,Fer-1治疗增加的比例磷脂酰胆碱(PC)的比例,降低甘油三酯(标签)在肝组织中(图7 b, D)。有一个上升趋势的PC /磷脂酰乙醇胺(PE) Fer-1治疗后(Fer-1组和亚奥理事会+ Fer-1集团)(图7 c)。此外,Fer-1治疗减少ω-3相对丰富的多不饱和脂肪酸(PUFA)丰富的标记和ω-6 PUFA-rich标记(图7 e)。此外,增加电脑Fer-1治疗后更深刻的脂质与少量双键(图7 f),减少标签Fer-1治疗与2 - 5双键只观察到脂质(图7 f)。的前15名中最明显不同的脂质组所示图7 g和各自的p列出的值补充表S2。
图7。亚奥理事会和Fer-1不同调制肝lipidome。(一)五组之间的主成分分析。(B)相对丰度(%)五组中脂类的子类(C)PC / PE的比率。(D)相对丰富的电脑(左)和标签(右)。(E)相对丰富的ω-3 PUFA丰富的标签(左)和ω-6 PUFA丰富的标签(右)。(F)相对丰富的电脑(左)和标签(右)与不同数量的双键。(G)团体之间的前15名最重要的脂质。数据显示为±SEM。*p< 0.05。
4讨论
目前,治疗非酒精性脂肪肝/纳什的主要方法是基于改变生活方式,包括饮食和体重的变化管理,这需要大量的自我控制和协调。药理支持这些病人可能受益无法维持一个健康的生活方式。我们的研究表明亚奥理事会的影响,Fer-1及其组合AMLN食源性纳什在老鼠身上不同的病理参数的变化如图所示。值得注意的是,三种治疗方法都有自己的优势。
Farnesoid X受体(FXR),这是一个受体主要表达在肝脏和肠道,可以调节的合成、运输和胆汁酸的重吸收,还需要一个重要的角色在碳水化合物和脂质代谢(江et al ., 2021)。因此,亚奥理事会激活FXR,被认为是一种很有前途的治疗非酒精性脂肪肝/纳什。在我们的研究中,我们发现,亚奥理事会管理明显减轻肝脏脂质积累和降低血清TC, TG和稍后通知水平在老鼠AMLN食源性纳什。然而,亚奥理事会对控制体重和葡萄糖稳态产生轻微影响。此外,亚奥理事会改善肝纤维化的程度,减少Col1a1基因表达。I型胶原蛋白,这是一个主要的细胞外基质成分,与纤维发生密切相关(Tsukada et al ., 2006)。α-SMA激活肝星状细胞的标志,是在纳什由亚奥理事会部分逆转,但相对的表达ACTA2由亚奥理事会不改变。
Ferroptosis提出了对非酒精性脂肪肝的发生和发展是必要的/纳什,这是我们的实验验证。与亚奥理事会,ferroptosis抑制剂(Fer-1)显著改善控制体重,葡萄糖体内平衡和胰岛素敏感性。值得注意的是,肽yy, gut-secreted激素,产生很强的影响葡萄糖和能源体内平衡(Mishra et al ., 2016),是由Fer-1激活治疗,PPARγmRNA表达Fer-1后也升高,从而调节葡萄糖和脂质稳态(Janani Ranjitha库玛丽,2015)。此外,Fer-1产生更好的影响比亚奥理事会降低转氨酶水平,这表明Fer-1展品保护肝细胞免受lipotoxicity优越的影响。然而,Fer-1不是那么有效亚奥理事会在降低血脂水平,减轻肝脏脂质积累。关于antifibrotic效应,Fer-1展品产生显著的影响,它不仅降低了基因的表达Col1a1而且部分抑制枯氏细胞和肝星状细胞的激活。
亚奥理事会和Fer-1,我们注意到,它在抗炎和抗氧化作用发挥良好的效果。研究人员发现,亚奥理事会改善纳什通过直接抑制NLRP3 inflammasome激活巨噬细胞,这可能减少脂质积累(黄et al ., 2021)。先前的工作已经证明Fer-1纳什(的抗炎效果刘et al ., 2021 a)。此外,亚奥理事会增加抗氧化能力;特别是,它提升了SOD和CAT的水平。一致,研究人员证实亚奥理事会的抗氧化效果由于FXR激活,和亚奥理事会预处理明显减毒丙戊段肝脂质过氧化和内质网应激小鼠(丐et al ., 2020)。此外,Fer-1治疗增加谷胱甘肽peroxidase-4 GSH-dependent酶的水平(GPX4醇),它可以降低脂质过氧化物(Shojaie et al ., 2020),增加了抗氧化能力,特别是提升的水平猫,NQ啊1和H O 1。NQ啊1和H O 1抗氧化基因的下游基因吗Nrf2调节脂质代谢,能保护小鼠免受lipotoxicity和控制纤维发生肝病和致癌作用燕et al ., 2018;李et al ., 2020;摩氏et al ., 2021)。因此,亚奥理事会和Fer-1通过不同途径发挥抗炎和抗氧化作用的影响。亚奥理事会和Fer-1结合时,各自的影响产生,这也许可以解释为什么亚奥理事会和Fer-1发挥最好的抗炎和抗氧化应激的影响。
几项研究已经表明,肠道微生物群参与非酒精性脂肪肝/纳什(梁et al ., 2016;Kolodziejczyk et al ., 2019)。王等人发现拟杆菌门丰富而厚壁菌门在非酒精性脂肪肝患者(耗尽王et al ., 2016)。不断的增加Bacteroidota在减少厚壁菌门后观察AMLN饮食喂养;此外,发生失调,和有益细菌的丰度,例如双歧杆菌属和Dubosiella,是降低了。一方面,研究者发现的损耗厚壁菌门包括SCFA-producingLachnospiraceae(王et al ., 2016由亚奥理事会),这种效果可以逆转治疗在我们的实验中。此外,有益细菌的丰度,如Akkermansia和Mucispirillum,亚奥理事会治疗后增加。值得注意的是,Akkermansia据报道,降低血清甘油三酯水平,防止动物(非酒精性脂肪肝金正日et al ., 2020;Juarez-Fernandez et al ., 2021)。另一方面,Fer-1治疗增加了丰富的Lactobacillales,可以改善非酒精性脂肪肝,调节肠道环境宏基因组和代谢,尤其是色氨酸途径(Yu et al ., 2021)。大量的新功能属Blautia也增加了Fer-1,证明是积极与葡萄糖和脂质稳态改进(刘et al ., 2021 b)。
以前的人类研究表明显著增加肝的总水平饱和脂肪酸(美国)和多不饱和脂肪酸(欧米伽)在非酒精性脂肪肝(NASH患者,而水平的γ亚麻酸(C18:3n-6)和花生四烯酸(C20:4n-6)明显下降(宫et al ., 2007)。个人电脑和体育是主要在哺乳动物细胞膜磷脂,和研究人员已经发现,PC / PE的比率肝病的发展需要一个重要的角色,它是低NASH患者(李et al ., 2006)。因此,亚奥理事会和Fer-1可能增加的比率PC / PE和部分逆转肝病的进展。人们普遍认为过度累积的标签是一个非酒精性脂肪肝的基本特征(唐纳利et al ., 2005),这种积累可以减少Fer-1治疗。的比例ω6到ω3欧最近证明是升高是由于饮食摄入量的增加ω6 PUFA,它被认为是促进发展的非酒精性脂肪肝/纳什(阿瑞亚et al ., 19792004;Masoodi et al ., 2021)。然而,Fer-1-mediated减少标签还包括减少标签包含ω3欧eicosapentanoic (20:5n-3)和docosahexanoic (22:6n-3)。相比之下,有增加的趋势ω3亚奥理事会治疗后PUFA-rich标签,这些分子已被证明具有抗炎和代谢特性(考尔德,2003;Mori et al ., 2003)。
在我们的研究有一定的局限性。首先,我们的研究对亚奥理事会的影响,Fer-1及其对纳什的组合不够彻底,这些影响下的机制仍不清楚。例如,关键的脂质或微生物群中起着关键作用的疾病可能会影响纳什的进展还没有发现。其次,Fer-1是一个新的有前途的药物根据不同疾病的动物研究,而很少有研究能揭示它对动物和人类的安全。因此,Fer-1安全的治疗仍然是一个值得注意的问题。第三,我们的研究是基于小鼠模型,然而在纳什Fer-1病人需要临床试验的效果,也就是说,大量研究的功效Fer-1在人类未来的需要。
总之,我们的研究比较两个有前景的药物的疗效,亚奥理事会和Fer-1治疗非酒精性脂肪肝/纳什基于评估的各种参数,包括代谢状态、炎症、纤维化,氧化应激,微生物群和lipidome。亚奥理事会在改善有显著影响肝脏脂质积累和肝纤维化,丰富有益的细菌,如Lachnospiraceae,Akkermansia和Mucispirillum,增加的水平ω3 PUFA-rich标签。Fer-1在体重控制中扮演着关键角色,葡萄糖体内平衡和胰岛素敏感性,减轻肝纤维化和降低肝标签。亚奥理事会和Fer-1产生优秀的抗炎和抗氧化应激的影响,增加了大量的新功能属Blautia以及PC / PE的比率。不同的药物组合施加自己的影响,每一种都有其优点。我们的研究提供了参考亚奥理事会的影响,非酒精性脂肪肝/纳什Fer-1及其组合,从而使其成为可能的策略在未来治疗非酒精性脂肪肝/纳什。
数据可用性声明
最初的贡献提出了研究中都包含在这篇文章/补充材料,进一步的调查可以针对相应的作者。
道德声明
动物研究是审查和批准的动物保健和使用委员会第一附属医院、浙江大学医学院(许可证号码:2021 - 1411)。
作者的贡献
SL、阿兹和千瓦:构思和设计实验。SL, AZ,千瓦,JX、QW SH,和JS:进行实验,收集样品。我的实验提供资源。SL和阿兹:分析数据。SL和阿兹:起草了手稿。SL和阿兹:软件进行分析。所有作者已阅读及同意发布版本的手稿。
资金
这项研究得到了国家重点研究和发展项目的中国(2021 2018 yfc2000500 2021 yfa1301104 yfc2301804),中国国家自然科学基金(81790613和81790613)和济南山东发酵菌种生物医学实验室的研究项目(jnl - 2022001 a)。
的利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
出版商的注意
本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。
补充材料
本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2022.1081553/full补充材料
引用
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关键词:obeticholic酸,ferrostatin-1、肝病、氧化应激、纤维化,微生物,lipidomics
引用:夏王李年代,诸葛,K, J,王Q,汉族,沈J和李L (2022) Obeticholic酸和ferrostatin-1不同在AMLN改善非酒精性脂肪肝饮食ob / ob老鼠。前面。杂志。13:1081553。doi: 10.3389 / fphar.2022.1081553
收到:2022年10月27日;接受:08年12月2022;
发表:2022年12月16日。
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