黄素蛋白荧光高度是线粒体氧化应激的标记在视网膜疾病患者

介绍

线粒体是细胞的基本组成部分的能源生产、细胞凋亡、类固醇合成、细胞信号和维持体内平衡(1- - - - - -4)。它们的氧化磷酸化,因此氧依赖性的三磷酸腺苷(ATP)生产至关重要。视网膜细胞新陈代谢是高度活跃基线耗氧量高要求,因此特别容易线粒体功能障碍。细胞凋亡可能通过释放活性氧代谢产物影响线粒体DNA (mtDNA)和电子传递链(5,6)。不恰当的诱导细胞凋亡与激活caspase-3导致过早失去细胞和随后的组织功能障碍(7)。

线粒体功能障碍继发于氧化应激已经证明开无数视网膜疾病的发病机制,如年龄相关性黄斑变性(AMD),糖尿病性视网膜病变(DR),视网膜静脉阻塞(RVO) (8- - - - - -11)。氧化应激的结果活性氧的积累超过细胞的抗氧化防御能力(12)。在健康细胞,活性氧是回收锰超氧化物歧化酶等抗氧化酶(5)。在压力下,黄素蛋白与线粒体电子传递链的酶氧化,发出绿色刺激时,自发荧光蓝色光(13- - - - - -16)。黄素蛋白的光谱性质曾被认为是不同于其他视网膜荧光团,如脂褐质(4)。因此,评估水平的线粒体黄素蛋白荧光(基维辛迪)可以作为衡量人类视网膜内的代谢功能障碍(4,17)。

传统上,视网膜损伤评估了结构性变化发生在疾病的设置。然而,这种方法表明,代谢紊乱的归宿,但并不敏感检测实时氧化压力的波动。最近,线粒体的功能成像方法已经开发的提供在活的有机体内基维辛迪的定量信息。之前的研究涉及干燥的年龄相关性黄斑变性,可见到大脑,青光眼,和中央基维辛迪的成像测量浆液性脉络膜视网膜病变的患者的视网膜与黑色背景electron-multiplying电荷耦合装置(EMCCD)相机配备了芯片(512 x 512像素14,15,18- - - - - -22)。这些视网膜代谢成像设备已经经历了三个迭代,与第一个迭代捕获基维辛迪3°的视野(4)。设备的最新一代捕捉60°的红外图像x 21.5°,基维辛迪的形象17°x 21.5°的视野。所有三代使用1 ms的蓝色闪光(455 - 470 nm)来捕获荧光在520 - 540海里。基维辛迪主要表示为两个参数称为基维辛迪强度和基维辛迪异质性(4)。前者反映了全球信号强度测量平均像素强度超过5.5毫米直径的地区集中在黄斑或视神经头(4,23)。后者捕获所有像素的信号强度的变化在该地区利益的成像。基维辛迪强度水平升高和异质性与疾病进展和可能的价值评估临床严重程度,敏锐的疾病,预后和预测(21,24,25)。

建立在这些以前的作品,本研究使用OcuMet信标^®第三代视网膜代谢分析设备,量化基维辛迪患者视力损害的主要原因(四26)。本研究的主要目标之一是评价OcuMet信标的敏感性和特异性^®在区分健康控制眼睛和患病的眼睛。第二个目标是扩大基维辛迪的临床研究受试者与视网膜静脉阻塞(RVO),是一种迄今为止还没有被研究过。最后,我们的第三个目标是调查基维辛迪之间的关联和最佳矫正视力(BCVA)在不同的疾病状态。这里,我们演示基维辛迪的一致的响应的敏感指示器跨各种疾病和代谢功能障碍与视力的重要的协会。进一步描述,基维辛迪可能成为临床上有用的评估治疗的影响各种干预措施旨在减少氧化应激在人的视网膜。

材料和方法

研究人群

这个横断面观察性研究是在纽约进行的眼睛和耳朵在纽约西奈山医院,美国。研究机构审查委员会批准的协议(IRB)和遵守赫尔辛基宣言中概述的指导方针。书面知情同意之前就从所有参与者获得包含的学习和参与讨论的学习方法以及相关的风险和好处。共有76名和24的同龄健康对照组的受试者招募2021年10月至2022年8月。病人的人口统计信息、疾病数据年表的疾病、视网膜诊断、和sub-classification视网膜疾病是通过检查他们的电子医疗记录和整理确认同意的过程中。三个控制被排除在本研究之外,因为它被发现后,招聘,他们被诊断为2型糖尿病。博士和三个,一个控制,两个RVO科目数据收集后被排除在外,因为它被发现在回顾性的图表总结白内障手术的患者事先有一个历史的研究。一个主题与视网膜中央静脉阻塞(CRVO)同时被排除在外,因为他被诊断为患有青光眼。一个主题的数据与中央浆液性脉络膜视网膜病变(CSR)被排除在外,因为病人报告登记后诊断为结节病。两个科目渗出性AMD被排除在外,因为图像质量差二次定位不当的病人的头部下巴休息。

最后分析对象包括67例和21的同龄健康对照组。入选标准为研究对象的单一诊断RVO,博士有或没有黄斑水肿、渗出型AMD,或CSR成像眼,除了自然的晶状体,固定好,清晰的媒体,和Snellen BCVA比20/200。学科与其他伴随的视网膜病理除了初步诊断被排除在研究之外。其他排除标准包括手术适应症或手术前的历史影响角膜曲率;激光手术的历史在过去3个月;白内障手术由于历史数据证明人工人工晶状体展览水平的提高荧光相比,天然水晶透镜;不受控制的高血压;的存在系统性血管疾病,如镰状细胞病和系统性炎性疾病如人类免疫缺陷病毒(HIV);当前系统性免疫抑制;糖尿病; retinal or vitreous hemorrhages that obscure the macula; ≥ Grade 3 nuclear sclerotic, cortical, or posterior subcapsular cataract based on the Lens Opacity Classification System III; inability to fixate; inability to comply with study procedures; active anterior chamber inflammation; and neurodegenerative disorders such as Alzheimer’s and Parkinson’s disease. Only one eye from each subject was included for imaging and data analysis to avoid interocular correlation. Enrollment of age-matched controls involved recruiting subjects between 43 and 74 years of age with natural crystalline lens with no evidence of vitreoretinal disease. Controls were also required to have a BCVA of 20/25 or better and no prior history of ocular pathology or ocular surgery.

入学前在这项研究中,所有患者接受了全面的眼科评估包括ETDRS视力测试,裂隙灯活组织镜检查,瞳孔扩张使用tropicamide 1%滴眼液和盐酸去氧肾上腺素2.5%滴眼液进行两次每隔5分钟,tono-pen张力测定法(Reichert技术,位于纽约州迪普市,纽约),扩张眼底摄影(光电子,马尔伯勒,MA),和八面体成像(XR两代情;美国Optovue, Inc ., Fremont, CA)。病人在他双眼满足入选标准,随机选择一个眼睛夹杂物的研究。

博士患者评估属于视网膜服务non-proliferative糖尿病性视网膜病变(NPDR)或增生性糖尿病视网膜病变(PDR)或没有临床意义上的黄斑水肿治疗糖尿病视网膜病变早期研究显示(ETDRS)标准(27)。RVO患者分为拥有视网膜中央静脉阻塞(CRVO)或视网膜分支静脉阻塞(BRVO)通过图表回顾和扩张眼底检查发现,颜色fundoscopic图像和IVFA图像采集的图像在六个月内。CSR患者分为活动或慢性非活动使用诊断广角IVFA成像和10月(28- - - - - -30.)。渗出型AMD患者都指出是先进的新血管形成的案件按照年龄相关性眼病研究(火鸟)危险因素评分系统(31日)。

视网膜代谢分析图像采集和处理

视网膜是由线粒体的功能成像测量使用OcuMet信标在黄斑基维辛迪值^®(安阿伯OcuSciences MI;临床实验的设备)(图1)。设备被归为一组1光安全在美国国家标准协会(ANSI) z80.36 - 2016年和15004年国际标准化组织(ISO)的指导方针。它捕获60°的红外图像x 21.5°,基维辛迪17°x 21.5°的形象。光学过滤器的激发和峰值黄素蛋白发射是为了最大限度地提高信噪比,减少混淆荧光从其他视网膜荧光团包括脂褐质。每个主题的瞳孔扩张前成像。黄斑是暴露于60 ms激发闪光。图片被排除在本研究之外,如果他们的低质量由于贫穷的焦点,睫毛干扰或学生种植。所有图片都存储为1920 x 700像素的12位灰度PNG文件。集成Ocumet^®图像软件包分析平均基维辛迪的图像像素强度和异构性,从17°矩形域内的所有像素。一黄斑形象主题是包含在分析和主观评估由同一运营商的图像质量。基维辛迪异质性也自动计算直方图曲线的平均宽度1/2的最大基维辛迪频率(4)。复合的基维辛迪和红外图像比较控制对象的视网膜疾病的受试者与每个州调查在这项研究中被发现图2。

统计分析

使用SPSS 24.0统计分析(美国IBM公司,芝加哥,IL)和Microsoft Excel(微软公司,微软,佤邦)。在Snellen BCVA转化为LogMAR进行统计分析。单向方差分析测试事后图基测试是用来评估年龄不同疾病之间有无显著差异组相比,控制。由于样本量有限,不是所有组会见了Kolmogorov-Smirnov测试正常,初步分析的非参数和克鲁斯卡尔-沃利斯测试事后Mann-Whitney U测试Holm-Bonferroni校正的多重比较。的事后分析的目的是控制experiment-wise 1型错误率。

分层RVO之后,博士,CSR疾病组,sub-analyses值PDR和NPDR相比,活跃和慢性不活跃的企业社会责任,和CRVO BRVO患者与健康对照组,分别。相关性分析使用斯皮尔曼等级相关系数(ρ)因为基维辛迪和BCVA数据不是正态分布。单变量回归分析进行评估BCVA基维辛迪强度和非均质性的影响。接受者操作特征(AUROC)曲线下的面积和95%可信区间(CI)是用来评估的诊断能力基维辛迪强度和基维辛迪异质性指标区分健康的同龄的眼睛(控制)和眼睛视网膜病理。AUROC曲线是可视化使用GraphPad棱镜版本9.0 (GraphPad软件公司,圣地亚哥,CA)。一个p被认为具有统计显著性值小于0.05。

Intra-visit OcuMet信标的可重复性^®扫描在黄斑使用变异系数为特征。四个连续的图像从一个代表眼病和代表控制眼睛被用来计算这个指标。计算来自基维辛迪获得值的标准差除以他们的意思。

结果

参与者的特征

人口特征对所有都包含在主题和控制补充表1。67的76例称为视网膜代谢成像满足入选标准,使用OcuMet信标成像^®确定的平均基维辛迪像素强度成像眼睛以及他们在Snellen BCVA他们的最后一次访问。总的来说,年龄中位数±四分位范围(差)为58.5±13年,42(47.7%)是女性。白色种族分布40(45.4%),17(19.3%)的黑人,8(9.1%)亚洲,23(26.1%)拉美裔。眼睛一侧是43 (48.9%)OD和45(51.1%)操作系统。年龄中位数±差为健康对照组55±9 (N范围:43 - 74年)= 21日相比,59±10 RVO队列(N= 20,范围:36 - 77年),博士群59±11.25 (N= 20,范围:40 - 80年),70±15渗出型AMD队列(N= 17,范围:48 - 87年),CSR队列和54±11.75 (N= 10,范围:35 - 65年)。

Intra-visit重复性

基维辛迪强度和基维辛迪异质性的变异系数代表眼病分别为1.68%和16.39%,分别。影响控制的眼睛,基维辛迪强度和基维辛迪异质性的变异系数分别为2.82%和7.29%,分别。

面积接受者操作特征分析

AUROC分析是利用比较黄素蛋白荧光指标的区分所有四个患者疾病控制的影响。AUROC曲线分析的结果所示图3和表1。基维辛迪强度显示一致的诊断能力区分健康的同龄的眼睛和患病的眼睛时感兴趣的区域(ROI), AUROC值从0.927,0.951,0.989,和0.921 RVO,博士,渗出性AMD,分别和CSR。基维辛迪异质性表明诊断能力差RVO (AUROC = 0.689)。良好的诊断能力证明博士和CSR (AUROC = 0.730和0.731,分别)。最高分化为基维辛迪指出异质性的渗出性AMD (AUROC = 0.901)。

黄素蛋白荧光分析

所示补充表2,克鲁斯卡尔-沃利斯检验证明,有统计上的显著差异意味着基维辛迪强度之间的不同疾病组与健康对照组(χ²(2)= 42.94,p= 1.06 x 10⁸)。意味着基维辛迪(±SD)强度值最低的健康对照组(30.62±8.03,95% CI = 26.96 - 34.28),其次是RVO (53.80±17.97, 95% CI = 45.39 - 62.21), CSR (53.80±14.34, 95% CI = 43.54 - 64.06),博士(61.75±19.84,95% CI = 52.47 - 71.03)。值得注意的是,渗出型AMD受试者平均基维辛迪强度得分是2.2倍健康对照组(67.47±17.77,95% CI = 58.33 - 76.61)。盒子,须为每组块基维辛迪强度值所示图4一。事后成对比较非参数克鲁斯卡尔-沃利斯测试后表明,基维辛迪强度值明显高于各疾病组与健康对照组相比表S3)。重要的是,渗出性AMD受试者基维辛迪强度得分显著高于RVO主题(p= 0.048),表明有限的特异性的基维辛迪不同疾病状态之间的差别(图4一)。

Sub-analysis PDR和NPDR科目比较表明,两组在统计学上显著高于基维辛迪强度值与健康对照组(p< 0.001,p分别为< 0.001,图4 b;表S4)。没有统计上的显著差异基维辛迪PDR和NPDR科目之间的强度(p= 0.948)。控制相比,活跃CSR受试者高意味着基维辛迪强度值(p< 0.001,图4 c;表S5)。之间没有显著差异长期不活跃的企业社会责任对象和控件(p= 0.074)。CRVO和BRVO的主题显示统计上显著高于基维辛迪强度值相比,控制(p分别为< 0.001,p < 0.001,图4 d;表S6)。基维辛迪强度没有显著差异CRVO和BRVO科目之间的分数(p= 0.619)。

基维辛迪异质性是统计学意义在所有组(χ²(2)= 17.327,p= 0.002)(补充图1;表S2)。意味着基维辛迪异质性(±SD)健康对照组的值,RVO,博士,渗出性AMD和CSR患者分别为15.62±2.87 (95% CI = 14.31 - 16.93), 18.00±4.10 (95% CI = 16.08 - 19.92), 21.80±10.44 (95% CI = 16.91 - 26.69), 23.12±9.91 (95% CI = 18.02 - 28.21), 18.70±4.19 (95% CI = 15.70 - 21.70),分别。因果两两比较显示,健康对照组和所有四个疾病组之间的差异具有统计学意义(补充图1;表S3)。所有其他的比较并不重要。Sub-analysis PDR和NPDR科目比较表明,基维辛迪异质性明显升高PDR和NPDR受试者相比年龄组(p= 0.046,p分别为= 0.031,补充图1 b;表S4)。基维辛迪异质性值之间在统计学上没有显著不同活动和慢性非活动CSR受试者相比,健康对照组(p= 0.117,补充图1 c)。基维辛迪异质性还发现不CRVO之间明显不同,BRVO和年龄组(p= 0.112,补充图1 d)。

斯皮尔曼等级相关分析显示,基维辛迪强度值是适度与BCVA(ρ= 0.595,p= 9.62 x 10^-10年,95% CI = 0.362 - 0.666)(表2;图5)。基维辛迪异质性值也发现弱与BCVA(ρ= 0.306,p= 0.004,95% CI = -0.089 - 0.323)。

最佳矫正视力分析

最佳矫正视力(BCVA)从控制差异统计学意义在所有组(χ²(2)= 39.481,p= 5.54 x 10⁸,补充图2一个;表S2)。意味着BCVA (±SD)在健康对照组LogMAR, RVO,博士,渗出性AMD和CSR患者分别为0.00±0.00,0.38±0.32 (95% CI = 0.23 - 0.53), 0.25±0.18 (95% CI = 0.17 - 0.34), 0.32±0.19 (95% CI = 0.23 - 0.42),和0.18±0.15 (95% CI = 0.06 - 0.29),分别。因果两两比较显示BCVA明显贫困与健康对照组相比,所有四个疾病组(表S3)。所有其他的比较没有统计学意义。因果两两比较显示,PDR的BCVA NPDR受试者统计上显著降低的年龄组(p< 0.001和p分别为= 0.001,补充图2 b;表S4)。之间的BCVA PDR和NPDR科目没有显著不同(p= 0.274)。两活动和慢性非活动的BCVA CSR受试者明显低于年龄组(p< 0.001和p分别为= 0.002)(补充图2 c;表S5)。CRVO和BRVO的BCVA受试者明显低于年龄组(P< 0.001和P分别为< 0.001,补充图2 d;表S6)。之间没有统计上的显著差异的BCVA CRVO和BRVO科目(p= 0.708)。

讨论

基维辛迪量化黄素蛋白的荧光)是一种新颖的和潜在的有用的技术来评估临床严重程度,预测预后,并检测治疗反应的病人患有各种视网膜疾病。在这项研究中,我们选择调查患者的视网膜基维辛迪的影响四个主要的病理影响眼睛的黄斑:渗出性AMD,博士,RVO, CSR (26)。这些障碍和/或导致的结果重要视网膜氧化应激。我们想要测量的临床效用基维辛迪通过确定其在区别健康和患病的特异性和敏感性的眼睛。此外,虽然通常后疾病严重程度的指标,BCVA是关键功能性视网膜健康的标志。出于这个原因,我们想调查之间的关系以BCVA基维辛迪和视觉结果。

与传统结构测试(IV荧光素血管造影(IVFA)或扩张眼底摄影,基维辛迪无创性评估线粒体功能异常在人类视网膜在活的有机体内。线粒体是人口最集中在视网膜神经纤维层,视网膜神经节细胞,内网状层,外网状层,感光细胞的外层部分,RPE细胞的基底表面,细胞色素氧化酶(COX)染色(32)。陈等人描述和安德拉德Romo et al .,基维辛迪信号强度直接对应于时尚⁺分子氧化二级衰老或疾病(4,21,33)。它不能被引起的细胞已经死亡或凋亡的最后阶段。氧化黄素蛋白的荧光信号是有别于传统眼底autofluoresence(快),这主要是由于脂褐质。目前这一代OcuMet信标^®本研究用于最小化的贡献等视网膜荧光团的荧光脂褐质通过窄带滤波器乐队基维辛迪激发和发射峰。拟议的机制基维辛迪强度与线粒体功能障碍是,后者导致营业额的增加lipid-rich细胞膜,进而导致生物活性脂质水平增加,活性氧和脂质过氧化物,上调NK-kB和p38增殖蛋白激酶(MAPK) (34- - - - - -36)。p38 MAPK通路被指出特别活跃在RPE和感觉神经的视网膜,与促炎细胞因子如il - 1的感应B肿瘤坏死因子-α和il - 6 (37,38)。

这是特别重要的考虑到在我们的研究中,受试者最高架基维辛迪强度和异质性分数渗出型AMD群内被发现。如前所述,渗出性老年性黄斑病变的病理生理学包括变性RPE细胞的活性氧的积累和随后的氧化应激损害mtDNA RPE (6,32)。在健康,RPE起着至关重要的作用在维护视网膜的运送血源性营养健康血管感光细胞和吞噬光感受器外段(39)。在渗出性老年性黄斑病变,一种理论提出,受损的感光细胞的自噬外段RPE有助于疾病的进展(40)。RPE损伤被认为引发慢性炎性反应的布鲁赫膜和脉络膜(41)。进一步发展的异常细胞外基质沉淀RPE破坏,后来导致choriocapillaris和脉络膜视网膜萎缩和新血管形成(42)。它已经表明,人类RPE细胞过氧化氢处理演示优惠mtDNA由于氧化应激损伤(43- - - - - -45)。布朗等人也证明RPE和感光器损坏Sod2小鼠减少RPE功能和增加氧化应激水平与野生型相比控件(46)。

在我们的研究中,AUROC分析表明,基维辛迪强度和基维辛迪异质性都能够区分健康控制眼睛和患病的眼睛,基维辛迪强度相对比基维辛迪异质性更敏感。基维辛迪强度和异质性与BCVA呈正相关,提供客观的确认这个主观的措施。糖尿病患者表现出明显高于基维辛迪强度和异质性分数年龄组相比。PDR和NPDR受试者表现出基维辛迪强度和异质性分数2和1.4倍,分别比年龄组中找到的值。拟议机制的线粒体功能障碍发生在糖尿病性视网膜病变包括慢性高血糖刺激山梨糖醇的生产通过多元醇通路,先进的糖化终端产品(年龄),和其他有毒的促炎症代谢产物通过甘油二酯蛋白激酶C (DAG-PKC)通路(47- - - - - -49)。此外,基维辛迪强度和异质性是不成比例的升高博士群体,因为大量的黄斑水肿患者博士与内在blood-retinal屏障破裂的现象(50- - - - - -52)。慢性高血糖会导致微血管病和血管渗漏,可进步黄斑水肿,毛细血管闭塞,后者可引起视网膜缺血和随后的新血管形成(53,54)。严重NPDR的不成比例的流行在我们的博士群体可能导致类似基维辛迪强度和异质性PDR和NPDR组之间的值。

CSR群体也表现出基维辛迪强度值,与对照组的1.7倍。虽然CSR的病理生理学是知之甚少,病变通常位于黄斑,导致血管外的流体通过RPE渗漏进入视网膜下空间(30.,55- - - - - -57)。Daruich等人能够证明氧化应激生物标志物的水平增加,丙二醛,在人类患者CSR的眼泪(58)。在我们的病人,感觉神经的或RPE感官分遣队的阻碍的能力区分疾病过程的贡献水平的代谢压力由压力引起的二次分遣队的。这是符合民族解放军et al。在主题的发现证明基维辛迪高程与两国企业社会责任缺乏sub-RPE或视网膜下液(14)。他推测,基维辛迪水平升高透露一些持续的压力在眼睛疾病代谢甚至亚临床表现。

RVO组表现出类似的升高意味着基维辛迪强度值基维辛迪分数CSR队列中,表明能找到类似的氧化应激水平的两个条件。这些发现符合陈et al。”年代研究,发现氧化应激水平升高RVO主题以丙二醛8-hydroxy-2-deoxyguanosine (MDA)和过氧化氢(H₂O₂)(59)。视网膜静脉闭塞性疾病引起的视网膜静脉阻塞下水道进入视网膜中央静脉,导致黄斑水肿、出血和快速丧失视力从缺血(60)。重要的是,视网膜静脉阻塞会引起视网膜神经节细胞凋亡在缺血条件下生成活性氧和膜脂质过氧化(11)。基维辛迪强度得分CRVO和BRVO科目之间也是相似的。基维辛迪异质性,然而,不是CRVO之间统计上显著不同,BRVO和年龄组。高架基维辛迪异质性假设揭示基维辛迪信号强度的变化由于疾病过程的影响在不同的黄斑视网膜细胞(4)。基维辛迪异质性表现出低水平的intra-session重复性的变异系数为16.39%表明基维辛迪异质性可能是一个更复杂的代谢压力指标仍然是更好的理解。

到目前为止,这是第一个研究评估的有效性和可靠性基维辛迪RVO患者群,博士,渗出性AMD, CSR相比,控制眼睛没有眼部病变的证据。这也是第一个研究探讨视网膜在受试者受RVO基维辛迪。2012年,菲尔德等人用第二代OcuMet信标^®设备在视网膜基维辛迪无创性测量海拔6 non-exudative年龄相关性黄斑变性患者,其中三个展示地理萎缩(GA),相比年龄组(20.)。eln等人数据来自14个糖尿病患者相比,1先进non-exudative AMD患者,1 CSR患者和1色素性视网膜炎患者和得出结论,基维辛迪值都与对照组相比显著升高(14)。最近,陈等人一群151年相比对照组有117糖尿病患者,发现一个统计上的显著差异在基维辛迪强度和两组之间的异质性(4)。有趣的是,在我们的研究结果相比,作者报告,基维辛迪异质性高,而不是基维辛迪强度,是视力差的预测。

值得注意的是在我们研究设计的一些局限性。首先,我们企业社会责任的相对较小的样本量队列限制了普遍性的结论。然而,这是第一个研究包括十个企业社会责任对象的调查视网膜黄素蛋白自体荧光;eln等的研究只包括2 CSR主题和领域et al。年代研究相比基维辛迪数据从3单边CSR学科影响眼睛和6年龄组(14,19)。的小样本大小博士队列限制我们的能力subclassify NPDR病人早期,温和,和严重的临床严重程度阶段根据早期治疗糖尿病性视网膜病变的研究(ETDRS)标准。小样本大小也阻碍了我们的能力分层RVO例为缺血性和non-ischemic病例。在未来,需要有大量的样本研究来验证我们的初步结果。第二,尽管我们做了测试shot-to-shot再现性的形式intra-session重复性指标,我们没有测试纵向intersession再现性。一个基维辛迪图像集中在一个时间点是黄斑包含在每个病人的分析,导致无法测量数据的intersession可变性。第三,有些病人注射用抗血管治疗包括博士和渗出性AMD军团和疾病持续时间变量没有控制在这个研究。理论上,注射vegf的早期治疗干预和管理在日常的基础上可能导致预期基维辛迪和BCVA值。最后,年龄中位数年龄健康控制主题队列后5年内所有疾病组除了渗出型AMD队列,这可能有困惑的结果这一特定疾病组。虽然OcuMet灯塔^®旨在减少荧光信号从其他视网膜荧光团如脂褐质,随着年龄的增加,就有可能在视网膜发出的荧光信号被荧光部分污染其他眼部结构,像水晶透镜。色氨酸的光谱曲线和non-tryptophan荧光团的镜头落在295 - 329海里,364 - 472 nm, 437 - 523 nm,分别表现出最小重叠的激发和发射峰视网膜黄素蛋白(4)。之前它已经被证明自然荧光团病人的镜头随着年龄的增加,这可能会影响从视网膜荧光信号(18)。视网膜荧光信号不太可能被污染的角膜荧光团,这展览激发峰附近的300 - 360和370 - 440 nm (4)。

总之,这项研究强调了黄素蛋白荧光的效用作为一个快速、无创,线粒体功能障碍的定量指标由于氧化应激在人的视网膜在活的有机体内。基维辛迪强度被证明是一个健壮的和敏感的指标来评估疾病严重程度与BCVA患病的眼睛和显著相关。我们的研究结果与先前的研究报道在协议,基维辛迪强度临床上有用的诊断能力区分健康的眼睛从患病的眼睛,尤其是渗出性AMD科目。大,纵向未来的调查将需要评估其效用监测治疗干预患病的眼睛或预测pre-structural轨迹的各种疾病。

数据可用性声明

原始数据支持了本文的结论将以书面请求的作者,没有过度的预订。

道德声明

涉及人类受试者的研究回顾和批准纽约眼耳医院机构审查委员会。患者/参与者提供了他们的书面知情同意参与这项研究。

作者的贡献

所有作者证明他们为作者达到当前的国际标准。山:概念化、调查方法、数据收集、数据分析、写作、资金收购。HA:写作、数据分析和解释。OO-M:概念化,数据分析和解释。JM:数据收集、写作。DZ:写作-审查和编辑。CR:数据分析和解释,写-审查和编辑。RR:概念化、写作——审查和编辑、融资收购。所有作者的文章和批准提交的版本。

资金

这份报告是由美国国家眼科研究所的美国国立卫生研究院R01EY027301奖号码。额外资助这项研究的经费由纽约眼耳医院基金会、Marrus家族基金会,挑战授予奖项从研究防止失明,豪尔赫·n·巴克斯顿显微外科的基础。

确认

我们要感谢Kurt Riegger朱迪,安东尼•Leithauser玛丽罗哈斯,约翰多赛特的宝贵意见和帮助在准备这个手稿。

的利益冲突

RR有以下商业关系声明:Optovue:代码C顾问;阿斯特拉:C代码;顾问;Boehringer-Ingerheim:代码C顾问;CellView: C代码;OD-OS: C代码;Opticology:代码我个人经济利益;Regeneron: C代码;Lumithera:代码C顾问;Guardion健康:代码C顾问; Bayer: Code C Consultant; Genentech-Roche: Code C Consultant. CR has the following commercial relationships to declare: OcuSciences: Code I Personal Financial Interest.

其余作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。

出版商的注意

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补充材料

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补充图1 |盒子,须块黄素蛋白荧光(基维辛迪)之间的异质性(一)未受影响的同龄对照组RVO相比,CSR,博士,和渗出性AMD科目;(B)年龄组相比,PDR NPDR科目;(C)年龄组相比,CSR活动和慢性非活动主题;和(D)年龄组相比CRVO和BRVO科目。重要的p值显示;所有其他的成对比较没有统计学意义(p> 0.05)。RVO,视网膜静脉阻塞;博士,糖尿病性视网膜病变;湿性AMD,湿年龄相关性黄斑变性;企业社会责任,中央浆液性脉络膜视网膜病变;PDR、增生性糖尿病性视网膜病变;NPDR non-proliferative糖尿病性视网膜病变;CRVO、视网膜中央静脉阻塞;BRVO,视网膜分支静脉阻塞。

补充图2 |盒子,须块最佳矫正视力(BCVA)之间(一)未受影响的同龄对照组RVO相比,CSR,博士,和渗出性AMD科目;(B)年龄组相比,PDR NPDR科目;(C)年龄组相比,CSR活动和慢性非活动主题;和(D)年龄组相比CRVO和BRVO科目。重要的p值显示;所有其他的成对比较没有统计学意义(p> 0.05)。RVO,视网膜静脉阻塞;博士,糖尿病性视网膜病变;企业社会责任,中央浆液性脉络膜视网膜病变;PDR、增生性糖尿病性视网膜病变;NPDR non-proliferative糖尿病性视网膜病变;CRVO、视网膜中央静脉阻塞;BRVO,视网膜分支静脉阻塞。

补充表1 |研究人群基线特征和人口统计数据(N = 88)

补充表2 |平均值±SD和95%可信区间(CI)为基维辛迪强度,基维辛迪异质性,BCVA所有疾病组相比未受影响的年龄组。*显示统计学意义。

补充表3 |P值从事后两两比较后克鲁斯卡尔-沃利斯测试比较基维辛迪强度,基维辛迪异质性,BCVA疾病组之间。^*显示统计学意义。

补充表4 |P值从事后两两比较后克鲁斯卡尔-沃利斯测试比较基维辛迪强度,基维辛迪异质性,与BCVA PDR, NPDR和对照组。^*显示统计学意义。

补充表5 |P之间的值从克鲁斯卡尔-沃利斯测试比较基维辛迪强度和BCVA活跃的企业社会责任,长期不活跃的CSR和对照组。Kruskal沃利斯两两比较后表明,没有统计上的显著差异基维辛迪异质性之间的活跃的企业社会责任,长期不活跃的CSR和年龄组(P= 0.117)。^*显示统计学意义。

补充表6 |P值从克鲁斯卡尔-沃利斯测试比较基维辛迪强度,基维辛迪异质性,BCVA CRVO之间,BRVO和对照组。基维辛迪年龄组之间的异质性,CRVO BRVO受试者不显著(P= 0.112)。^*显示统计学意义。

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