抗体的免疫球蛋白在轴向spondyloarthritis年初同形像小说抗原

介绍

轴向spondyloarthritis (axSpA)是一种慢性风湿性炎症性疾病,主要影响骶髂关节和脊柱。尽管主要轴向参与,还周边关节,entheses和关节外组织包括眼睛,可以影响肠道和皮肤(1)。AxSpA病人可以分为射线SpA,传统上称为强直性脊柱炎(as),或作为non-radiographic SpA。而与结构是一种axSpA骶髂关节损伤射线照片上可见,non-radiographic axSpA用于分类的病人,使用x射线成像(这种可能的损害是不可见的1)。

目前,临床诊断axSpA的风湿病学家基于症状和体征的组合。持续炎症性下腰痛疾病的主要标志,通常伴随着外围联合表现包括关节炎、enthesitis指炎和/或关节外表现如牛皮癣、葡萄膜炎、泌尿生殖炎症,炎症性肠病。缺乏诊断标准,评估Spondyloarthritis国际社会(研究)分类标准通常申请诊断的病人患有慢性下腰痛与涉嫌SpA (CLBP)和(2)。这些标准结合体检,骶髂关节炎的成像和实验室检测人类白细胞抗原B27 (HLA-B27)和c反应蛋白(CRP) (2,3)。在疾病的早期阶段,它仍然是非常具有挑战性的区分axSpA从人与非炎症CLBP患者。尽管磁共振成像(MRI)的可用性,诊断延迟患者疑似axSpA 5到7年的观察(4,5)。因此,许多患者早期治疗启动往往是阻碍,这凸显了小说迫切需要客观的生物标志物。

在过去的十年中,参与体液免疫系统的组件的axSpA病人已经受到了越来越多的支持,抗体几个微生物、炎症、结构和风湿性抗原目标描述(6)。从我们的研究机构的数据显示,免疫球蛋白G抗体(免疫球蛋白)3小说特大学(呃)-axSpA-IgG抗原更出现在早期axSpA病人(14%)相比,CLBP患者(5%)(7)。除了免疫球蛋白抗体同形像,一个新兴的证据表明IgA axSpA患者的抗体的存在。首先,增加总IgA是在患者报告的水平与健康对照组相比(8,9)。这些抗体可能是分泌炎症粘膜表面,作为一个强大的肠道炎症和axSpA被发现之间的联系(10)。事实上,炎症性肠病(IBD)是在6 - 14%的患者和亚临床肠道炎症甚至被报道在50%的SpA患者(11)。此外,体液免疫反应已经观察到的改变对几种微生物病原体,和增加血清水平的IgA免疫球蛋白抗体克雷伯氏菌肺炎和酿酒cerevisae发现在患者与健康对照组(12- - - - - -14)。观察肠道抗原刺激的可能是诱发事件进一步强调的发现,柳氮磺胺吡啶可以正常化IgA水平和减少肠道免疫系统的激活(15)。最后,一个最好的描述自身抗体生物标志物对axSpA IgA同形像MHC II级组织相容性抗原抗体不变(γ)链,也称为CD74 (16在不同的研究),它已被证实。德温特等人报道了年初55%的敏感性axSpA病人和一个相应的特异性与慢性背部疼痛(63%的人17),这是按照最近报道的敏感性60%,比利时炎性关节炎和脊椎炎队列(成为巨大)(18),而瑞切尔斯等人报道的敏感性47%患者non-radiographic axSpA (19)。此外,IgA CD74抗体被发现与结构损伤骶髂关节和脊柱ENRADAS axSpA患者的队列研究(20.)。另一方面,没有抗体和微观肠道炎症之间的联系成为巨大队列(18)。

本研究的目的是确定小说IgA使用血清学抗体抗原选择(SAS)的过程。在这种方法中,一个互补DNA噬菌体展示库(互补),表达axSpA滑膜抗原和non-physiological肽,在等离子体的早期筛查IgA抗体反应axSpA病人。针对新型UH-axSpA-IgA抗原抗体反应性是决定患者的早期axSpA从2独立军团和控制。此外,我们调查是否存在这些小说UH-axSpA-IgA抗原和抗体之前确定UH-axSpA-IgG抗原可以进一步加强axSpA早期诊断的潜在生物标志物。

材料和方法

病人和控制

血浆或血清收集从ReumaClinic axSpA患者(Genk、比利时)(呃队列;n= 85),在鲁汶大学医院(比利时)[(生物)晶石,Spondyloarthritis(生物制品)队列;n= 164](21,22)。所有axSpA患者呃队列(n= 85)和72例(生物)晶石队列有一个最长时间5年的诊断研究,这些病人被认为是早期axSpA。血浆从非特异性慢性下腰痛患者(CLBP) (n= 66)和健康对照组(HC) (n= 185)收集哦。血浆从RA患者(n在ReumaClinic = 60)收集。

AxSpA患者诊断治疗风湿病学家和分类根据研究分类标准(2)。CLBP诊断根据欧洲指南的管理非特异性慢性下腰痛(23)。RA患者实现1987年美国风湿病学院的标准(24)。

本研究进行了符合赫尔辛基宣言,并经当地杰莎医院伦理委员会批准,呃,Ziekenhuis Oost-Limburg(批准号B243201422699)。患者和健康对照组的生物样本以前收集在不同的研究中,杰莎医院的伦理委员会批准的,呃,鲁汶大学医院(批准号。B322201215165, B243201627373 B32220083429, B32220084074)。提供书面的知情同意,所有患者和健康对照组和所有的人类生物材料用于本研究提供的请大学生物林堡(UBiLim) (25鲁汶大学医院)和生物。

识别新抗体的血清学的抗原的选择

血清抗原选择(SAS)是一个筛选步骤,使用cDNA噬菌体展示抗体识别抗原的目标小说感兴趣的。在这项研究中,一个axSpA cDNA噬菌体展示库之前由滑膜臀部组织三种不同axSpA患者(7),是用来识别小说UH-axSpA-IgA IgA同形像抗体抗原结合的混合等离子体从10 axSpA早期患者早期axSpA SAS(池),使用前面介绍的SAS过程(7)。肽或蛋白质抗原显示表面的噬菌体克隆孤立使用SAS的方法,确定了测序第六M13基因的融合互补dna插入(26)。定制的DNAnalyzer软件(7),一个蟒蛇面向多处理程序使用Biopython (27),允许自动化的核苷酸和氨基酸序列的比较与NCBI的爆炸工具(人类的序列28)。

感兴趣的临床特点的群体

一个流程图总结我们的筛选和验证不同的步骤,以及相应的病人和控制人口所示补充图1。SAS方法使用的抗原axSpA cDNA噬菌体展示文库筛选新型抗体IgA的同形像的混合等离子体早期axSpA病人。这种早期axSpA SAS池由血浆样本10 axSpA患者队列,这在我们之前一样筛查小说axSpA抗体(免疫球蛋白7)。这些病人没有收到生物疗法,平均数±标准差疾病持续时间是1.4±0.5年,平均40.6±11.8岁±SD, 5是男性(50%),8 (80%)HLA-B27积极。的SAS程序,执行counterselection利用HC的混合等离子体,组成10健康控制受试者的年龄——准确性axSpA患者(平均±标准差为40.6±12.3岁,5(50%)是男性)。

为了选择最好的抗原目标,个人UH-axSpA-IgA抗原抗体反应向识别,确定的额外浆池从早期axSpA病人和HC。为此,等离子体从60额外axSpA早期患者的队列汇集成6浆池,每个组成的10 axSpA病人,血浆从30个额外HC汇集成3 HC浆池10 HC。这些60所选患者早期axSpA有平均数±标准差为42.8±11.6岁,平均±SD疾病持续时间3.1±1.4年,37(62%)是男性,31 (51.7%)HLA-B27是积极的。30 HC有一个均值±46.6±18.9岁SD,和15(50%)是男性。

对7 UH-axSpA-IgA抗原抗体反应确定使用SAS当时决定个体血浆样本中70 axSpA患者早期呃队列(55 axSpA患者的血浆池和15附加axSpA病人),和88岁的准确性HC (79 HC的浆池和额外的HC,称为HC组1)。这些70 axSpA早期患者临床特点表1。88 HC,称为HC组1的平均年龄为44.4±11.9年和48(54.4%)是男性。

此后,对3所选UH-axSpA-IgA抗原抗体反应(UH-axSpA-IgA。1,UH-axSpA-IgA。3,UH-axSpA-IgA.10) and 2 previously identified UH-axSpA-IgG antigens (UH-axSpA-IgG.4 and UH-axSpA-IgG.8) (7)是决定个体血浆样本中70 axSpA早期患者的队列,164年axSpA病人从晶石队列(生物),与CLBP 66人,和一个额外的扩展组109 HC组,称为HC组2 (17 HC HC组1和92额外的HC)。axSpA病人的临床特点(生物)晶石所示表1。健康对照组的HC组2 (n= 109)有一个平均数±标准差为43.1±17.7岁,56(48.7%)是男性。CLBP患者(n= 66)有一个平均数±标准差腰痛持续时间为10.3±9.2岁,有一个平均数±标准差为45.3±10.5岁,和28(42.4%)是男性。两个(3.0%)是烟民,55(83.3%)工人,30(45.5%)接受了先前的康复和12(18.2%)使用药物。问卷调查的平均结果(平均±SD)疼痛知觉(数字疼痛评定量表(npr)],下腰痛残疾(修改得以指数(修改)),身体残疾(对个人身体活动规模与身体残疾(PASIPD)]和脊椎疼痛残疾(百万的视觉模拟量表(移动增值))分别为5.5±1.7、9.5±5.4、12.7±9.2、9.2±0.9。对于CLBP患者,缺失值低于10%。axSpA病人,除了BASDAI缺失值低于10% (27.8%),BASFI (29.1%)、ESR (13.9%)、c反应蛋白(11.4%)。

噬菌体ELISA

对UH-axSpA-IgA抗原抗体反应性是衡量噬菌体展示在噬菌体粒子ELISA如前所述的混合的或者个人血浆样本中(7,29日)和一些小的修改。总之,一半面积96,Microlon high-binding微型板块(他一一Bio-One)涂在一夜之间在4°C 4.0μg /毫升anti-M13鼠单克隆抗体(克隆MM05T,嘉汉生物)稀释涂料缓冲区(0.2碳酸钠碳酸氢盐缓冲,pH值9.6)。涂板被封锁与脱脂奶粉5%磷酸缓冲盐pH值为7.4 (MPBS) 2 h在37°C而颤抖。然后,盘子和7×10孵化¹¹集落形成单位/毫升(稀释5% MPBS)噬菌体颗粒抗原表达的兴趣(特定的噬菌体),或噬菌体颗粒抗原(空噬菌体),在37°C和1小时30分钟在RT,绑定噬菌体粒子被孵化池或个人血浆样品稀释1/100 5% MPBS在37°C和1小时30分钟在RT,紧随其后的是1小时的孵化与cross-adsorbed RT,辣根peroxidase-conjugated山羊反IgA-Fc (Bethyl实验室),稀释1:2,500 MPBS 5%。

对UH-axSpA-IgG抗原抗体反应性测量如前所述(7)。

在每个噬菌体ELISA实验样本进行重复测试,和实验独立进行至少两次。汇集血浆样本,对每个phage-displayed抗体反应UH-axSpA抗原表达的差异(δ)的平均光密度(OD)信号使用各自的phage-displayed抗原,和平均OD没有抗原信号使用噬菌体。为个体血浆样本,抗体反应性对phage-displayed UH-axSpA抗原表达的平均光密度之比(OD)信号使用各自的phage-displayed抗原,在OD信号使用噬菌体没有抗原(OD(特定的噬菌体)/ OD(空噬菌体)]。重复的ODs的变异系数,实验重复率低于20%。血清或血浆样品导致OD信号高于0.5使用空的噬菌体,被排除在分析之外。

对于每个UH-axSpA抗原,血清阳性的截止值计算的抗体反应的均值匹配HC人口+ 3 * SD(单排除异常值后使用相同的公式)。对一组抗原抗体反应包括antibody-positivity抗原中的至少一个面板。

统计分析

所有统计分析使用SAS JMP Pro 14.2版本,和p值小于0.05被认为是重要的。

特定UH-axSpA抗原抗体的存在,或抗原的电池板,比较axSpA患者之间通过应用确切概率法和控制。连续抗体阳性之间的临床特点和antibody-negative axSpA患者相比,使用学生的t测试变量的参数分布,Wilcoxon等级测试变量和非参数分布,而分类特征分析确切概率测试。

阳性似然比(LR + =灵敏度/ 100 -特异性)为确诊axSpA基于特定UH-axSpA抗原抗体的存在,或抗原的电池板,计算基于他们在axSpA患者和慢性下腰痛患者,除非另有指示。

结果

小说在早期axSpA病人IgA抗体的识别

人类axSpA包含1.88×10的cDNA噬菌体展示文库⁶重组克隆以前由滑膜臀部组织从3 axSpA患者(7)。使用这种大量IgA抗体反应的抗原筛选池等离子体从10 axSpA早期患者,导致IgA 173年的小说《抗原抗体的识别。一个流程图总结我们的筛选和验证不同的步骤,以及相应的病人和控制人口所示补充图1。

对每种173 phage-displayed抗原抗体反应首次决定在6附加浆池,每个组成的10 axSpA早期患者,并在3额外浆池,由10 HC。173抗原,84不显示axSpA等离子体反应池和被排除在进一步分析。另外89 phage-displayed抗原排名基于axSpA浆池的数量最高的反应加上健康控制的最小反应池(补充表1)。基于这个排名,选择七个候选抗原抗体反应性测量个人血浆样本,注释UH-axSpA-IgA。通过UH-axSpA-IgA 1。10(UH-axSpA-IgA isotype.target number).

的身份UH-axSpA抗原小说IgA的目标axSpA抗体

核苷酸和氨基酸序列的选择7 UH-axSpA抗原被IgA抗体比较人类和微生物序列使用定制DNAnalyzer程序(表2)。UH-axSpA-IgA分析。10showed that its cDNA, consisting of the 3′-coding region of the human histone deacetylase 3 (HDAC3) gene, was fused in the correct reading frame to M13 phage gene VI, which resulted in the expression of the last 22 C-terminal amino acids from the 428 amino acids of the human HDAC3 protein. The 6 other antigens resulted from out-of-frame fusion, or fusion to non-coding sequences (表2)。因此,表达抗原与小说non-physiological肽,9和53个氨基酸长度之间的关系。这些抗原可能包括mimotopes (30.,31日),显示部分同源性几个人类蛋白质。

有趣的是,当微生物的抗原序列序列比较,我们发现抗原UH-axSpA-IgA。1,UH-axSpA-IgA。3,UH-axSpA-IgA。6to UH-axSpA-IgA.10 showed partial homology to proteins from several microbial species, including大肠杆菌、肺炎杆菌、酿酒酵母,鼠疫杆菌(见表2)。

针对小说UH-axSpA-IgA抗原的抗体反应

IgA 7 UH-axSpA-IgA抗原抗体的存在是决定个体早期axSpA患者的血浆样品(n= 70,55 axSpA病人从浆池和15附加axSpA患者)的队列,在匹配HC (n= 88,HC组1)。对个人UH-axSpA-IgA抗原抗体反应出现在2.9%(2/70),8.6%(6/70)的早期axSpA患者和3.4%(3/88),6.8%(6/88)的HC (表3)。最高的抗体反应axSpA早期患者的样本被UH-axSpA-IgA。3(8.6%)和UH-axSpA-IgA。10 (8.6%)。反应性最低的HC是UH-axSpA-IgA看到样品。1 (3.4%),UH-axSpA-IgA。3(3。4%) and UH-axSpA-IgA.10 (3.4%).

接下来,我们研究了特定UH-axSpA-IgA抗原抗体结合能否提高高碳钢的敏感性,同时保持足够的特异性。因此,最高的3抗原LR + axSpA患者相比年初HC被组合成一个小组:UH-axSpA-IgA。1,UH-axSpA-IgA。3,UH-axSpA-IgA.10. Antibody reactivity against at least one of these 3 UH-axSpA-IgA antigens was found in 24.3% (17/70) and in 10.2% (9/88) of HCs (p= 0.0294),相应的特异性为89.8%,LR + 2.4。

此外,临床和疾病特征(补充表2)之间的比较axSpA抗体阳性的患者3 UH-axSpA-IgA抗原的这个小组,这个小组和axSpA病人血清反应阴性的。我们没有发现显著差异在年龄、性别、HLA-B27状态、疾病持续时间、治疗、红细胞沉降率(ESR)、c反应蛋白水平,或关节外表现的存在。此外,没有发现显著差异的疾病活动分数浴强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI) (32函数索引)和浴强直性脊柱炎(BASFI) (33患者早期axSpA之间),或没有针对这个小组3 UH-axSpA-IgA抗原的抗体反应。

抗体反应与UH-axSpA-IgA小组和UH-axSpA-IgG抗原是独立的验证(生物)石膏组,展示了早期axSpA诊断额外的价值

接下来,我们决定是否IgA-isotype抗体反应UH-cohort兑3选择UH-axSpA-IgA抗原,UH-axSpA-IgA。1,UH-axSpA-IgA。3,UH-axSpA-IgA.10 could be validated in a larger independent cohort of axSpA patients. To this end, we screened 164 samples from the (Bio)SPAR cohort. Furthermore, antibody reactivity was determined in additional control groups, including 109 age– and gender-matched HCs (HC cohort 2, including 17 HCs from HC cohort 1) and 66 patients with CLBP. The latter control group is of particular interest as clinical manifestations often overlap between axSpA patients and persons with CLBP in the early disease phase.

首先,我们发现3选择UH-axSpA-IgA抗原抗体的存在被证实axSpA患者(生物)的晶石队列作为对个人观察抗原抗体反应性在4.3%(7/164),6.7%(11/164)的axSpA患者总数的(生物)石膏组(表4)。

接下来,我们调查是否IgA-isotype对UH-axSpA-IgA抗原抗体反应可以改善IgG-isotype反应的诊断性能与之前确定UH-axSpA-IgG抗原(7)。对于这一分析,我们决定对2的3 UH-axSpA-IgG抗原抗体反应,UH-axSpA-IgG。4和UH-axSpA-IgG。8,as antibodies against them showed the highest sensitivity in a previous study in the UH and the (Bio)SPAR cohorts (7)。针对UH-axSpA-IgG抗体反应。4和UH-axSpA-IgG。8was found in 7.1 and 5.7% of axSpA patients from the UH cohort and in 3.7 and 4.9% of the (Bio)SPAR cohort, respectively. We further explored whether a combination of antibodies against particular antigens could be of added value in distinguishing axSpA patients from persons with CLBP. From the 5 UH-axSpA-IgA/IgG antigens, we selected the 4 antigens with the highest LR+ in axSpA patients, compared to persons with CLBP: UH-axSpA-IgA.1,10 and UH-axSpA-IgG.4,8 (表4)。的存在对至少一种4抗原抗体反应性明显高于axSpA患者从呃队列(25.7%,18/70)相比,残疾人CLBP (3%, 2/66) (p= 0.0002),相应的LR + 8.5。此外,对至少一种4抗原抗体反应活性也高于HC(13.8%, 15/109),尽管没有明显(pLR + 1.9 = 0.0502)。对至少一种4抗原抗体反应性也明显高于axSpA患者独立的生物(石膏)验证组(15.9%,26/164)相比,残疾人CLBP (3%, 2/66) (p= 0.0065),相应的LR + 5.2。此外,在RA患者中,我们发现至少有一个抗体4 UH-axSpA-IgA /免疫球蛋白的肽只是出现在RA患者的10.0%(6/60)与25.7%的从UH-cohort axSpA患者(18/70)(p= 0.0244)和15.9%的axSpA病人(生物)SPAR群组(26/164)(p= 0.3881)。数据所示补充表3。

作为生物标志物仍是一个未满足的需要能够预测axSpA发病后早期,我们进一步研究了是否这个小组4 UH-axSpA抗原抗体(UH-axSpA-IgA。1、10和UH-axSpA-IgG.4 8)可以区分早期axSpA附加值的病人从CLBP患者。因此,我们进行了subanalysis患者5年的最长时间诊断研究,包括70名患者来自呃队列和79年早期axSpA病人(生物)石膏组(表5)。在所有早期axSpA病人,对至少一种4抗原抗体反应性明显高于(21.1%,30/142)相比,残疾人CLBP (3%, 2/66) (p= 0.0004),相应的LR + 7.0。最后,临床和疾病特征之间的比较早期axSpA抗体阳性的患者4 UH-axSpA抗原(UH-axSpA-IgA的面板。1、10和UH-axSpA-IgG.4 8)和早期axSpA病人血清反应阴性的这个面板(表6)。我们没有发现显著差异在年龄、性别、病程、治疗,BASDAI得分,BASFI、ESR、CRP水平之间axSpA患者早期,和那些没有抗体反应这个面板4 UH-axSpA-IgA /免疫球蛋白的抗原。HLA-B27阳性患者的比例明显高于血清反应阴性的患者组的小组的4 UH-axSpA-IgA /免疫球蛋白抗原。

讨论

在这项研究中,我们确定了针对7小说UH-axSpA-IgA抗原的抗体。抗体的存在3 7 UH-axSpA-IgA抗原被确认在呃队列和独立(生物)石膏队列。检测抗体的结合这些UH-axSpA-IgA抗原和2前面确定的UH-axSpA-IgG抗原最高的潜在生物标志物强烈增加潜在的诊断价值与CLBP axSpA患者区别于人。

在这里,我们使用SAS筛选技术来识别IgA在早期小说抗原抗体目标axSpA病人。这些抗原来源于人类axSpA cDNA噬菌体展示文库,以前由滑膜臀部组织从3 axSpA患者(7)。这个库因此形成了在体外表示人类的滑液抗原表达在这些组织中,但也含有噬菌体克隆表达non-physiological肽,造成在图片翻译的cDNA编码区,或从通常的翻译翻译的地区。7的识别抗原表达non-physiological肽等,这些可能包括模拟抗原表位在活的有机体内抗原结构(mimotopes)。每个6 UH-axSpA-IgA抗原显示部分同源性在氨基酸水平对人类蛋白质,参与各种生物过程如转录调节支架附件因素B2 (SAFB2),钙运输(阿诺定受体1 (RYR1)),细胞内信号转导SH2B适配器蛋白3 (SH2B3),细胞粘附和血小板脱粒[Multimerin-1 (MMRN1)]和脚手架(Coilin(线圈)]。此外,这部小说IgA抗体所针对的抗原也显示部分同源性等来自微生物的微生物蛋白质k .肺炎,酿酒酵母,大肠杆菌。这是符合先前的研究,报道了IgA的抗体的检测对脂多糖的同形像美国肠炎和美国沙门氏菌感染(34),细菌中提取的k .肺炎(35,36)和细胞壁的组成部分酿酒酵母(12)患者。

目前,尚不清楚针对这6 UH-axSpA-IgA抗原的抗体是否对微生物抗原抗体免疫反应产生的,或可能的自体抗原的自身抗体。此外,它需要确定这些抗体影响蛋白质的目标,和相关的疾病过程。目前,没有一个描述同源蛋白(表2直接涉及axSpA病因),尽管一些链接可以由底层axSpA病理过程。与UH-axSpA-IgA Prothymosin,显示序列同源性。1antigen, has been reported to enhance proliferation of fibroblast-like synoviocytes in a collagen-induced rat model of arthritis and has several immunomodulatory functions (37)。此外,据报道,SH2B3调节细胞因子的生产通过Janus激酶(激酶)——信号传感器和转录激活(STAT)通路(38),这是证明有重要的免疫调节功能在类风湿性关节炎(RA) (39)和axSpA (40)。有趣的是,基因表达分析RA患者外周血单核细胞(PBMC)的差别显示对这些甲基转移酶SETD6相比控制。此外,SETD6表示在一个较低的程度上在RA患者对肿瘤坏死因子抑制剂相比于无,从而暗示作用NF-κB信号(41)。尽管从爆炸的搜索结果可能会给一个建议的身份在活的有机体内anti-UH-axSpA所针对的抗原抗体的确切身份mimotopes是进一步研究的课题。不过,针对这种mimotope抗原的抗体还可以导致有趣的生物标志物与临床相关性疾病的研究。

另一方面,UH-axSpA-IgA。10correctly expresses the final 22 amino acids of the C-terminus of human HDAC3, which has a total size of 428 amino acids. HDAC3 is a member of the class I subfamily of histone deacetylases, a class of enzymes that remove acetyl groups from lysine residues of both histone and non-histone proteins (42)。越来越多证据表明HDAC3风湿性疾病至关重要的作用,是需要HDAC3 I型干扰素信号传感器和催化剂的生产和激活转录1 (STAT1)呈synoviocytes来自RA患者(43)和LPS-induced激活的巨噬细胞(44)。此外,HDAC3 PBMCs被发现影响细胞因子的生产的RA患者(45)。作为病人,PBMCs HDAC3表达增加,抑制HDAC3 TNF-1α的差别与对这些表达式(46),从而表明HDAC3可能是一个潜在的治疗目标的基本病理过程。有趣的是HDAC3似乎也参与骨形成和骨吸收的调节通过STAT1 (47),一个关键过程中特异表达SpA的病人。然而,目前,尚不清楚是否HDAC3可能受到抗体的功能目标HDAC3。

每个7 UH-axSpA-IgA抗原抗体的存在最初确定axSpA UH-cohort病人和高碳钢。抗体反应在早期axSpA病人范围从2.9到8.6%,而抗体反应在HC范围从3.4到6.8%。为了增加这些个人axSpA患者的抗体反应的敏感性,特异性,同时保留,我们结合对3抗原抗体反应性最高的LR + UH-axSpA-IgA。1,UH-axSpA-IgA。3,UH-axSpA-IgA.10 into a panel. Antibody reactivity against one of these 3 UH-axSpA-IgA antigens could be detected in 24% of the early axSpA patients with a corresponding specificity of 90% in HCs. We were not able to detect a significant difference in clinical characteristics between axSpA patients positive for IgA antibodies targeting our panel of 3 UH-axSpA-IgA antigens, and patients lacking these IgA antibodies. Within our study, these IgA antibodies do not seem to allow the identification of a particular subtype of axSpA patients, such as those with IBD. Similarly, in the study of De Winter et al. no clinical correlation between IgA anti-CD74 antibodies and IBD could be detected (17),没有相关性的存在IgA anti-CD74抗体和微观肠道炎症可能是建立在比利时(是)巨大的早期axSpA患者(18)。此外,IgA几个微生物病原体抗体的存在还没有与一个特定的axSpA临床表型。

在先前的研究中,我们表明,免疫球蛋白UH-axSpA-IgG同形像抗体。1,UH-axSpA-IgG。4,UH-axSpA-IgG.8 antigens were significantly more present in early axSpA patients (14%) compared to patients with CLBP (5%). In this study, we investigated whether IgA antibody reactivity against the novel UH-axSpA-IgA antigens could be of added value to this previously identified anti-UH-axSpA-IgG antibody reactivity, in order to distinguish axSpA patients from persons with CLBP. By combining antibody reactivity against the 4 antigens with the highest LR+, we found that antibodies against the novel antigens UH-axSpA-IgA.1, UH-axSpA-IgA.10, and the previously identified UH-axSpA-IgG.4 and UH-axSpA-IgG.8 antigens, were significantly more present in a subset of early axSpA patients (25.7%) of the UH cohort compared to reactivity in persons with CLBP (3.0%). Antibody reactivity against this panel of 4 UH-axSpA antigens was also confirmed in the patients from the independent (Bio)SPAR cohort (15.9%, 26/164).

目前,它仍然是具有挑战性的区分axSpA病人和CLBP患者在疾病早期阶段,随着两组低背部疼痛。我们发现面板4抗原抗体明显更多的出现在早期的一个子集axSpA病人(21.1%,30/142)呃队列和晶石队列(生物),最高5年的诊断时间。比较之间的抗体反应早期axSpA病人和CLBP患者,导致LR + 7.0。这是高于目前使用实验室的LR +标记CRP (LR + 2.5),低于遗传标记HLA-B27 (LR + 9.0) (48)。虽然有些时应采取谨慎解释观察到的LR + 7.0在我们的研究中,作为控制人口的很小CLBP (n= 66)相比,早期axSpA患者(n= 142)。验证抗体反应的更多的残疾人CLBP进一步证实这个LR +是必要的。

此外,抗体反应的联合小组2 UH-axSpA-IgA和2 UH-axSpA-IgG抗原相应的特异性为86.2%的年龄——准确性HC,对应的LR + 1.5。

最后,结合前面UH-axSpA-IgG识别抗原。4和8日UH-axSpA-IgA 2小说UH-axSpA-IgA抗原的识别。1和UH-axSpA-IgA。10results in the identification of a larger subset of axSpA patients, thereby showing some promising diagnostic biomarker potential.

数据可用性声明

数据是可用的。作者提交有关匿名反应和病人数据用于批准的机构和与指定的目的,这项研究的首席研究员,签署了数据访问协议。

道德声明

本研究进行了符合赫尔辛基宣言,并经当地杰莎医院伦理委员会批准,呃,Ziekenhuis Oost-Limburg(批准号B243201422699)。患者和健康对照组的生物样本以前收集在不同的研究中,杰莎医院的伦理委员会批准的,呃,鲁汶大学医院(批准号。B322201215165, B243201627373 B32220083429, B32220084074)。提供书面的知情同意,所有患者和健康对照组和所有的人类生物材料用于本研究提供的请大学生物林堡(UBiLim) (25鲁汶大学医院)和生物。

作者的贡献

光伏、DQ和VS:研究概念和设计。公关、光伏、DQ、PG、合资企业、AA,阵线,KV,和VS:采集的数据。公关、光伏、DQ、EL KV,和VS:数据的分析和解释。所有作者的文章和批准提交的版本。

资金

本研究支持的资助机构的创新科技。

确认

我们感谢大学生物林堡和鲁汶大学医院提供的生物组织样本,血浆/血清样本,和轴向温泉患者的临床特征和控制;Igna Rutten和Josianne作曲者(UHasselt生物医学研究所、免疫学和感染)的优秀的技术支持。

的利益冲突

VS, PV、KV和DQ有专利申请等待在这个报告中描述的标记。

其余作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。

出版商的注意

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。

补充材料

本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/fmed.2022.1072453/full补充材料

引用