疟疾传播和向量对杀虫剂的抗药性变化的环境:在Yaounde-City Simbock,喀麦隆

介绍

非洲城市经历了人口迅速扩张由于各种因素其中农村向城市迁移,提高寿命,高出生率和发展项目(1)。为了适应快速增长的人口,城市周围的农村转向城市社区。这些新社区的特点是不受控制的栖息地的建筑和绿化活动,导致重要的环境变化。

一般来说,环境修改发生自然或人类活动,扰乱生态平衡从而创造出新的生物栖息地(2)。这些剧变向量生物学有很深的影响,可能会出现一些主管物种损害别人的利益,因此病媒传播疾病的影响传输概要(3)。先前的研究已经显示深病媒传播疾病的流行病学变化(VBDs)如登革热、盘尾丝虫病,尤其是疟疾(4)。疟疾在非洲是一个重大的公共卫生问题。从2019年到2020年,疟疾病例的发病率从2.13亿增加到2.28亿,突显出需要加强预防和控制措施(5)。喀麦隆是十一个国家之一世界上主要影响(5),大约十八按物种参与的传播疟原虫寄生虫。主要病媒物种一个。冈比亚按蚊,一个。coluzzii,一个。arabiensis,一个。funestus,一个。nili,一个。moucheti以其高anthropophilic行为(6- - - - - -9)。包括其他物种视为次要的向量一个。carnevalei,一个。coustani,一个。hancocki,一个。leesoni,一个。marshallii,一个。米拉斯,一个。paludis,一个。pharoensis,一个。ovengensis,一个。wellcomei,一个。rufipes,一个。ziemanni (10- - - - - -15)。这些向量的一些展览能够适应不断变化的环境条件(16- - - - - -18),即使他们每个人展示了生态的偏好。例如,一个。coluzzii未受污染的水域有强烈的偏好(19)被发现育种在高度污染的水源,在城市化在几个非洲国家(20.- - - - - -22),此外,Mbakop et al。(23)的出现一个。paludis,负责大部分Nyabessan疟疾传播,喀麦隆在水力发电大坝的建设。

疟疾通常被认为是一种疾病的农村地区,但许多因素与快速和不受控制的城市化正在增加在城市在非洲疟疾传播(24,25)。疟疾传播到城市的扩张是特别关注的疟疾控制项目,因为人口在这些领域可能的发展严重的疟疾的风险由于缺乏保护性免疫和耐药的传播疟原虫菌株。

在雅温得,疟疾传播被认为是holo-endemic和季节性,一个。冈比亚按蚊作为主要的向量(22,26)。平均每年的患病率恶性疟原虫在普通人群中估计从市中心的34%提高到50%在外围(27)。预防疟疾本质上是基于矢量控制。化学病媒控制在雅温得城市与滴滴涕室内喷洒运动开始于1950年代;然后,在1990年与溴氰菊酯浸渍蚊帐的分布,在一些家庭(28)。后来,其他三个大规模分布目标的运动进行了2004年,2011年和2015年(29日,30.)。此外,为了弥补culicidian讨厌不受控制的城市化引起的增加(31日),雅温得的人群也报告使用螺旋,气溶胶炸弹,及蚊香软膏(32)。这些干预措施后,蚊帐所有权在雅温得估计为73.8% (33),随后减少疟疾发病率。然而,自2017年以来,国家正在复苏的疟疾病例和死亡的崛起,2021年分别为6612000人和14448人(34),因此需要一个“高负担的影响”的方法。在这种方法中,阿森纳疟疾预防包括ITN的推广使用,间歇性预防治疗孕妇和儿童疟疾化学预防季节性3-59岁个月在潮湿的热带地区。

事实上,在过去的二十年里,喀麦隆一直面对无政府主义的城市化,城市的扩展他们的郊区。这个扩展导致人口爆炸夫妇有碍健康和营养需求增加。这种情况导致永久性停滞的废水和作物种植在城市土地(35,36)。雅温得的Simbock社区在城市里是这种现象的一个完美的范例。之前的研究进行了1999年和2009年之间显示深疟疾的流行病学变化后出现的高度anthropophilic向量等一个。冈比亚按蚊s.l.和一个。funestus(37- - - - - -41)。最近的疟疾Simbock昆虫学研究从2000年到2001年(41),而生境和生态环境的深深改变了。此外,新兴向量物种对杀虫剂的敏感性没有评估。因此,更好地了解疟疾昆虫学概要等面积的改性可以改善一些新的矢量控制干预措施的实施。

目前的研究旨在评估疟疾传播的昆虫学参数和疟疾在Simbock向量对杀虫剂的敏感性,前雅温得的农村变成了一个社区,喀麦隆的首都。

材料和方法

研究设计

本研究包括疟疾传播的回顾性和前瞻性调查指标和四个年度的横断面调查。从2014年到2017年gambiae s.l.对杀虫剂的敏感性。回顾数据(2000 - 2006)被存储在一个蚊子对以前的昆虫的调查数据库在疟疾研究实验室组织协调pour la lutte靠les地方病en Afrique舟状骨单体/ OCEAC),而潜在的数据(2014 - 2016)是通过收集调查根据同一数据收集方案的回顾数据。

研究区域

这项研究是进行Simbock(3°50镑,11°30所,750米)的分区总部位于约10公里雅温得,喀麦隆的首都(图1一个)。这个地区的气候是赤道的类型,其特征是两个旱季(型号和7 - 8月)和两个雨季(3月到6月和9)。平均温度是23°C和年平均降雨1727毫米(42)。Simbock由Mefou河浇灌,展示在了沼泽构成永久的蚊子繁殖地。此外,有一些人工鱼塘。

在2000年代之前,本地的农村景观建设用地(包括家庭)< 40%。房子都被森林包围,用泥土建造的,用稻草屋顶,没有上限。主要通过村是坑坑洼洼的跟踪(图1 b)。当时,意思是昆虫学接种感染每个人每晚叮咬率为0.69 (ib / m / n)和plasmodial物种恶性疟原虫和p .那(41)。为了方便交通之间的经济资本和政治首都雅温得杜阿拉,公路建设项目通过Simbock始于2008年。在这个项目中,本地已经从2002年的300居民经历拥挤(39)2021年的大约10000居民(43)乘法和无政府主义的住房条件通常比回顾性的时期(图1 c)。大多数房屋的建筑材料是混凝土地板和墙壁,天花板下的屋顶和窗户的筛选。社会经济发展伴随着穷人排水,负责建立永久的繁殖地点特征属的蚊子的繁殖库蚊。蔬菜作物,通常负责按繁殖地的创建,不练习;但有池塘,已经存在和正在eutrophisation因为它们凋敝。繁殖地的按蚊是暂时的,很多在雨季。大部分的居民在城市中心或在商店沿着主要的轴。

研究时间

本研究包括疟疾传播的回顾性和前瞻性调查指标和四个年度的横断面调查一个。冈比亚按蚊从2014年到2017年s.l.对杀虫剂的敏感性。周期性的细节总结了成人和幼虫集合表1。回顾数据来自疟疾造成昆虫学数据库进行的一项研究“le Paludisme Laboratoire de矫揉造作的苏尔”(含)组织de协调pour la lutte靠les地方病en Afrique舟状骨(OCEAC) 2000年1月至2006年11月。未来的疟疾传播的数据收集在2014年和2016年之间。

蚊子收集和形态学鉴定

收集成年蚊子通过人类着陆捕获(HLC)在回顾(2000 - 2006)和未来的时期(2014 - 2016)。蚊子集合进行描述(14)。在2000 - 2006年,蚊子集合进行在两到四个家庭(收集点)随机选择,连续两个晚上/调查期间,总共包括14个调查(7 2000年调查,4 2001年,2004年和1 2006年)2 (表1)。收集2014 - 2016年,蚊子在3家庭选择其中的回顾,也连续两夜每段调查,包括3调查每年调查(1)。调查的横断面是否在回顾或未来的时期,但覆盖2旱季和雨季。蚊子集合进行每晚12 34名志愿者在回顾期内和12至18志愿者在未来的时期,在两队工作,一线队捕获成年蚊子从19:00至01:00,第二小组收集到凌晨01:00。在每一个选择,一个志愿者在室内拍摄而另一个户外活动。为了避免偏见,在室内和室外之间的志愿者旋转每两小时。蚊子放入单独的收集袋,标签显示家庭,收集的位置和时间;主管收集袋在每个小时的捕获。集合后,蚊子被形态识别使用标准的识别键(44,45埃普多夫管)和单独存储在标签1.5毫升含有硅胶干燥剂进行进一步分析。

抗药性评估,按幼虫和蛹样本收集的水体,包括水坑传播在整个季度,水槽和水池的水满Mefou河。样本集中和转移OCEAC疟疾研究饲养的昆虫饲养。蚊子在实验室饲养的最佳温度(28 - 30°C)和相对湿度(70 - 80%)。

实验室分析和测试

每个收集成年蚊子被切割成两部分,head-thorax地区和尸体。

恶性疟原虫检测

按头部和胸腔被用于检测恶性疟原虫环子孢子蛋白(CSP)使用ELISA CSP技术(46,47)。

分子识别的物种

尸体(腿/翅膀/腹部)被用于DNA提取所述由柯林斯et al。(48)。PCR进行DNA模板使用。gambiae s.l.物种诊断总反应混合25μl引物,根据协议Santolamazza et al。(49)。PCR产品可视化在1.5%琼脂糖凝胶来确定兄弟的物种。

杀虫剂的敏感性测试

成年女性造成蚊子幼虫集合和形态学鉴定为年龄在2 - 5天一个。冈比亚按蚊年代。l (44,45)。和用于敏感性测试。其他敏感性测试进行的雌蚊基苏姆参考应变敏感一个。冈比亚按蚊饲养在OCEAC 20多年以来医学昆虫学实验室。

敏测试是根据世界卫生组织的标准协议的成年蚊子在过滤文件(使用杀虫剂的用量50)。杀虫剂浸渍滤纸表(绘画纸N°1, 12厘米x15厘米)从世卫组织参考购买中心矢量控制研究单位,马来西亚理科大学。这些论文与歧视浸渍杀虫剂的用量:0.05%溴氰菊酯、氯菊酯0.75%,4%恶虫威DDT和0.1%。原液的制备PBO增效剂和浸渍滤纸(12厘米×15 cm)是由我们的研究单位,在单体/ OCEAC。

两种类型的易感性进行测试;测试与增效剂(PBO)和测试没有增效剂。测试与增效剂进行了评估可能意味着monoxygenase-based代谢抗性(P450);为此,蚊子接触1 h - 4%胡椒基丁醚(PBO)增效剂,之前接触杀虫剂。所有的测试环境下进行室温(25±3°C)和相对湿度(70±10%)。为每个测试,四个批次的20 - 25蚊子被暴露于杀虫剂浸渍纸;和两批20 - 25蚊子作为控制暴露在与硅油纸浸渍,即。,没有杀虫剂。在暴露于杀虫剂,蚊子可拆卸的记录的数量每隔5分钟。1 h曝光后,蚊子被转移到控股管然后美联储10%的糖溶液。死亡率的测定24小时后曝光。

死亡,幸存者和控制蚊子被单独关在埃普多夫与硅胶管,储存在−20°C分子分析。

电阻状态评估根据世界卫生组织的标准(50),分类死亡率小于90%,表明阻力和那些超过98%的易感性的说明。死亡率在90 - 98%之间显示阻力需要验证的可能性。

Kdr L995F / S基因分型

kdr的两个等位基因995位点基因分型根据幸存的蚊子接触杀虫剂和确定物种被Santolamazza et al。(49)。他们的总DNA进行了分析检测kdr L995F / S使用热寡核苷酸突变结扎试验(你好)所描述的林德et al。51)。提取DNA用于kdr状态使用PCR方法表征(52),那么,基因型是由热结扎反应检测器和记者寡核苷酸。的kdr L995F / S基因型测定使用比色测试微型板块之前处理链霉亲和素(51)。

统计分析

人咬率、感染率(IR)和昆虫学接种利率(EIR)回顾性和前瞻性的数据计算。每个物种的比例之前和之后,城市化进程比较使用theChi方检验比例平等。平均哈佛商业评论,红外,EIR在95%置信区间比较用方差分析测试。这些分析是在R 3.5.0软件(R开发核心团队,维也纳,奥地利,2018)。

击倒时间50%和95%的蚊子(kdt进行测试₅₀和kdt_95年)估计使用日志时间probit模型(53),执行赢得DL(版本2.0,1999)软件。的kdt₅₀记录从field-collected蚊子比较与基苏姆参考易感株一个。冈比亚按蚊的估计kdt₅₀比率(kdt₅₀R)。kdt₅₀比> 2褶皱与基苏姆参考易感蚊子应变表示压倒一切的时代的一个显著增加(54)。击倒次PBO的回归估计被托马斯et al。(55)使用公式降级降价的时间= (1 - (kdt₅₀PBO +杀虫剂/ kdt₅₀杀虫剂))x 100。

死亡率在控制(即子样本。,exposed to silicon oil impregnated papers) was 0-3%, therefore, Abbot’s correction was not necessary during data analysis. The mortality rates of mosquitoes tested with insecticides alone were compared to that of specimens pre-exposed to PBO by means of a Chi square Mantel Haenszel test.Allelic and genotypic frequencies at the kdr 995 locus were calculated using Genepop online Version 4.5.1 (56)。

伦理批准和同意参与

下的研究伦理没有间隙。2016/01/685 / CE / CNERSH / SP交付的喀麦隆国家伦理(CNE)委员会研究人类健康。所有的志愿者参与人类着陆捕获签署书面知情同意形式表示他们愿意参加这项研究。他们也收到免费的疟疾预防。

结果

成分和丰富的按动物群

总共有5341名成年雌性按蚊在Simbock捕获两个研究阶段,包括5240年由316名志愿者在回顾期间(2000 - 2006)(12 - 34.5 person-night /月),和101年由42个志愿者在未来期间(2014 - 2016)(12 - 18 person-night /月)。按物种的分布在这两个研究周期所示表2。

回顾期间,9个蚊子/复杂的物种形态识别中收集到的按样品,即一个。冈比亚按蚊s.l。一个。moucheti,一个。funestus,一个。nili,一个。paludis,一个。ziemanni,一个。coustani,一个。namibiensis和一个。hancocki。然而,在未来的时期,只有三个按物种/复杂的物种鉴定;这些包括,一个。冈比亚按蚊s.l。一个。funestus和一个。paludis。

2000年和2006年之间(回顾期),一个。moucheti是主要的物种(49%),其次是吗一个。funestus(24.6%),一个。nili(13.5%)和一个。冈比亚按蚊s.l。(12%);剩下的六个物种代表不到3%。相比之下,从2014年到2016年(准周期),一个。moucheti和一个。nili没有发现收集蚊子样本;一个。funestus仍然是第二个最丰富的物种,与增加的比例从2000年的24.6 - 2006 31.6 2014 - 2016年(p = 0.12)。的比例一个。冈比亚按蚊s.l.而从2000 - 2006年的12%增加到2014年的67% - 2016期(p < 0.0001),设置这个物种复杂Simbock主要疟疾病媒。

分子识别进行705蚊形态识别为属于一个。冈比亚按蚊s.l.复杂的显示两个兄弟物种的存在,一个。冈比亚按蚊和一个。coluzzii。一般来说,的比例一个。coluzzii高(> 85%)比一个。冈比亚按蚊(< 15%)和无显著差异分布的观察这两个物种之间的两个研究周期(p > 0.05)。

恶性疟原虫感染和昆虫的接种

总的来说,3619年由ELISA CSP雌性按蚊进行了分析恶性疟原虫感染检测,其中包括3518名在2000 - 2006年和101年收集的2014 - 2016年。上的数据恶性疟原虫感染和昆虫学接种利率按物种的研究时间所示表3。平均感染率从2000 - 2006年的2.1%下降到2014年的1%,2016年,尽管并没有显著的差异(P = 0.4)。同样,昆虫学接种率从0.34磅/ m / n下降到0.02磅/ m / n (P < 0.0001),两者之间的研究。在2000年和2006年之间,负责四个物种恶性疟原虫传播,其中包括一个。moucheti(EIR IR = 1.5 = 0.12磅/ m / n),一个。funestus(EIR IR = 2.9 = 0.11磅/ m / n),一个。冈比亚按蚊s.l。(IR = 3.9, EIR = 0.07磅/ m / n)一个。nili(EIR IR = 1.8 = 0.03磅/ m / n)。这些物种参与plasmodial传输分别在室内和室外,常驻企业家们从0.01π/ h / n 0.1π/ h / n。在2014年和2016年之间,没有记录在感染性咬一个。funestus在户外,以及一个。冈比亚按蚊s.l.收集在室内。只有一个。冈比亚按蚊s.l.收集户外被发现感染了恶性疟原虫(IR = 1.5%, EIR = 0.02磅/ m / n)。没有户外常驻企业家们的显著差异一个。冈比亚按蚊s.l.两者之间的研究时期(p = 0.6)。

磁化率的一个。冈比亚按蚊s.l.对杀虫剂

共有21个敏测试进行了2014年至2017年,包括6个测试参考感性品系的蚊子基苏姆与野生蚊子和15个测试样本。其中,16个测试用杀虫剂进行了只和五个测试与杀虫增效剂组合,蚊子被暴露于4% PBO增效剂之前拟除虫菊酯杀虫剂敏感性测试。

击倒和死亡率冈比亚疟蚊s.l。

基苏姆的一个。冈比亚按蚊参考菌株被发现完全容易溴氰菊酯、氯菊酯,DDT和恶虫威,死亡率为100%。的kdt₅₀不到10分钟溴氰菊酯和氯菊酯有或没有PBO DDT和19.1分钟。蚊子(kdt击倒时间95%_95年从14岁到31分钟)不同(表4)。

(kdt击倒时间50%₅₀)和95% (kdt_95年用杀虫剂)蚊子测试单独或结合PBO给出表5,死亡率图2。

野生一个。冈比亚按蚊经常表现出对拟除虫菊酯的抗性和DDT s.l.样本。在2014年至2017年之间,kdt有显著增加₅₀溴氰菊酯从37分钟58分钟,kdt的高潮₅₀比率比基苏姆参考应变从2014年的3.9到2017年的6.1。的kdt₅₀氯菊酯和DDT总是高于60分钟(表5)。

死亡率是50 - 90%溴氰菊酯、氯菊酯和不到40%不到10% DDT,一些变化从一年到另一个。然而,这个测试蚊子样本完全对恶虫威,在每个测试的死亡率为100%。

PBO的影响一个。冈比亚按蚊s.l。击倒时间和死亡率

接触前的野生蚊子PBO导致降级击倒乘以35%溴氰菊酯。然而,kdt记录₅₀与氯菊酯仍大于60分钟。

死亡率由于溴氰菊酯结合PBO增效剂从2015年的90%增加到2016年的100%,而死亡率记录氯菊酯仍然低于30%。测试与溴氰菊酯和氯菊酯结合PBO并不表现在2017年由于低的样本大小。

Kdr L995F / S基因型和等位基因频率

共有80个蚊子中随机选择那些幸存下来接触拟除虫菊酯、kdr 995 f / S的基因突变。这些蚊子组成的样本一个。coluzzii(N = 72;90%),一个。冈比亚按蚊(N = 8;10%)。这两个kdr L995F万等位基因被发现一个。coluzzii,而只有L995F等位基因被观察到一个。冈比亚按蚊(表6)。此外,有较高的遗传多样性,代表在所有可能的基因型一个。冈比亚按蚊和一个。coluzzii。

在一个。冈比亚按蚊记录子样品,kdr L995F等位基因频率在70%。L995F / L995F纯合体的主要基因型耐药(50%),其次是L995L / L995F异质结合体(37.5%)和L995L / L995L敏感(12.5%)。

在一个。coluzzii子样品,除了kdr L995F等位基因频率,发现60%的kdr万等位基因也发现,尽管在杂合子与L995F状态只有一个蚊子标本等位基因频率(1%)。的杂合子L995L / L995F是最代表基因型(46%),其次是纯合子耐L995F / L995F(39%)和纯合子易感L995L / L995L (14%)。

的kdr L995F等位基因频率在这两方面都是相似的一个。冈比亚按蚊和一个。coluzzii幸存的次级样本(p = 0.5)。

讨论

这项工作的主要目的是评估疟疾传播和向量对杀虫剂的敏感性Simbock附近,最近城市化带来的环境变化。之前的研究在1999年到2009年之间在本地进行了六个按物种的存在,即一个。moucheti,。funestus, An.gambiaes.l。一个。,一个。namibiensis和一个。obscurus;与疟原虫主要由寄生虫传播一个。moucheti,。funestus(0.28 - -0.22磅/ m / n EIR),紧随其后一个。冈比亚按蚊s.l.和一个。nili(0.13 - -0.06磅/ m / n EIR) (38,39,41)。数据从目前的研究显示,经过十年的城市化进程加快Simbock,按蚊的物种分布发生了变化。此外,一个。冈比亚按蚊拟除虫菊酯杀虫剂耐药性是首次报道在这一领域。事实上,我们观察到的数量减少按物种从九个物种记录2000年和2006年之间三个物种在2014年和2016年之间。此外,我们已经强调了持久性的疟原虫sp。传播Simbock(0.02磅/ m / n)一个。冈比亚按蚊s.l。which is now responsible for urban malaria in Simbock, as previously reported by Antonio et al. (39)。

本研究的一个限制是,昆虫的数量调查回顾性时期(14调查在一年中的四个季节)是比在未来期间进行3季节期间调查(3)。此外,在未来的时期,没有调查在旱季。少量的实地调查、采样站点的季节性变化和偏见可能影响本研究的结果。已经表明,疟疾传播有一个显著的协会和气象变量如温度、降水和湿度在生命周期中发挥重要作用的疟疾病媒和相关动力学(57)。更具体地说,最近的一项研究在2021年喀麦隆进行显示按密度和高疟原虫sp.寄生虫传播在雨季短雨季较长(58)。因此,蚊子集合了两个雨季期间以及漫长的旱季可以突出蚊子多样性的变化在Simbock与城市化进程相关联。的确,按动物的物种组成和传染性获得这个未来的时期是在协议与先前发现的其他社区雅温得城市(22,58)。当前研究的未来期间,疟疾传播的形象在Simbock成为城市的疟疾等anthropophilic向量的密度增加一个。冈比亚按蚊和一个。funestus和高喂养可能由于增加人类宿主人口爆炸后的可用性。

尽管EIR使用的小样本大小的估计,的存在一个。冈比亚按蚊主要的疟疾病媒在城市环境中,是当地的强烈暗示疟原虫sp。传播(59)。此外,蚊子传播有限得多在城市地区由于住房密度越高(60),导致城市疟疾传播高焦(61年)。植被的破坏由于开荒Mefou河沿岸,穿过Simbock和森林砍伐等可能导致依赖森林物种的消失一个。moucheti,一个。nili,一个。namibiensis和一个。hancocki这与建立植被在窝。目前的优势一个。冈比亚按蚊在Simbock社区是同意Ndoumbe et al。(62年),他强调了角色的物种一个。冈比亚按蚊复杂的疟疾传播的大多数城市设置在喀麦隆。的出现一个。冈比亚按蚊在Simbock可以解释这个物种的迁移从中央周边社区,吸引了强劲的人口压力。此外,一个。冈比亚按蚊是展示一个令人担忧的趋势,适应城市环境(污染水域19)。近年来,这一物种被发现育种在高度污染的水源,在科特迪瓦(21)和喀麦隆(22)。除了一个。冈比亚按蚊s.l。一个。funestus也作为一个新兴的物种出现在新anthropized Simbock环境、同意安东尼奥et al。(40)和Munga et al。(63年),尽管这两个物种的低丰度在未来时期相比,回顾。已经出现在池塘Simbock回顾期间,成为未来期间管理不善,可能会成为永久性或半永久性的繁殖地一个。funestus。在未来期间按物种的丰度较低,一部分是因为许多因素如住宅建设用混凝土地板和墙壁,天花板下的屋顶和玻璃窗在未来的期间,经杀虫剂处理净(ITN)使用,和其他因素等影响human-vector接触环境卫生(64年)。通过更好的教育,而且,更高的社会经济地位更高的接触电视和电台预防活动,并增加负担能力的预防方法,有助于提高警惕的人群对疟疾病媒(29日,30.,65年)。因此,矢量控制干预措施的强化可以部分解释了在未来的时期Simbock按低丰度。的确,国家疟疾控制规划进行了两次大规模分布的蚊帐在2011年和2015年,增加了净所有权从65年6%到76年,6% (66年,67年)。此外,Bamou et al。(68年)表明,在蚊子的生态学和疟疾传播模式的变化符合净使用和治疗的影响缺乏蚊帐使用疟疾感染的风险增加2.2倍。

兄弟姐妹的物种的分布一个。冈比亚按蚊s.l.复杂的两个研究时期之间保持不变,一个。coluzzii是最代表的物种。的优势一个。coluzziiSimbock可能是由于存在永久繁殖地前后城市化;这是与以往的研究一致(69年,70年)。它应该召回一个。coluzzii是一种殖民城市环境(22,26,69年);此外,这个物种很可能携带杀虫剂耐药性基因,尤其是kdr L995F基因(34)。此外,这个主要疟疾病媒通常在室内和室外展品咬行为相似,感染疟疾的风险凸显了住宅内外。这些数据强调需要互补的矢量控制干预户外的蚊帐来控制疟疾传播。基于这一事实一个。coluzzii发展在永恒的窝,均值操作下实验在雅温得城市(71年)可以被视为一个潜在的疟疾病媒控制干预Simbock互补。

杀虫剂的敏感性测试一个。冈比亚按蚊s.l.在2014年和2017年之间进行显示一个。冈比亚按蚊s.l.从Simbock DDT和拟除虫菊酯杀虫剂耐药性,同时保持容易恶虫威。拟除虫菊酯抗性的频率记录在Simbock类似最近报道在雅温得的其他社区,即。、Nkolondom Ekie和Nkolbisson,全年市场园艺实践与不受控制的使用杀虫剂(72年)。Simbock在特定情况下,theobserved阻力概要文件迁移可以解释的一个。冈比亚按蚊物种携带抗性等位基因,从中央社区外围市场园艺是练习的地方。类似的观察已经在其他非洲国家(73年,74年)。探索目标站点的作用观察拟除虫菊酯抗性突变,我们进行了一次初步筛选kdr 995 f / L等位基因的蚊子接触杀虫剂而幸存下来。事实上,唐纳利et al。75年),宣称kdr L995F / F抗纯合子基因型与DDT和pyrethroid-resistance表型。同时,很强的相关性之间的高频率的kdr L995F等位基因和拟除虫菊酯和DDT阻力是在一些研究报告(76年- - - - - -78年)。因为抗杀虫剂的第一份报告冈比亚按蚊s.l.人口在喀麦隆(79年,80年),拟除虫菊酯的水平和DDT阻力增加,与L995F的频率kdr等位基因(34,81年,82年)。报道的kdr L995F等位基因频率在这项研究中为70%一个。冈比亚按蚊和62%一个。coluzzii。这些高等位基因频率的kdr L995F与高频率的有关该耐药和杂合的基因型一个。冈比亚按蚊和一个。coluzzii。这些结果与拟除虫菊酯抗性种群的报道一致一个。冈比亚按蚊喀麦隆s.l.从其他城市(54- - - - - -56)和在西非(18,52,54,83年,84年)。耐药万等位基因被发现一个。coluzzii从Simbock,虽然在很低的频率(1%)。这种等位基因在喀麦隆的稀缺已经在先前的研究报告(80年,81年)。Santolamazza et al。(49)指出,万突变更受限制的地理分布在东非与L995F突变是普遍的在非洲西部和中部。同样,Nwane et al。(82年)表明,从东到西万等位基因分散和L995F等位基因在相反的方向。尽管在低频率,发现kdr万突变已经安装并继续传遍喀麦隆(85年)。因此,为了评估的实际频率kdr L995F / S等位基因的自然种群一个。冈比亚按蚊和一个。coluzzii从Simbock,进一步的研究与随机选择的代表性样本大小的蚊子不暴露于杀虫剂是必要的。

在另一方面,敏感的存在纯合子L995L / L995L基因型拟除虫菊酯抗性的蚊子建议替代耐药机制的参与,或尚未发现的一些代数余子式(86年)。因此,我们发现增加的死亡率和35%击倒乘以降级pre-exposed蚊子PBO增效剂,暗示p450的解毒酶的参与测试一个。冈比亚按蚊s.l.抗溴氰菊酯。这些结果与以前的研究一致在喀麦隆的赤道地区进行(32,80年,82年,87年)。缺乏抑制PBO对二氯苯醚菊酯抗性的影响表明少参与p450的抵抗这种杀虫剂。这种阻力可以本质上与“kdr”类型突变。

考虑到只有幸存者蚊子kdr基因的突变,很少与PBO进行敏感性测试,全面研究kdr和代谢抗性机制的进化需要评估的强度和演化一个。冈比亚按蚊s.l. Simbock对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性。然而,测试蚊子样品仍然容易受到恶虫威;因此,国税局杀虫剂可能会主张补卫在这一领域,除了生物杀幼虫剂。

结论

这项研究突出了城市的出现在Simbock疟疾传播,并描述了第一次的形象在当地多个拟除虫菊酯抗性机制一个。冈比亚按蚊s.l.人群。因此有必要建立阻力管理策略基于另一个矢量控制干预,例如,PBO的蚊帐,杀、住房与恶虫威国税局。

数据可用性声明

最初的贡献提出了研究中都包含在这篇文章/补充材料。进一步询问可以针对相应的作者。

作者的贡献

概念化,我和LM。数据管理、LM、JT和PA-A。调查和方法论、LM、SM,我们和特里。软件,男朋友。数据分析,LM,男朋友。项目管理,PA-A。资源,PA-A。监督、房颤和我。验证、PA-A、房颤和我。原创作品草稿,LM。 Writing—review and editing, LM, WE, SM, MP, LA, HO, PA-A, PN, AF and JE. Supervision, JE. All authors contributed to the article and approved the submitted version.

资金

这项研究是由欧盟委员会(European Commission)的框架INFRAVEC项目,编号为228421。

的利益冲突

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