转录组和代谢组学分析揭示桑叶的抗氧化和免疫促进作用日益羊肉的羊

介绍

目前,许多药用植物被广泛用作功能性食品和替代疗法来预防和治疗慢性疾病(1)。这是由于大量的生物活性成分的抗氧化功能,如酚类化合物和黄酮类化合物(2),这可能有助于提高免疫力协调身体的新陈代谢。桑叶(MLs)用作丝绸蠕虫养活几百年来也作为传统中药,根据古典医学书。由于他们的氧化,抗炎,抗菌,anti-hyperlipidemic属性,桑叶是获得越来越多的关注在中国草药3)。迄今为止,提取物的降糖和降脂效果或活性成分在美国已经很成熟,对糖尿病、脂肪肝,和一些类似的疾病与葡萄糖和脂质代谢紊乱有关。此外,越来越多的证据证实了促进生长和瘤胃发育、抗氧化性能,提高牛奶产量由美国或其活性成分在牲畜(3- - - - - -6)。然而,美国职业足球大联盟的潜在机制,作为一种非常规饲料的营养和药用价值,在抗氧化和免疫牲畜仍知之甚少。近年来,爆炸发生在收购生物数据通过使用所谓的“组学”技术。在许多不同的组学技术现在出现在文献中,最常用的组学是基因组学、转录组、蛋白质组学和代谢组学(raybet雷竞技下载地址7)。因此,本研究的目的是评估美国职业足球大联盟的角色在羊羊的生长促进和改善动物福利方面的抗氧化和免疫特性,探索转录组和代谢组学的方法的机制。我们的研究提供了新的见解的角色MLs在牲畜产量和自然功能饲料的应用。

材料和方法

实验项目依照中国动物福利指南和实验协议,和动物保健和使用委员会批准研究所的西北大学& F。

准备和发酵桑叶的化学指标测量和干桑叶

MLs(707种)2021年7月收获Zhouzhi养蚕和丝绸研究所,中国陕西省。一半七天晒干,然后在编织袋子密封有点摩擦,然后存储在一个干燥、黑暗的地方获取摘要用于饲养试验。另一半有65.03%含水率枯萎后阳光半天,有点撞和真空密封在fermentation-special袋发酵与5%乳杆菌在室温下接种(27.5 -28°C)三十天干燥,黑暗的地方准备完了。这里5%是添加5毫升细菌培养悬挂100克MLs和细菌培养悬浮体的浓度是1×10⁸CFU /毫升。乳杆菌(23941年中金)从中国购买工业文化中心集合(www.china-cicc.org)。在喂养实验,pH值之前,粗蛋白,粗纤维以及总能量——和摘要决心根据采用AOAC公认的标准方法。及其内容所示表1。果被认为是合格的检查没有发现黄曲霉毒素B1至少值0.1μg /公斤的华燕测试集团有限公司,有限公司在西安城市,陕西省(检测数量:SP202115450)。

实验设计和喂养饮食

动物实验是进行六个月大的健康女性羊羊(受宠的萨福克羊♂×胡羊♀)平均重30.41公斤,没有基因改造甘肃Qinghuan肉羊种子生产有限公司(甘肃庆阳欢县,中国)。动物被随机分配到组Con喂养正常控制饮食(n = 18),集团TR1喂养实验饮食——(n = 18)和组TR2喂养实验饮食与摘要(n = 18)然后五十天的治疗实验。每组6复制了3只羊/复制。动物饲养试验之前,经过六天的驯化期间获得一个合适的采食量,期间,他们被允许无限制地相应实验饮食和自来水。实验羊被安置在羊圈和自助每天在三组喂养。三个实验的成分和化学成分的饮食所示表2。三个实验的化学成分的饮食是由Ulanqab Yima农业和畜牧业科技有限公司有限公司(内蒙古Ulanqab城市,中国)。

重量和样品收集

实验前,所有的羊都驱动由一个自动称重系统重获得最初的身体重量。在25日和50天之后,身体重量加权计算每日的收益。50天,颈静脉的血液被收集并放置在5毫升真空负压管与黄色帽含有凝胶分离血清分离,然后离开设置一到两个小时收集粗2.5毫升血清,立即将其保存在液氮和送往实验室进行进一步分析。实验周期结束后,每组6只羊被代表的平均体重(入选标准)的集团选择和屠杀组织样本收集。组织样本(约0.5×0.5×0.5厘米³)longissimus dorsi肌肉和皮下脂肪从左边的尸体装进2毫升在液氮冻存管和冷冻立即屠杀20分钟内生化指标和组学分析。每个组的加权样本包含18个生物学重复。

生化指标的分析

生长激素(GH)、总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(氧化酶)和丙二醛(MDA)确定使用商用设备(hy - 60021, - 60001,为什么HY-M0018, hy - 60005, hy - 60003;北京华英生物技术研究所、北京、中国)。血清免疫球蛋白A、M G (IgM, IgA免疫球蛋白)和肿瘤坏死因子(TNFα)是由商用设备(HY-N0048、HY-N0049 HY-N0050, HY-H0019;北京华英生物技术研究所研究院、北京、中国)。免疫球蛋白(IG)是免疫球蛋白IgA的总和,IgM和免疫球蛋白。肌肉组织样本包含5个生物学重复(Con组),6生物重复(TR2组)和5生物重复(TR2组),分别。脂肪组织样本包含5个生物学重复(Con组),5生物重复(TR2组)和5生物重复(TR2组),分别。血清样本包含8个生物学重复(Con组),7生物重复(TR2组)和8生物重复(TR2组),分别。技术重复所有样品不少于2。不排除数据点的分析。

广泛的目标代谢组学分析

组织样本的肌肉被Metware提取根据标准程序。样本提取进行了分析使用一个LC-ESI-MS / MS系统(UPLC ExionLC广告,https://sciex.com.cn/;女士,QTRAP^®系统,https://sciex.com/)。点燃和三重四极(回调)扫描获得在一个三重quadrupole-linear离子阱质谱仪(QTRAP) QTRAP^®质/ MS系统,配备一个应急服务国际公司涡轮Ion-Spray界面,操作在积极和消极离子模式和控制分析师1.6.3软件(Sciex)。仪器调优和质量校准进行了10和100年调μmol / L聚丙二醇解和点燃模式,分别。一组特定的MRM转换是监控每个段根据代谢产物筛选了在这个时期。显著调控代谢物组由变量重要性之间的投影(VIP)≥1和绝对的日志₂FC(褶皱变化)≥1。VIP价值观从OPLS-DA提取结果,也包含分数情节和排列图,使用R包MetaboAnalystR生成。数据日志变换(日志₂),意味着OPLS-DA前定心。为了避免过度拟合,排列测试(200排列)。

转录组分析

RNA-extract和肌肉RNA-seq按照标准程序进行的Majorbio Illumina公司HiSeq xten / NovaSeq 6000测序仪(2×150个基点读取长度)。原始的配对终端读取被SeqPrep修剪和质量控制(https://github.com/jstjohn/SeqPrep)和镰状(https://github.com/najoshi/sickle)使用默认参数。然后清洁读取分别使用HISAT2对齐到参考基因组与取向模式(http://ccb.jhu.edu/software/hisat2/index.shtml)软件(8)。每个样本的映射读取被StringTie组装(https://ccb.jhu.edu/software/stringtie/index.shtml?t=example)reference-based方法(9)。识别度(差异表达基因)在两个不同的样品,每个记录的表达水平计算根据记录每百万读取(TPM)的方法。RSEM (http://deweylab.biostat.wisc.edu/rsem/)(10)是用来量化基因丰度。本质上,微分表达式分析使用DESeq2 (11)/ DEGseq (12)/磨边机(13)与Q值≤0.05,度与| log2FC | > 1和Q值≤0.05 (DESeq2或磨边机)/ Q值≤0.001 (DEGseq)被认为是基因表达明显不同。转录组序列数据被存入NCBI数据库(加入。PRJNA898816)。

统计分析

是由SPSS 19.0统计分析软件(IBM SPSS统计,IBM公司,阿蒙克,纽约,美国)。数据评估使用单向方差分析其次是土耳其的多个生理生化指标的测试范围。意义被宣布如果p< 0.05。此外,组学测序数据分析利用网络平台进行数据分析,包括Metware云工具(https://cloud.metware.cn/ /工具/工具列表)和Majorbio云平台(https://cloud.majorbio.com/)。直方图和代谢途径的地图绘制分别使用8和Adobe Illustrator CS6 Graphpad棱镜。

结果

生长性能

在整个试验中,未发现显著差异在日常获得(0-25d) (Con < TR2 < TR1)和饲料获得比(F / G) (Con > TR2 > TR1) (p> 0.05,表3),尽管集团TR1喂养——显示出小增加单日涨幅(0-25d)和F / G略有减少。显然,治疗完了和摘要(集团TR2)产生一个明显的增加ADFI整体提升时期p< 0.05),这表明美国职业足球大联盟是一个美味的饲料推广。此外,ADG,单日涨幅(25-50d)和血清生长激素水平均显著提高MLs-treatment组(p< 0.05)。此外,奶奶喂养导致显著增加最后体重(p< 0.05)。

抗氧化性质

所示表4、SOD(超氧化物歧化酶)、猫(过氧化氢酶)氧化酶(谷胱甘肽过氧化物酶)和TAOC(血清总抗氧化活性)和肌肉在MLs治疗组显著增加,尤其是在奶奶的治疗组(p< 0.05);SOD和氧化酶脂肪组织也显著增加(p< 0.05),猫和TAOC倾向于增加(Con < TR2 < TR1,p> 0.05)。此外,喂养MLs显著降低MDA的含量在羊羊的血清和肌肉(p< 0.05),MDA的含量在脂肪组织反对> TR2 > TR1 (p> 0.05)。

进一步探索如何MLs导致促进抗氧化性能的差异,肌肉代谢组学应用广泛的目标。共43个显著差异代谢物(民主党),包括19日调节和24个表达下调民主党——治疗后,根据过滤条件,代谢物内容在FC≥2或FC≤0.5,和VIP≥1 (图1一个)。在此基础上,假定值升序列出和日志的绝对值₂FC在降序上市的43个民主党进一步获得领先20民主党所示图1 b。这些一流的民主党主要参与脂质、碳水化合物、氨基酸、有机酸代谢。热图显示,抗氧化性能负相关(深蓝色)与脂类代谢的产物(8-iso前列腺素F2α,11β-prostaglandin F2α,8-iso前列腺素F2β,(±)8-HETE 13-HOTrE,肉碱C8:1),并呈正相关(暗红色)与葡萄糖6-Phosphate,果糖6-Phosphate-Disodium盐,D-Fructose-1, 6-Biphosphate-Trisodium盐,和D-Mannose 6-Phosphate,碳水化合物代谢相关(图1 c)。这表明,脂质代谢和碳水化合物代谢完了治疗调节抗氧化的过程。更重要的是,相关分析表明,5-Hydroxy-L-Tryptophan表达的增加和indoleacrylic酸由色氨酸代谢可能在抗氧化剂监管起着至关重要的作用。图2一个展出的民主党反对与TR2,包括16个调节和39个表达下调,总共55民主党,基于相同的筛选标准——治疗。同样,一流的20个民主党图2 b获得相同的方法,也主要是参与脂类代谢(8-iso前列腺素F2α,11β-prostaglandin F2α,8-iso前列腺素F2β,13-HOTrE,肉碱C8:1),碳水化合物代谢(D-Mannose 6-phosphate,葡萄糖6-phosphate,果糖6-Phosphate-Disodium盐),氨基酸代谢和有机酸代谢。然而,很少有相关关系(黄色图2 c)在碳水化合物代谢和抗氧化性能之间的热图分析显示摘要补充可能会略,或不通过调节碳水化合物代谢促进抗氧化性能。

考虑到20个民主党和抗氧化性能指标之间的欺诈与TR1和反面与TR2,它不是太难发现脂质代谢的重要性,特别是多不饱和脂肪酸的过氧化作用(欧米伽),氨基酸代谢为MLs治疗(主要是色氨酸代谢),和碳水化合物代谢(主要是糖酵解和甘露糖6-phosphate途径)——治疗在促进抗氧化性能。欧米伽的色氨酸代谢和过氧化反应可能是有前途的MLs-dependent生物标记的抗氧化代谢途径。Indoleacrylic酸和5-hydroxy色氨酸(5-HTP)从色氨酸代谢的两种途径获得(图3)有显著调节。Indolelactic酸,上游代谢物indoleacrylic酸,也显著增加——治疗(p= 0.015)。13-HOTrE,此外,显著降低了8-HETE 8-iso前列腺素F2α,11β-prostaglandin F2α,和8-iso前列腺素F2β水平和增加肉碱C8:1存在MLs治疗后。

转录组分析,进一步验证减少欧米伽的过氧化反应确实能促进抗氧化性能。所有过滤测序基因被用于基因co-expression加权网络分析(WGCNA)分析。相关分析不同模块的相关基因和分组因素和六个民主党欧新陈代谢(8-iso前列腺素F2α,11β-prostaglandin F2α,8-iso前列腺素F2β,(±)8-HETE 13-HOTrE,肉碱C8:1)所示图4一。三个模块(强调模块在红色的基因图4一)几乎相同的相关性与分组因素和民主党集成进行进一步分析。随后,14个目标度从集成获得基因有两个标准,他们假定值必须小于0.05,和绝对的日志₂FC (Con比TR1)值必须不小于1。随后,他们聚集有六个民主党网络图分析(图4 b)。这些目标14度的相对表达水平在三组所示图4 c。的相对表达水平GCNT1,IFITM10,EXTL1,RILP,BBC3,RAB9A,MOB3B,SESN1,CDH4,MEIS1,RAB9A,NUDT7,FMO2和NUDT7显著降低(p< 0.05)。

免疫反应

血清免疫球蛋白G(免疫球蛋白)和总免疫球蛋白(Ig)水平增加件(p< 0.05)显著和摘要美联储组(p> 0.05)。促肿瘤坏死factor-α(TNF-α)都大幅减少美国治疗(图5一个)(p< 0.05)。然而有一个独特的减少免疫球蛋白M (IgM)——治疗后(p< 0.05)。完了后减少IgM治疗相关的过渡从IgM抗体类免疫球蛋白,在免疫反应(14)(图5 b)。

据吴et al。(15),肌肉支持一个强大的免疫反应。验证促进免疫——的过程,所有的果度治疗肌肉转录组分析的申请富集分析,和前八名KEGG通路中表示一个直方图(图5 c)。四个主要丰富通路(箭头所指的地方图5 c)与细胞凋亡和免疫过程密切相关。随后,共有六个注释领先度的四个途径和免疫指标结合分析相关性和一个清晰的关系是圆形图所示(图5 d)。MLs治疗后,相对度的表达式,包括DOCK2,BBC3,MYO10、PIK3R3 PLA2G4D,GADD45A明显改变(图5 e)。

以前,我们发现一件改善碳水化合物代谢,糖酵解的关键过程之一。人们已经发现,它能提供生物合成的中间体和还原能力的免疫细胞的生长和增殖。MLs治疗提高血糖水平,中央基质糖酵解和补充完了显著增加glucose-6-P的内容,glyceraldehyde-3-P (p< 0.05),几乎显著增加fructose-6-P (p= 0.054)(图6)。另外,摘要中有显著增加D-mannose治疗(p< 0.05)和mannose-6-P完了治疗(p< 0.05)(图6)。这两个都是来自mannose-6-P通路。

讨论

众多研究表明MLs的多样化的促生长效应(4,16)。我们的研究也证明了这一点。此外,本研究还发现,完了在适口性和增长促进优于用完了,这是一个罕见的饲料添加剂,及其在畜牧业生产出现相当大的应用前景。

抗氧化活性

氧化在生物系统主要是由一系列的氧化还原酶。过氧化自由基引起的连锁反应可能会导致氧化应激(17)。氧化酶是常见的酶SOD、CAT和抗氧化剂。SOD可以转换生成的自由基(O2−•)在人体内的过氧化反应为过氧化氢(18)和H₂O₂可以转化为H₂阿猫和氧化酶减少自由基对身体产生的伤害,提高抗氧化性能。MDA是一个代表终端产品在non-enzymatic脂质过氧化反应,表明脂质过氧化的程度(19)。同时,MDA也膜损伤和身体衰老的一个重要指标,其中一个由活性氧的增加产生的有毒物质(20.)。氧化酶SOD的增加,猫,TAOC和降低MDA的研究都表明,美国可以改善身体的抗氧化性能,这与以前的研究结果是一致的(3,21- - - - - -23)。原因是MLs富含生物活性成分。此外,本研究还发现,果有最强的抗氧化性能,主要是因为他们的活性成分高于摘要(24)。

Indoleacrylic酸来源于色氨酸代谢,已被证明有明显的抗炎作用在体外和体内(25),也有有益的影响肠上皮屏障功能(26)。Indolelactic酸,上游代谢物indoleacrylic酸已被证明具有抗菌,氧化,抗炎活动(26,27),可以调节免疫功能(28)。L-5-hydroxytryptophan (5-HTP)是一种单胺神经递质参与调制的情绪、认知、奖励、学习、记忆、睡眠,和许多其他生理过程(29日),还可以抑制炎症和关节炎通过减少炎性介质的生产(30.)。总体而言,美国,尤其是完了,必须赋予抗菌,抗氧化,抗炎,immunity-enhancing属性通过色氨酸代谢。

亚油酸(LA)、花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和α-linolenic酸(ALA)的代表主要欧和过氧化反应的主要代谢途径中所述哺乳动物都是酶(COX环氧酶;脂肪氧合酶,液态氧;细胞色素P450 (CYP)和non-enzymatic (31日)氧化。8-HETE和13-HOTrE oxylipins,一群氧化代谢物源自欧(32)。一般来说,合成oxylipins波动和生理或病理状态的变化(33)。13-HOTrE is derived from ALA通过考克斯酶通路。研究表明,13-HOTrE水平显著增加在某些疾病(34,35),比如急性肝损伤。因此,它通常被认为是一个促炎的因素。het来自ARA通过考克斯催化。Hayashi et al。(36)报道,几个ARA-derived (18-HETE / 20-HETE)和ALA-derived (13-HOTrE) oxylipins倾向于增加牛mastitic牛奶。在这项研究中,美国治疗减少了8-HETE内容。与此同时Ma et al。(37)也报道了8-HETE有关Zuojin丸治疗慢性nonatrophic胃炎的疗效,治疗前8-HETE水平是高于治疗后。因此,减少oxylipins与MLs在这项研究中治疗可能改善身体的抗氧化性能和免疫,并将承诺为牲畜标记福利。

8-iso前列腺素F2α,作为最终产品的脂质过氧化反应,生成与ROS ARA交互通过非酶的路线和一个健壮的氧化应激生物标志物的疾病(32,38)。8-iso前列腺素F2β宪法异构体的8-iso前列腺素F2α。奥利维拉et al。(39)发现8-iso前列腺素F2β已经效力远低于8-iso前列腺素F2αα-configuration。11β-prostaglandin F2α,代谢物的8-iso前列腺素F2α,已发现与氧化应激水平有关特定疾病(40)。因此,显著降低了8-iso前列腺素F2α11β-prostaglandin F2α,和8-iso MLs治疗后前列腺素F2β水平表明下降的欧米伽的过氧化反应,这将产生互惠的影响降低氧化应激和增强抗病能力。

肉碱不仅在脂肪酸β-oxidation中扮演着重要角色,而且在增强免疫力和抵抗疾病。郭et al。(41)发现,肉碱C8:1在非酒精性脂肪肝组显著降低,这可能是深刻的毛地黄黄酮治疗后逆转。有研究报道在癌症患者血清酰肉碱浓度下降(42)。它可以假设补充肉碱C8:1水平改变增加了美国职业足球大联盟可能加速线粒体β-oxidation (43从而提高免疫力和抗病能力。

之前有研究表明,增加GCNT1,IFITM10,EXTL1,RILP,BBC3,RAB9A,MOB3B,SESN1,CDH4,MEIS1,RAB9A,NUDT7,FMO2免疫缺陷相关,自噬抑制疾病敏感性和氧化应激。MLs的因此,治疗后,减少过氧化的欧米伽(过氧化反应产品)的减少降低了上述基因的表达,从而提高免疫和抗氧化特性。此外,Shumar et al。(44)和克尔et al。(45)表明,减少NUDT7可以减少累积的过氧物酶体通过调节β-oxidation过氧物酶体脂肪酸,从而提高抗氧化性能;通用电气等。46)发现的减少NUDT7增强免疫防御反应;谷口et al。(47和刘et al。48)报道,NUDT7低表达可能会上调血红素生物合成和导致meat-redness浓缩。因此,MLs的加入不仅可以减少欧米伽的过氧化反应,增强机体的抗氧化能力和免疫力,而且提高肉红色。

总的来说,抗氧化性能密切相关的免疫反应。补充我们的研究证明美国是有效促进抗氧化性能和抵抗疾病,是由于其功能减少过氧化反应和增加欧米色氨酸代谢。此外,脂质氧化产品影响保质期(49)、感官特征(50),肉的营养成分(51),美国职业足球大联盟的作用在减少欧米伽的过氧化反应猜测是有肉质量的提高有关。

免疫反应

根据Sundling et al。(52),分泌抗体具有免疫保护作用,首先将通过变量配对地区外国抗原的免疫球蛋白重型和轻型链。免疫力增强,增加了搞笑,免疫球蛋白和减少TNFαMLs治疗。此外,完了诱导最大免疫动物的过渡从IgM抗体类免疫球蛋白,在免疫反应(14),在此期间,早期低亲和力IgM抗体逐渐取代更有效,高亲和性IgG抗体(53)来实现有效的血清学免疫(52)。

DOCK2调节免疫细胞的某些子集的迁移通过Rac激活(54)和在发展中扮演一个重要的抗炎作用的各种炎症性疾病(55)。BBC3是一个转录目标基因和凋亡参与激活细胞死亡过程(56)。博罗et al。(57)报道,促炎MYO10介导炎症在癌症通过调节基因组的稳定性。研究表明,PIK3R3是一个多功能的炎性疾病相关基因,牲畜的外套颜色和细胞增殖(58- - - - - -60)。邵et al。(61年澄清,PLA2G4D,主要的炎性因子,促进CD1a表达式,可以被lipid-specific CD1a-reactive T细胞,导致il - 22生成和IL-17A的生产。根据Ehmsen et al。(62年和江泽民et al。63年),表达的增加GADD45A细胞周期调节,可以改善肝纤维化大鼠和保护修饰符的神经源性骨骼肌萎缩。集体,MLs补充改善肌肉免疫反应和抗病性。

糖酵解是一个关键的过程密切相关的免疫反应,以及提供生物合成的中间体和减少对细胞生长和增殖能力的免疫细胞(64年)。磷酸戊糖途径(PPP)从glucose-6-P glyceraldehyde-3-P提供免疫细胞与免疫功能的主要代谢产物,如合成的活性氧和抗氧化剂的还原能力吞噬细胞和树突细胞的磷脂合成。来自fructose-6-P己醣胺生物合成途径,提供了基质的脂质和蛋白质糖基化对Treg和M2巨噬细胞谱系(很重要64年)。因此——治疗可能通过糖酵解增强免疫力,进而为免疫功能提供了关键代谢物。

D-mannose起到重要作用的T细胞免疫反应和目前收到越来越多的关注,尽管它的正常的生理血液葡萄糖浓度小于的五十分之一。Zhang et al。(65年)认为D-mannose诱导调节性T细胞和抑制免疫病理反应在活的有机体内和在体外。Mannose-6-phosphate代谢D-mannose是一种新型调节器的T细胞免疫(66年)和一个承诺目标配体在癌症治疗,以及赋予更好的疗效和较低的毒性在健康组织(67年)。此外,mannose-6-P不仅在溶酶体中起着至关重要的作用功能(如自噬)也在调节溶酶体生物起源(68年)。因此,显著增加D-mannose摘要治疗(p< 0.05)和mannose-6-P完了治疗(p< 0.05)(图6)通过mannose-6-P通路可能增强T细胞免疫和调节自噬溶酶体生物起源的。

综上所述,奶奶的补充可以提高免疫应答通过糖酵解和mannose-6-P通路诱导的高亲和性免疫球蛋白类从低亲和力IgM抗体。

数据可用性声明

提出了原始的贡献研究公开。这些数据可以发现在NCBI库加入号码:PRJNA898816 [https://www.ncbi.nlm.nih.gov/search/all/?term=PRJNA898816)和MetaboLights存储库中加入数字:MTBLS6516。

道德声明

动物研究是审查和批准的动物保健和使用委员会研究所的西北大学& F。所有者的书面知情同意了他们的动物参与这项研究。

作者的贡献

XC和YY的概念和设计研究。XC进行统计分析和写了初稿的手稿。YY, MZ,陆地、磅、CS、YQ修订后的手稿。SL、HW ZL, XW WQ和XS帮助与实验部分。CS和YQ为手稿提供了财政支持。所有作者导致手稿修改,和阅读和批准提交的版本。

资金

这项研究是财务支持的特殊项目在陕西林业技术和创新学院(sxlk2020 - 0211),中国农业研究体系的财政部(财政部)和玛拉(农业和农村事务部)(CARS-18),陕西养蚕产业技术体系建设(nykj - 2022 - yl (XN) 29)的专项资金重点支持项目在西农大学扩展模式(TGZX2022-13)。

确认

作者承认与所有参与本研究,我们要感谢Editage (www.editage.com)英语编辑。

的利益冲突

作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。

出版商的注意

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。

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