氯胺酮抑制卵巢癌细胞生长通过调节lncRNA-PVT1 / EZH2 / p57轴
李道1 __
Yingchun广域网- 1麻醉学,中日联合医院、吉林大学、长春、中国
- 2内分泌学、中日联合医院,吉林大学、长春、中国
- 3眼科、吉林大学中日联合医院,长春,中国
- 4门诊部的空军航空大学,长春,中国
- 5分子医学,在圣安东尼奥德克萨斯大学健康科学中心,圣安东尼奥,TX,美国
- 6深圳湾实验室高科国际创新中心,化学生物学研究所,深圳,中国
氯胺酮广泛用于癌症疼痛治疗诊所,并已被证明能够抑制多种肿瘤细胞生长。然而,克他命的影响对卵巢癌细胞增长和下游分子没有被定义。在目前的研究中,我们发现,氯胺酮显著抑制六卵巢癌细胞株的增殖和生存。此外,氯胺酮诱导卵巢癌细胞周期阻滞,细胞凋亡,抑制集落形成能力。lncRNAs以来被确认为癌症发展的主要监管机构,我们进行了生物信息学分析地理数据集,发现14显著改变lncRNAs在卵巢癌患者。然后我们调查了这些lncRNAs氯胺酮的影响,并发现氯胺酮监管的表达lncRNA PVT1。从力学上看,克他命监管P300-mediated H3K27乙酰化PVT1启动子的激活。我们RNA免疫沉淀反应实验表明PVT1绑定的组蛋白甲基转移酶剂zeste同族体2 (EZH2)和监管目标基因的表达,包括p57,因此改变卵巢癌细胞生物学。我们的研究显示,氯胺酮可以对卵巢癌病人的一种很有潜力的治疗策略。
介绍
卵巢癌(OC)是最致命的女性妇科恶性肿瘤(Doubeni et al ., 2016;Trabert et al ., 2020)。大约有22240新发病例和2018年在美国大约14070人死亡(里德et al ., 2017;老爹et al ., 2018)。因为早期的非特异性症状和缺乏有效的筛选方法,超过70%的卵巢癌患者在晚期诊断时(菲戈阶段III或IV)。目前,标准治疗卵巢癌手术和化疗。有许多潜在的新治疗方案基于标准方法的修改和添加一个新的生物药走出最近的临床试验(Matulonis et al ., 2016)。然而,生物药物和新的治疗方法没有显示治疗卵巢癌,复发和化疗抵抗仍然不容忽视(Matulonis et al ., 2016;摩尔et al ., 2018)。因此,新的治疗方法仍需要。
长非编码rna的rna (lncRNAs)是一组分为≥200个核苷酸长的rna,并参与不同的分子遗传学和细胞过程,包括细胞增殖、胚胎发育和肿瘤发生通过调节基因表达(王、张,2011年)。最近,越来越多的癌症特异表达和演示了lncRNAs参与广泛的癌症生物步骤(Bartonicek et al ., 2016;埃文斯et al ., 2016;唐et al ., 2017)。在卵巢癌中,研究表明,lncRNAs经常观察到的失调,OC细胞增殖中发挥关键作用,细胞凋亡,细胞周期阻滞,迁移,入侵和耐药性(王et al ., 2019)。
克他命,一个门冬氨酸(N-methyl-d-aspartate)受体拮抗剂,是1970年首次批准作为临床使用的麻醉,,现在被广泛用作麻醉剂,止痛、镇静在各种临床设置(2013年,瑞典)。氯胺酮通常用于治疗癌症疼痛患者opiate-resistant痛苦,因为它明显镇痛甚至subnarcotic剂量(Bredlau et al ., 2013)。然而,之前的研究表明,氯胺酮可以诱导神经毒性存在剂量依赖的相关性,包括神经元细胞凋亡和细胞死亡在神经元和神经干祖细胞(白et al ., 2013;王et al ., 2014)。此外,据报道,氯胺酮调节几种癌症的扩散和生存,包括肝癌、胰腺癌和肺腺癌(Malsy et al ., 2015;山口et al ., 2013;周et al ., 2018)。然而,克他命的影响对卵巢癌细胞增长和下游分子在很大程度上仍是个未知数。
在这项研究中,我们使用一些药物和生化检测,识别可能的氯胺酮对OC细胞效应和机制。我们发现氯胺酮抑制细胞生长通过针对lncRNA-PVT1 OC。因此,氯胺酮可以被视为一种可能的癌症治疗的候选分子。
材料和方法
细胞系和试剂
人类卵巢癌细胞系OVCAR-3 SKOV3, A2780, 3 ao, COC1、ov - 90,和人类卵巢表面上皮细胞(HOSEpiC)购买的类型文化的中国科学院(中国上海)。OVCAR-3, SKOV3, A2780和COC1细胞保持RPMI1640介质(康宁,美国)补充10%胎牛血清(的边后卫;Gibco;热费希尔科学,Inc .), 100 U /毫升青霉素和链霉素100μg /毫升(热费希尔科学,Inc .)和细胞培养在37°C和5%的二氧化碳。3 ao和ov - 90细胞保持在杜尔贝科修改鹰介质(DMEM)(美国康宁公司)与10%胎牛血清(补充的边后卫;Gibco;热费希尔科学,Inc .), 100 U /毫升青霉素和链霉素100μg /毫升(热费希尔科学,Inc .)。HOSEpiC细胞被维护在卵巢上皮细胞培养基(ScienCell,美国)。
氯胺酮是由Sigma-Aldrich(美国)和溶解在DMSO溶液。
卵巢癌病人数据挖掘
卵巢癌患者的整个数据从地理数据集(GSE38666)下载1(丽丽et al ., 2013)。数据挖掘是在R编程语言实现。在不同的样本数据归一化的z分数。热图生成使用聚类方法和相关的差异表达卵巢癌被用来揭示lncRNAs当比较正常组织或卵巢癌组织。
细胞增殖、生存和集落形成试验
细胞增殖是评估使用Sulforhodamine B (SRB)测定。短暂,OC细胞被播种在96 -(3000细胞/)和处理显示试剂。细胞增殖是衡量SRB化验3天治疗后(Vichai Kirtikara, 2006)。细胞生存评估用台盼蓝染色,死细胞在蓝染色,使用血细胞计数器手动计算。
细胞集落形成试验,OC(1500细胞/)被播种在6-well板和维护中10 - 14天。随后,殖民地和4%多聚甲醛固定,沾0.1%结晶紫,和克隆的数量是计算使用倒置显微镜。
实时定量PCR(存在)
从OC细胞总RNA分离使用RNA隔离设备(试剂盒,美国)根据制造商的协议。iScriptTM美国逆转录超级组合工具包(Bio-Rad)被用于互补脱氧核糖核酸的合成,并使用SYBR样本分析绿色主人混合实时PCR系统(Bio-Rad)。GAPDH是利用作为一个内生校准器控制。使用的引物序列如下:PVT1,向前5′-TGAGAACTGTCCTTACGTGACC-3′,反向5′-AGAGCACCAAGACTGGCTCT-3′;MALAT1,向前5′-AGAGCACCAAGACTGGCTCTGTAAC-3′,反向5′-GAACAGAAGGAAGAGCCAAG-3′;LINC00092,向前5′-CCTATGATTTGGCCTCTGGA-3′,反向5′-GAGAGCA GCGTTCAGGAAAC-3′;PTAR,向前5′-ACAGATGTAAAC CAACCAGA-3′、反向5′-ATGCTACTGGAGACTTTAGG-3′;SnaR,向前5′-TGGAGCCATTGTGGCTCCGGCC-3′,反向5′-CCCATGTGGACCAGGTTGGCCT-3′;Meg3,向前5′-CTGCCCATCTACACCTCACG-3′,反向5′ctc TCCGCCGTCTGCGCTAGGGGCT-3′;ZFAS1,向前5′acg TGCAGACATCTACAACCT-3′、反向5′-TACTTCCAACAC CCGCAT-3′;UCA1,向前5′-CTCTCCTATCTCCCTTCAC TGA-3′、反向5′-CTTTGGGTTGAGGTTCCTGT-3′; MIR4697HG, forward 5′-GAAGTGTGTGTGCAGGCTTG-3′, reverse 5′-GGAAAAGGCTCTGTCGTGGA-3′; TUG1, forward 5′-TAGCAGTTCCCCAATCCTTG-3′, reverse 5′-CACAAATTC CCATCATTCC-3′; DNM3OS, forward 5′-GGTCCTAAATTCA TTGCCAGTTC-3′, reverse 5′-ACTCAAGGGCTGTGATTT CC-3′; EWSAT1, forward 5′-GTGTCTGGCAAGGAACAC TA-3′, reverse 5′-GGTGGAGAAGAGGGACAAT-3′; HOTAIR, forward 5′-GGCAAATGTCAGAGGGTTCT-3′, reverse 5′-TT CTTAAATTGGGCTGGGTC-3′; GAS5, forward 5′-TGGTTCT GCTCCTGGTAACG-3′, reverse 5′-AGGATAACAGGTCTGC CTGC-3′; and GAPDH, forward 5′-CACCCACTCCTCCACC TTTG-3′ and reverse 5′-CCACCACCCTGTTGCTGTAG-3′. The 2-ΔΔCq method was used to calculate the relative expression levels.
西方墨点法
细胞被radioimmunoprecipitation缓冲细胞溶解,20μg细胞蛋白质提取物在sds - page凝胶分离,然后转移到硝化纤维素膜(微孔,美国)。膜被5%的脱脂牛奶和孵化抗体cytocrome C (Abcam生物技术1:1000年,美国),VDAC(热科学1:1000年,美国),PARP1(1: 1000年,细胞信号技术,美国),或肌动蛋白(圣克鲁斯生物技术1:5000年,美国)一夜之间在4°。然后,膜与二次孵化抗体和蛋白可视化使用超级信号西方Pico化学发光底物(热科学)。
Caspase-3/7活动分析
通过使用Apo-ONE Caspase-3/7活动评估TM齐次Caspase-3/7试验(Promega公司,美国)根据制造商的指示。
细胞周期分析
与车辆或表明氯胺酮治疗后,OC细胞被胰蛋白酶化收获,与70%乙醇固定,然后一夜之间保留−20°C。与PBS三次水洗后,细胞在propidium resuspended碘(π)解决方案,包含核糖核酸酶(100μg /毫升),并在室温下孵化在黑暗30分钟后跟一个流式细胞分析仪研究。
交通转染
P300 siRNA购买从西格玛奥德里奇(美国)。Lipofectamine RNAiMAX(英杰公司、美国)根据指令用于转染。
染色质免疫沉淀反应(芯片)的测定
SimpleChIP®酶染色质IP包(细胞信号技术,美国)是用于芯片分析根据制造商的指示;抗体H3K27ac(细胞信号技术,美国),P300(细胞信号技术,美国)和EZH2(细胞信号技术,美国)用于免疫沉淀反应。分析了DNA免疫沉淀反应中存在使用以下引物:PVT1启动子片段1:F: 5′gca GGAGAATCGCTTGAAC-3′和R: 5′-ACAGATGTAAGAG CTGCCC-3′;片段2:F: 5′-GAACAAGATAACCACA TCCCAC-3′和R: 5′-TTTCCAGAAGCCGAGTTGC-3′;片段三:F: 5′-TCTGGCCCTCCTATTTCAC-3′和R: 5′-TTTCCCTGAGCCCTCTTAC-3′;片段四:F: 5′-CAGA GCCTACCCTCCGCT-3′和R: 5′-CGGGGCTGGCGGGTT-3′;片段5:F: 5′-TCCTCCCCAATCTAAGTGCC-3′和R: 5′-GCCAGTCACTTTCCCGTTTC-3′。P57发起人底漆:F: 5′-GGTGTCTAGGTGCTCCAGGT-3′和R: 5′-GCACTCTCCAGGAGGACACA-3′。
RNA免疫沉淀反应试验
RNA免疫沉淀反应(RIP)是由使用RNA结合蛋白免疫沉淀反应工具包(微孔、美国)制造商的指示。EZH2抗体和免疫球蛋白(控制)(细胞信号技术,美国)用于免疫沉淀反应。免疫沉淀反应rna被由存在决定分析。
统计分析
数据意味着±SD从三个独立的实验。P使用双尾学生的价值决定t以及和方差分析测试。结果说明与GraphPad 7。P< 0.05被认为是显示统计学意义。
结果
氯胺酮抑制OC细胞增长
o研究氯胺酮对OC细胞生长的抑制作用,六OC细胞系(OVCAR-3, SKOV3 A2780 3 ao, COC1, OV90)服用氯胺酮的浓度表示。所示图1模拟,氯胺酮治疗显著地抑制OC细胞增殖和生存在剂量和时间的方式。我们下一个评估的影响氯胺酮在正常的人类卵巢表面上皮细胞(HOSEpiC)。氯胺酮治疗后没有观察到明显的抑制作用(补充图S1)。
图1所示。氯胺酮抑制OC细胞增长。(A, B)六OC细胞株72 h表示处理氯胺酮的浓度,细胞增殖和生存被Sulforhodamine B (SRB)分析评估(一)和台盼蓝染色(B)*P< 0.05,* *P< 0.01,* * *P< 0.001。(C, D)OCVAR-3 SKOV3细胞治疗10μM氯胺酮表示时间。然后,分析了细胞增殖(C)和生存(D)。*P< 0.05,* *P< 0.01,* * *P< 0.001。
氯胺酮调节细胞周期阻滞,细胞凋亡,在OCVAR-3和SKOV3细胞集落形成能力
氯胺酮的抑制作用是进一步研究的可能机制和细胞周期。所示图2一个流式细胞术结果表明,氯胺酮治疗引起的细胞明显增加逮捕在OCVAR-3 G2-M阶段和SKOV3细胞。此外,caspase3/7较高的活性氯胺酮治疗后(图2 b)。氯胺酮治疗也升高线粒体细胞色素C的分解和PARP - 1乳沟细胞系(图2 c, D)。此外,集落形成试验结果表明,OCVAR-3和SKOV3细胞的集落形成能力降低氯胺酮治疗后(图2 e)。这些数据表明,氯胺酮升高细胞周期阻滞和细胞凋亡,但OCVAR-3和SKOV3细胞集落形成能力下降。
图2。氯胺酮调节细胞周期阻滞,细胞凋亡和OCVAR-3和SKOV3细胞集落形成能力。(一)OCVAR-3 SKOV3细胞治疗与氯胺酮,随后分析了PI染色测定细胞周期阶段分布。(B)与氯胺酮OCVAR-3 SKOV3细胞治疗,相对caspase-3/7活动测量使用Apo-One同质caspase-3/7化验* *P< 0.01,* * *P< 0.001。(C)蛋白质水平的线粒体细胞色素c和VDAC胞液和氯胺酮处理后被免疫印迹分析。(D)分析了蛋白质水平的裂解PARP1西方墨点法与氯胺酮治疗后。(E)OCVAR-3和SKOV3细胞集落形成试验进行孵化后表明氯胺酮的浓度。*P< 0.05,* * *P< 0.001。
LncRNAs在卵巢癌患者特异表达
ncRNAs已报告发挥重要作用在控制卵巢癌细胞增殖和生存(王et al ., 2019)。探讨微分lncRNA表达式在卵巢癌患者中,我们做了生物信息学分析地理数据集(GSE38666)。已报告lncRNAs的表达水平与卵巢癌是卵巢癌与正常组织相比,并演示了使用的热图和火山图所示图3一和补充图S2。十四lncRNAs (PVT1 LINC00092、PTAF SnaR, Meg3, MALAT1, ZFAS1, UCA1, MIR4697HG, TUG1, GAS5, DNM3OS,热空气,和EWSAT1)被发现明显特异表达,包括几个lncRNAs已被证明在其他肿瘤发挥重要作用,如PVT1 MALAT1, TUG1 GAS5,热空气(图3 b;王et al ., 2019)。
图3。表达式的lncRNAs卵巢癌患者。(一)热图的微分表达式lncRNAs卵巢癌患者在肿瘤和正常组织。数据归一化,z分数在不同的样本。(B)14 lncRNAs的表达在肿瘤和正常组织P< 0.05,* *P< 0.01,* * *P< 0.001。
氯胺酮监管lncRNA PVT1表达式通过P300 OCVAR-3和SKOV3细胞
从生物信息学分析结果进一步证实,我们评估的表达水平9 lncRNAs (PVT1、SnaR Meg3,热空气,MIR4697HG, TUG1, DNM3OS, UCA1,和EWSAT1),显示出更明显的差异表达的基础上图3 b在卵巢癌细胞株。与父母行相比,lncRNAs PVT1、SnaR Meg3,热空气,TUG1显著OCVAR-3和SKOV3细胞过表达(图4一),这与先前的报道是一致的(王et al ., 2019)。有趣的是,克他命的表达水平显著降低lncRNA PVT1,但没有影响其他lncRNAs OCVAR-3和SKOV3细胞(图4 b, C)。结果图4 d, E进一步证实,克他命监管的表达lncRNA PVT1时间的方式。
图4。氯胺酮监管lncRNA PVT1 OCVAR-3和SKOV3细胞表达。(一)的表达水平lncRNAs PVT1、SnaR Meg3,热空气,MIR4697HG, TUG1, DNM3OS, UCA1, EWSAT1分析中存在OCVAR-3和SKOV3和亲代细胞*P< 0.05,* *P< 0.01,* * *P< 0.001。(B, C)的表达水平lncRNAs PVT1、SnaR Meg3,热空气,TUG1分析中存在OCVAR-3与氯胺酮治疗后(B)和SKOV3细胞(C)* * *P< 0.001。(D, E)OCVAR-3(D)和SKOV3(E)细胞治疗10μM氯胺酮表示次lncRNAs的表达水平,分析了PVT1存在*P< 0.05,* *P< 0.01,* * *P< 0.001。
在OC探索PVT1进行靶向治疗的机制,我们首先分析了改性PVT1的启动子。丰富H3K27乙酰化作用(H3K27ac)信号被发现在PVT1启动子区域,这表明PVT1可能是由组蛋白乙酰化作用(图5一个)。确认,我们执行chromatin-immunoprecipitation化验(芯片)使用H3K27ac抗体和引物5区域内∼1 kb启动子区域(图5 b, C)。结果表明H3K27ac标志是高纯度PVT1启动子区域3 - 5,这浓缩在治疗后明显降低与氯胺酮(图5 c)。H3K27ac P300 / CBP是催化的复杂(Raisner et al ., 2018)。与P300特定的核,然后我们把OCVAR-3和结果表明,H3K27ac标志和PVT1表达显著下降(图5 d)。与这些研究结果一致,P300招募PVT1启动子区域3 - 5,这个招聘氯胺酮治疗后明显下降(图5 e)。这些数据表明,氯胺酮监管lncRNA PVT1表达式通过P300介导的组蛋白乙酰化作用。
图5。氯胺酮P300 PVT1介导的转录监管。(一)可视化H3K27ac浓缩7细胞系PVT1的TSS左右。(B)引物设计涵盖5 PVT1∼1 kb启动子区域内的区域。(C)OCVAR-3细胞治疗10μM氯胺酮48 h和芯片进行化验检测浓缩H3K27乙酰痕迹PVT1子* * *P< 0.001。(D)OCVAR-3细胞孵化与P300 siRNA 72 h,蛋白质水平的P300和H3K27ac PVT1水平进行了分析通过免疫印迹和存在,* *P< 0.01。(E)OCVAR-3细胞治疗10μM氯胺酮48 h和芯片分析进行P300检测招聘PVT1启动子。
氯胺酮监管p57表达式通过EZH2 OCVAR-3和SKOV3细胞
增强剂的zeste同族体2 (EZH2),一个亚基的polycomb压制复杂2,据报道,放松管制的OC细胞生长。此外,PVT1显示绑定EZH2和改善其稳定性在肝细胞癌(郭et al ., 2018)。我们接下来研究协会PVT1和EZH2 OC细胞进行试验。所示图6,PVT1 EZH2 OCVAR-3 SKOV3细胞,这个交互氯胺酮治疗后明显下降。更重要的是,招聘目标gene-p57 EZH2的启动子区域被氯胺酮显著抑制,因此,p57的表达水平显著增加OCVAR-3和SKOV3细胞(图6 b, C)。
图6。氯胺酮监管p57表达式通过EZH2 OCVAR-3和SKOV3细胞。(一)OCVAR-3 SKOV3细胞治疗10μM氯胺酮48 h和PVT1之间的相互作用,分析了EZH2 RNA免疫沉淀反应试验。(B)OCVAR-3 SKOV3细胞治疗显示浓度的氯胺酮48 h, EZH2的招聘p57分析了启动子芯片分析* *P< 0.01,* * *P< 0.001。(C)OCVAR-3 SKOV3细胞治疗72 h表示氯胺酮的浓度,分析了p57的mRNA水平存在* *P< 0.01,* * *P< 0.001。
讨论
门冬氨酸受体主要是发现在中枢神经系统内正常组织和参与突触可塑性和记忆功能。然而,门冬氨酸受体通常发现癌细胞表达,包括神经胶质瘤、口腔鳞状细胞癌、前列腺癌、骨肉瘤、胃癌(阿罗尼卡et al ., 2001;崔et al ., 2004;Abdul Hoosein, 2005;Kalariti et al ., 2005;刘et al ., 2007)。给政府的谷氨酸拮抗剂抑制癌症细胞的生长源于大脑,甲状腺、结肠癌、乳腺癌和肺癌,NMDA受体被认为在癌症细胞生长(扮演重要的角色Rzeski et al ., 2001;Stepulak et al ., 2005)。氯胺酮是一种最常见的NMDA受体拮抗剂和通常用于癌症疼痛治疗诊所。报告的氯胺酮对细胞生长的抑制作用在各种癌症,包括肝细胞癌、胰腺癌、肺腺癌和大肠癌(山口et al ., 2013;Malsy et al ., 2015;周et al ., 2018;段et al ., 2019)。虽然详细机制的知识是有限的,FOXO / TXNIP通路、CD69和VEGF被认为参与。为门冬氨酸受体表达在人类发现卵巢癌组织和人类卵巢癌细胞株(2015年,北等。),我们认为,氯胺酮可能调节卵巢癌细胞的生长。在这项研究中,我们发现氯胺酮显著anti-proliferative效应对卵巢癌细胞(图1)。氯胺酮引起的抑制作用可能源于诱导细胞凋亡和细胞周期在G2-M逮捕(图2)。
了解氯胺酮的作用机制,我们分析了长非编码rna的表达水平(lncRNAs)。LncRNAs会被认为是新的和有价值的分子参与肿瘤发生。报导了几个lncRNAs OC调节细胞生长,包括PVT1 MALAT1 TUG1,热空气,GAS5 (oz et al ., 2016;Hosseini et al ., 2017;马提尼et al ., 2017;长et al ., 2019;顾et al ., 2020)。为了找出哪些lncRNA可能ketamin相关,我们进行了生物信息学分析地理数据集获得OC的病人。十四lncRNAs OC患者特异表达,其中有五个是显著增加OC细胞系(图3)。然后,我们评估这些lncRNAs氯胺酮治疗后的表达。在这些lncRNAs,只有lncRNA PVT1氯胺酮治疗后显著降低OC细胞(图4)。虽然lncRNA PVT1上调OC细胞在一些研究报告,他们调查的机制失调。在这里,我们分析了修改,特别是组蛋白乙酰化作用,在PVT1发起人利用UCSC基因组生物信息学网站。丰富H3K27ac信号转录起始站点(TSS)附近发现PVT1的启动子。我们的芯片分析证实,H3K27ac标志是高纯度PVT1启动子区域3 - 5,这是接近TSS。有趣的是,氯胺酮的治疗显著降低H3K27ac标志的浓缩PVT1的启动子。H3K27ac以来被广泛认为是催化的P300 / CBP复杂,然后我们怀疑氯胺酮可以调节P300的功能。我们的研究结果表明,招聘的P300 PVT1启动子被显著地抑制氯胺酮治疗(图5)。
为了进一步研究氯胺酮的功能作用在OC,我们试图找出PVT1绑定的伙伴。成员EZH2 polycomb压制复杂2 (PRC2),通常参与肿瘤细胞的转录镇压。在卵巢癌,EZH2 upregulation广泛建立。EZH2促进细胞增殖和入侵的过度表达,抑制细胞凋亡,增强血管生成在上皮卵巢癌(李et al ., 2010,理解陆et al ., 2010)。PVT1据报道绑定EZH2和改善肝细胞癌EZH2蛋白稳定性(郭et al ., 2018)。在符合这个报告,我们把结果证实PVT1 EZH2,之间的互动,这种互动被显著地抑制氯胺酮治疗。一个重要机制EZH2促进OC细胞生长是通过调节p57,转录调节肿瘤细胞的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,分化、凋亡、迁移(郭et al ., 2010,2011年)。不足为奇的是,氯胺酮治疗降低了招聘的EZH2 p57的启动子,和p57的表达水平显著增加(图6)。
总之,我们的结果表明,氯胺酮显著抑制卵巢癌细胞的增殖和生存。从力学上看,氯胺酮抑制lncRNA PVT1表达式,招聘p57 EZH2的启动子,随后增加了肿瘤抑制gene-p57表达式。这些结果表明理性和小说对卵巢癌病人的治疗策略。
加入代码
原材料lncRNA数据集是公开在GEO加入号码GSE 38666。
数据可用性声明
最初的贡献提出了研究中都包含在这篇文章/补充材料,进一步的调查可以直接到通讯作者/ s。
作者的贡献
TL,司法院、广州、HL QL, LW进行实验和分析数据。LW验证了分析方法和监督这项工作(的结果图5)。YW和HJ指导实验。所有作者讨论了结果,导致最后的手稿。
的利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
确认
我们要感谢资金20190201007 jc。
补充材料
本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/fgene.2020.597467/full补充材料
脚注
引用
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关键字:氯胺酮、卵巢癌、lncRNA p300,组蛋白乙酰化作用
引用:赵J (T,杨,杨B, G,林H,刘问,王L, Wan Y和江H(2021)氯胺酮抑制卵巢癌细胞生长通过调节lncRNA-PVT1 / EZH2 / p57轴。前面。麝猫。11:597467。doi: 10.3389 / fgene.2020.597467
收到:2020年8月21日;接受:2020年11月02;
发表:08年3月2021年。
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