内生真菌的代谢产物从叶子中分离出来的gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba表现出抗氧化活性和过氧物酶体激动剂活动proliferator-activated受体α,β和γ和δgydF4y2Ba
佩德罗MesquitagydF4y2Ba
,gydF4y2Ba
拉咱Magalhaes de AraujogydF4y2Ba
,gydF4y2Ba
弗朗西斯科·德·阿西斯罗查七巧板gydF4y2Ba
和gydF4y2Ba
Maria de法蒂玛答gydF4y2Ba
*gydF4y2Ba
- 实验室的分子药理学、药学部门,学院科学健康、巴西利亚大学巴西利亚,巴西gydF4y2Ba
糖尿病gydF4y2Ba是一种代谢紊乱,影响全世界数以百万计的人,与氧化应激和炎症。(TZD)改善胰岛素敏感和葡萄糖稳态激活介导的过氧物酶体proliferator-activated受体γ(PPARγ)在2型糖尿病患者。然而,他们的使用与骨量流失等严重不良影响,保留体液,肝脏和心脏问题,并增加患膀胱癌的风险。部分PPARγ受体激动剂能促进thiazolidinediones的有利影响与不利影响更少。植物内生真菌在植物组织和有一个特别活跃的新陈代谢造成的与他们互动,导致生产天然产物的重要生物学效应可能像殖民的植物。在这里,我们确定7内生真菌分离gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba叶子的抗氧化活性。同时,提取PPAR pan-agonist展示活动之一,另一个显示活动PPARα和PPARβ/δ。更好的理解这种关系可以帮助理解的作用机制抗氧化剂治疗糖尿病及其并发症。此外,与这些功能化合物,减少氧化应激和激活受体,促进葡萄糖稳态在治疗糖尿病有前途的候选人。gydF4y2Ba
1。介绍gydF4y2Ba
糖尿病gydF4y2Ba慢性高血糖为特征的代谢障碍与干扰代谢的碳水化合物,脂类,蛋白质。它的结果缺乏胰岛素分泌、胰岛素的行动,或两者兼而有之,导致葡萄糖不可用的肌肉和脂肪组织和肝脏中糖质新生(gydF4y2Ba阿尔贝蒂Zimmet, 1998gydF4y2Ba)。慢性高血糖导致血管并发症和主要涉及患心脏病、视网膜病变、肾病、和循环问题。糖尿病的发展可能出现的自身免疫性破坏β细胞,导致胰岛素分泌不足,或其他因素会导致组织抵抗胰岛素的作用。在2型糖尿病,胰岛素分泌和行动缺乏通常出现在同一个人,高血糖的主要原因(gydF4y2BaAda 2014gydF4y2Ba)。当有临床表现,个人通常有胰岛素抵抗,胰岛素缺乏,或两者兼而有之。2型糖尿病的具体原因尚未定义;然而,大多数患者肥胖或腹部脂肪的浓度很高。肥胖会导致血浆游离脂肪酸水平持续升高的情况,导致高血糖和损害胰岛素敏感性。胰岛素分泌的海拔是维持血糖的代偿机制。然而,高胰岛素水平不允许赔偿缺乏葡萄糖吸收,导致胰岛素抵抗和糖尿病。此外,肥胖,最近体重增加,和一个的时间一直肥胖影响胰岛素抵抗的风险增加(gydF4y2Ba阿尔贝蒂Zimmet, 1998gydF4y2Ba;gydF4y2BaFelber戈利,2002gydF4y2Ba;gydF4y2BaAda 2014gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
在肥胖、体重增加能量摄入超过能量消耗时,当没有能量平衡,和多余的形式储存在脂肪组织脂肪(脂肪)。脂肪组织对代谢综合征的影响至关重要。首先视为一个储能组织,现在知道,脂肪组织中起着重要的作用作为一个内分泌器官,能够分泌分子影响瘦素和胰岛素抵抗等炎症,饮食行为和能量消耗。它可以与身体其他组织,如肌肉、肝脏、大脑的饥饿中心,在内脏和皮下存款。内脏脂肪组织的积累(增值税)的联系,以及2型糖尿病,其他疾病,比如心脏病、肾脏、肺、肝功能异常、血脂异常、高血糖。在皮下脂肪组织(坐),它与这些疾病的低风险(gydF4y2BaMajka et al ., 2011gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
慢性系统性炎症在脂肪组织直接与胰岛素抵抗和2型糖尿病的发展,功能的慢性高血糖的状态(gydF4y2Ba徐et al ., 2003gydF4y2Ba;gydF4y2BaOguntibeju 2019gydF4y2Ba)。治疗通常是与饮食、体育锻炼、和降糖药代理使用以下类的药物:gydF4y2Ba双胍类药物gydF4y2Ba,抑制肝脏葡萄糖的生产;gydF4y2BaglitazonesgydF4y2Ba通过绑定PPARγ提高胰岛素敏感性,增加脂联素信号通路;gydF4y2Ba磺酰脲类药物gydF4y2Ba和gydF4y2BaglinidesgydF4y2Ba,刺激胰岛素分泌;gydF4y2BaGLP1受体受体激动剂gydF4y2Ba模拟肠促胰岛素(glucagon-like肽1),其余分子胰岛素分泌,降低胰高血糖素分泌,促进人产生饱腹感,减少胃排空;gydF4y2BagliptinsgydF4y2Ba加强肠促胰岛素的作用,防止退化GLP1通过抑制DDP-4 (dipeptidyl肽酶4);和gydF4y2Baalpha-glucosidase抑制剂gydF4y2Ba降低葡萄糖的吸收在小肠(gydF4y2BaMarin-Penalver et al ., 2016gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
氧化和自由基是多细胞生物的自然生理过程的一部分。自由基是分子、离子或原子有一个未成对电子,增加他们与其他分子反应的能力。有一个非常脆弱的平衡自由基化合物的生产和他们的中和抗氧化化合物。不平衡被称为氧化应激发生时,通常会导致生理功能障碍(gydF4y2Ba哈利维尔,2011gydF4y2Ba)。氧化应激是存在于大多数过程参与糖尿病的发展。胰腺,增加活性氧(ROS)生产胰岛素生产β-cells可以通过几个途径,包括增加过多的葡萄糖和游离脂肪酸的浓度(gydF4y2Ba国王和Loeken, 2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba埃文斯et al ., 2005gydF4y2Ba;gydF4y2BaLupi et al ., 2007gydF4y2Ba;gydF4y2BaZunino 2009gydF4y2Ba)。监管机制在糖尿病和动脉粥样硬化的病理过程的氧化应激之间的相关性和激活过氧化物酶病扩散受体已经被证明(gydF4y2BaDevchand et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2Ba黄et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2Ba泰西耶et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2Ba江et al ., 2009gydF4y2Ba;gydF4y2Ba马丁,2010gydF4y2Ba;gydF4y2BaGuellich et al ., 2013gydF4y2Ba)。饮食中多酚类物质是最丰富的抗氧化物质,可以由植物和真菌(gydF4y2BaManach et al ., 2004gydF4y2Ba)。类黄酮多酚有多样的生理和药理活性,如雌激素、抗肿瘤、抗菌、抗过敏药、抗炎,著名的抗氧化剂和金属螯合(gydF4y2BaCotelle 2001gydF4y2Ba;gydF4y2Bareiter et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2BaDas和Rosazza, 2006gydF4y2Ba;gydF4y2BaNazari et al ., 2011gydF4y2Ba)。关于这些物质显示有益的影响gydF4y2Ba糖尿病gydF4y2Ba,在几个方面,如生化途径调节葡萄糖,葡萄糖耐量,血脂,糖原合成,葡萄糖摄取和释放胰岛素(gydF4y2Ba沃尔帕托et al ., 2008gydF4y2Ba;gydF4y2BaDa Cunha et al ., 2009gydF4y2Ba)。此外,发表的一项荟萃分析表明,膳食摄入黄酮与2型糖尿病(减少gydF4y2Ba刘et al ., 2014gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
新药物在糖尿病治疗效果更佳有利于人口众多。在这种努力,内生真菌是有前途的。他们属于几个订单的真菌微生物,殖民植物的生活和内部组织,细胞或细胞外,不同共生的关系致病性的边缘(gydF4y2BaSaikkonen et al ., 1998gydF4y2Ba;gydF4y2Ba盖洛et al ., 2007gydF4y2Ba)。这些生物通常生产各种有机化合物由于与宿主代谢互动密切,导致一个特别活跃的次生代谢(gydF4y2Ba盖洛et al ., 2007gydF4y2Ba)。在某些情况下,寄主植物和真菌可以产生相同的代谢物,如图所示的内生真菌gydF4y2BaTaxomyces andreanaegydF4y2Ba,能够产生抗癌紫杉醇(紫杉醇gydF4y2Ba®gydF4y2Ba),也由它的主人,gydF4y2Ba水松杂草gydF4y2Ba(gydF4y2BaStierle et al ., 1993gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
紫荆花gydF4y2Basp.植物被用于传统和民间医学和具有治疗糖尿病药和抗炎活动(gydF4y2Ba扎卡里亚et al ., 2007gydF4y2Ba;gydF4y2Ba角色和多布,2008年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba法兰克et al ., 2010gydF4y2Ba)。这里,我们确定了七个内生真菌分离gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba叶子和评估他们的乙酸乙酯(层)提取活动PPARα,PPARβ/δ,PPARγ受体及其抗氧化剖面。gydF4y2Ba
2。材料和方法gydF4y2Ba
2.1。内生真菌隔离和文化gydF4y2Ba
紫荆花variegatagydF4y2Ba收集树叶在巴西利亚,DF, 7月。叶子是清洁和消毒,内生真菌分离根据描述的方法gydF4y2BaLarran e同事(2007)gydF4y2Ba。分离出真菌生长在偏Sabouraud-dextrose琼脂培养基。经过五天的孵化30°C,文化被转移到500毫升玻璃瓶包含50毫升pre-fermentative中所描述的gydF4y2Ba杰克逊et al。(1993)gydF4y2Ba,在28°C的环境,在一个轨道瓶孵化器在150 rpm后48 h。这一时期,文化被包含500毫升至2000毫升瓶发酵培养基和培养了72 h,在28°C, 150 rpm的轨道搅拌。gydF4y2Ba
2.2。提取生产gydF4y2Ba
菌丝的质量是由过滤分离水下文化在真空中。文化的液体被提交给一个液液萃取用乙酸乙酯作为溶剂(3乘以体积)提取真菌代谢物。提取被蒸发然后集中在真空和溶解在1毫升的甲醇。这些提取物用于评价抗氧化活性和多酚和类黄酮含量。gydF4y2Ba
2.3。DNA的提取和放大ITS1-5 8 s-its2核糖体rna序列gydF4y2Ba
内生真菌分离gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba叶子被确定后核糖体DNA序列扩增聚合酶链反应(PCR)技术。gydF4y2Ba
真菌在酵母蛋白胨葡萄糖培养基培养,正如前面所描述的(gydF4y2Ba白色et al ., 1990gydF4y2Ba在30°C) 48小时在一个旋转瓶120 rpm。两个克培养真菌被淹没在液态氮,粉,转移到超小型电子管。与500年样本添加µL三羟甲基氨基甲烷缓冲液,包含10 mmol.L pH值8日gydF4y2Ba1gydF4y2BaEDTA和2% SDS,其次是涡流。基因组DNA被孤立的酚/氯仿法。之后,孤立的DNA是随着在去离子水和量化描述的方法gydF4y2BaSambrook et al。(1989)gydF4y2Ba。5.8 s核糖体RNA的放大部分使用的引物ITS1-ITS2保守区域和ITS3-ITS4 (gydF4y2Ba白色et al ., 1990gydF4y2Ba)。放大进行了使用一个最终解决试剂的体积50µL,包含1µL基因组DNA (500 ng), 2.5µL核苷酸(4 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),0.5µL Taq (0.5 U.µLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),5µL三羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液(100 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2BapH值8.0),2µL 50 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2BaMgClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,每个通用引物1µL ITS1-ITS2或ITS3-ITS4 (21 pmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),39µL的去离子水。Thermocycler与初始编程DNA变性周期在94°C 2分钟,其次是骑自行车在94°C 1分钟,1分钟54°C, 1分钟72°C,结束在72°C的最后一步10分钟(gydF4y2Ba吉马良斯et al ., 2008gydF4y2Ba)。使用QIAquick PCR产品纯化gydF4y2Ba®gydF4y2BaPCR净化设备,及其序列分析Macrogen inc .)在韩国。基因组DNA或PCR扩增产品在1%琼脂糖电泳分析确定链大小(gydF4y2Ba穆勒et al ., 1992gydF4y2Ba),使用1 kb + DNA梯(Thecnologies生活gydF4y2Ba®gydF4y2Ba)作为标记。gydF4y2Ba
2.4。系统发育分析gydF4y2Ba
PCR扩增子序列编辑BioEdit相比,gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba爆炸,序列存入基因库的NCBI数据库(国家生物技术信息中心)。获得的序列和选择从基因库(NCBI)提交给多个比对使用大型11.0.13 Clustal-W工具软件。neighbor-joining方法分析了分组的相似之处与1000年引导重复构建系统发育树(gydF4y2Ba田村et al ., 2021gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.5。总多酚含量的测定gydF4y2Ba
总多酚被描述的方法量化gydF4y2BaKumazawa et al。(2002)gydF4y2Ba与一些细微的修改。,每个提取物添加到250年76.8µgµL 10%的碳酸钠和250µL Folin-Ciocalteu 1 n。最后反应溶液体积完成2.5毫升蒸馏水,和解决方案是漩涡。酚类与Folin-Ciocalteu试剂生产蓝灰色复杂反应。60分钟后,吸光度测定的分光光度计在760海里。没食子酸作为标准,结果表示为没食子酸提取质量(EAG.mg等价物gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.6。总类黄酮含量的测定gydF4y2Ba
总类黄酮含量的测定是根据描述的方法进行gydF4y2BaChang et al。(2002)gydF4y2Ba基础上,形成一个耐酸作用黄色氯化铝和黄酮/之间复杂的类黄酮。总之,125µL 5%氯化铝在甲醇溶液添加到20µL的样本。最后成交调整到2.5毫升甲醇和漩涡。30分钟后,吸光度测定的分光光度计在425海里。槲皮素作为标准,结果表示为槲皮素提取物的质量(EQ.mg等价物gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.7。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba抗氧化活性测定gydF4y2Ba
2.7.1。DPPH·化验gydF4y2Ba
真菌提取物的抗氧化活性测定采用DPPH·(2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)测定,所描述的gydF4y2Ba布洛瓦(1958)gydF4y2Ba。消极的控制是通过更换样品具有相同体积的甲醇反应的解决方案。抗氧化活性,由测量DPPH·的比例减少,考虑到负面的吸光度控制为100%,据估计基于下面的公式:gydF4y2Ba
地点:gydF4y2Ba
AA:抗氧化活性(%)gydF4y2Ba
腹肌gydF4y2Ba控制gydF4y2Ba:吸光度的负面控制在517海里。gydF4y2Ba
腹肌gydF4y2Ba样本gydF4y2Ba:样品的吸光度517海里。gydF4y2Ba
抗氧化活性的百分比是评估通过比较不同浓度的提取的结果绘制在图形和计算ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba(提取浓度减少50%的氧化DPPH·) (gydF4y2BaDinis et al ., 1994gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.7.2。评估的提取物抑制脂质过氧化的能力gydF4y2Ba
评估的能力提取抑制脂质过氧化,描述的方法gydF4y2BaLingnert et al。(1979)gydF4y2Ba使用一些修改。简单地说,亚油酸是乳化同样体积的渐变®20 0.1磷酸盐缓冲剂,pH值7.0。2毫升的亚油酸/缓冲乳液,100µL样本补充道,和反应的解决方案是孵化8小时37°C,隐藏的光。然后,100这个反应的解决方案是可溶性的µL 1毫升的甲醇和添加3毫升的60%甲醇溶液中,搅拌。吸光度是确定在234 nm分光光度计(日本岛津公司UV / VIS - 1800)模型。gydF4y2Ba
2.7.3。超氧化物阴离子自由基清除活性gydF4y2Ba
超氧化物阴离子自由基(gydF4y2Ba)清除活动通过提取测定测定抑制的电视台(硝基蓝四唑)减少。黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统被用作超氧化物阴离子自由基源。反应是由分光光度法监测在560 nm 10分钟,修改描述的方法gydF4y2Ba罗贝克和Gryglewski (1988)gydF4y2Ba。结果表示为样本浓度(mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)能够抑制50%的电视台所获取的氧化速率控制反应的解决方案(ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.8。细胞培养gydF4y2Ba
报告基因分析,人类系膜细胞捐赠的肾脏学的学科葡方保利斯塔人药物,圣保罗大学联邦德(UNIFESP)。细胞培养根据基耶利尼和合作者(描述的方法gydF4y2Ba基耶利尼et al ., 1998gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
这些细胞生长在杜尔贝科的修改鹰介质(DMEM),含10%胎牛血清,2 nmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba谷氨酰胺,50 IU.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba青霉素,55 IU.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba链霉素,保存在148厘米gydF4y2Ba2gydF4y2Ba康宁gydF4y2Ba®gydF4y2Ba盘子在孵化器37°C公司为5%gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
2.9。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba评价提取物对系膜细胞的细胞毒性gydF4y2Ba
细胞生存能力和细胞毒性的提取测定根据3 - (4 5-dimethylthiazol-2 - yl) 2, 5-diphenyl-tetrazolium (MTT)方法。四唑环出现在yellowish-colored MTT溴盐是由可行的脱氢酶存在于线粒体的细胞裂解,形成蓝色(gydF4y2BaMosmann 1983gydF4y2Ba)。因此,认为可行的细胞的数量成正比的甲瓒晶体形成。化验,盘子被播种就有30500人类系膜细胞在DMEM培养基,除了用作反应空白,只含有培养基。最后成交100µL反应。24小时后37°C和5%的孵化有限公司gydF4y2Ba2,gydF4y2Ba10µL MTT [5 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba在磷酸盐(PBS)添加到所有井的盘子,他们孵化了4小时,在37°C和5%的公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。解散的甲瓒盐培养基从井中删除,和100µL MTT (0.04 mol.L开发解决方案gydF4y2Ba1gydF4y2Ba盐酸异丙醇)是补充道。板块是在室温下搅拌15分钟,在570 nm和吸光度测量板阅读器(贝克曼库尔特DTX 800)。比较结果的解释是由吸光度值获得细胞治疗中提取并获得控制。gydF4y2Ba
2.10。PPAR激动剂受体活动——报告基因分析gydF4y2Ba
报告基因分析采用瞬时转染是用于研究和核受体配体的识别(PPARαPPARβ/δ,PPARγ)。这个试验包括电穿孔转染的表达式和记者质粒人类系膜细胞的细胞核内,随后治疗的细胞与一个已知的配体(积极控制)或下的提取研究。受体激动剂存在的物质,记者(荧光素酶)的基因转录增加,充当受体的转录活动的一项指标。gydF4y2Ba
转染分析,离心收集细胞的760.1 xgydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟和resuspended PBS溶液中含有0.1%的葡萄糖和0.1%的氯化钙获得包含3 x10悬挂gydF4y2Ba7gydF4y2Bacells.mLgydF4y2Ba1。gydF4y2Ba这个解决方案的每个500µL resuspended细胞,1.5μg PPARα,PPARβ/δ,或者PPARγPPAR响应元素的表达载体和3μg (PPRE)记者质粒向量被添加。细胞转移到试管和受电穿孔使用Bio-Rad 350 mV和700 FgydF4y2Ba®gydF4y2Ba基因脉冲发生器II脉冲发生器。电穿孔后,细胞都被转移到培养基,分布在12-well康宁gydF4y2Ba®gydF4y2Ba盘子(1毫升/)和处理工具,积极控制,或不同浓度的提取细胞毒性试验的基础上。gydF4y2Ba
24小时后37°C和5%的孵化有限公司gydF4y2Ba2,gydF4y2Ba细胞被离心分离为760.1 xgydF4y2BaggydF4y2Ba和细胞溶解1 x (Promega裂解缓冲gydF4y2Ba®gydF4y2Ba)。确定荧光素酶活性,20μL荧光素(Kit Promega集团gydF4y2Ba®gydF4y2Ba)被添加到20μL细胞溶解产物。酶反应所产生的光发射荧光素和荧光素酶之间量化在光度计GloMaxgydF4y2Ba®gydF4y2Ba20/20,表达的结果是相对光单位。所有化验进行了一式三份(gydF4y2Ba里贝罗et al ., 2001gydF4y2Ba)。数据被表示为平均转录激活率车辆(DMSO:甲醇,1:3)至少四个不同的实验。罗格列酮10gydF4y2Ba5gydF4y2Bamol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba是用作化验使用PPARγ,积极控制和苯扎贝特的浓度3 x10gydF4y2Ba4gydF4y2Bamol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba被用作化验进行积极的控制PPARα和PPARβ/δ。获得的结果提交给方差分析(ANOVA)其次是Newman-Keuls多重比较检验。gydF4y2Ba
2.11。脂肪细胞的分化分析gydF4y2Ba
由真菌产生的评估是否提取BvFII BvFVII能够促进PPARγ-dependent 3 t3-l1 preadipocyte分化以及他们是否干扰PPARγ激活或分化促进脂质积累在细胞分化后,小鼠胚胎成纤维细胞在DMEM培养基培养(NIH 3 t3-l1)补充10%胎牛血清,2 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba谷氨酰胺,50 IU.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba青霉素和50 IU.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba链霉素和孵化36°C和5%的公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。后的第二天汇合的增长,细胞诱导分化治疗与DMEM补充10%新生儿牛血清,1μg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba美国圣路易斯胰岛素(σ),0.5 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba美国圣路易斯3-Isobutyl-1-methylxanthine(σ)和1 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba美国圣路易斯地塞米松(σ)两天。这段时间后,细胞治疗DMEM补充新生牛血清和1μg.mL为10%gydF4y2Ba1gydF4y2Ba胰岛素和孵化37°C和5%的公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba一个额外的2天。之后,这些细胞被维护在培养与10%胎牛血清的DMEM补充。两天的潜伏期后,细胞被沾油红O所描述的gydF4y2BaJanderova et al。(2003)gydF4y2Ba,观察分化。车,10gydF4y2Ba5gydF4y2BaM罗格列酮、真菌BvFII提取或真菌BvFVII提取被添加到培养基中分化诱导期观察细胞分化过程中的干扰。gydF4y2Ba
2.11.1。从细胞总RNA的提取gydF4y2Ba
治疗后脂肪细胞的分化,细胞总RNA的提取使用试剂盒试剂gydF4y2Ba®gydF4y2Ba根据制造商的协议表达载体™(美国CA)。gydF4y2Ba
2.11.2。定量评价RT-qPCR FABP4基因编码的表达gydF4y2Ba
从脂肪细胞提取的RNA样品文化进行评估的定量测定脂肪细胞的基因编码蛋白的表达脂肪酸结合蛋白4 (FABP4)。FABP4受PPARγ,必需脂肪酸在脂肪细胞吸收,运输和代谢。化验,逆转录和定量PCR扩增(RT-qPCR)在单步执行使用SYBR的力量gydF4y2Ba®gydF4y2Ba绿色RNA CT互译工具包(美国应用生物系统公司,培育城市,CA),遵循制造商的指示。每个样本的放大产品由SYBR决定gydF4y2Ba®gydF4y2Ba绿色系统。反应是准备在96 -孔板(微安光学、应用生物系统公司)10μL最后一卷,包含0.08μL RT酶混合(125 x), 5μL SYBRgydF4y2Ba®gydF4y2Ba绿色rt - pcr的力量组合(2 x), 0.2μL (100 nmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),每个引物(aP2 -转发:CCATCTAGGGTTATGCTCTTCA和反向:ACACCGAGATTTCCTTCAAACTG;和18 s -转发:CGGACAGGATTGAGAGATTG和扭转:CAAATCGCTGCACCAACTAA)获得的初始浓度5μmol, LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba1到5,ng的RNA样品。所有RT-qPCR实验的反应条件是相同的:30分钟48°C进行逆转录反应;10分钟在95°C DNA聚合酶的激活;40 15秒的周期在95°C变性;1分钟60°C退火和延伸StepOnePlusTMReal-Time PCR系统(应用生物系统公司)和获得的数据进行了分析与软件StepOne v2.1 (gydF4y2Ba参赛et al ., 2009gydF4y2Ba)。的相对量化的表达基因编码aP2使用方程2执行gydF4y2Ba-ΔΔCt,gydF4y2BaΔΔCt代表ΔCt区别在哪里gydF4y2Ba样本gydF4y2Ba和ΔCtgydF4y2Ba控制,gydF4y2Ba和ΔCt样本或控制的表达基因编码的区别Cq aP2 (FABP4)和参考基因(18岁)获得的样本。统计测试应用方差分析(ANOVA)其次是Bonferroni测试。gydF4y2Ba
14。免疫印迹分析gydF4y2Ba
分化3 t3-l1细胞收获的文化板块,resuspended在0.01 M磷酸盐缓冲剂,pH值7.4,含0.9%氯化钠(PBS)和离心机在4°C 760.1 xg 5分钟。颗粒均质在裂解缓冲(50 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba三羟甲基氨基甲烷缓冲液pH值7.5和150 M氯化钠,特里同x - 100和1%稀释蛋白酶抑制剂鸡尾酒(西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国)。1:200],慢慢搅拌一个小时在4°C。总蛋白浓度是由布拉德福德(Bio-Rad蛋白质测定方法gydF4y2Ba®gydF4y2Ba)。评估aP2 (FABP4)蛋白表达,12.5µg整除的蛋白质sds - page分离,在半干转移到PVDF膜增值税(Bio-Rad、钙、美国),孵化与抗体,然后immunodetected化学发光(ECL '设备,通用电气医疗集团,白金汉郡,英国)。膜是孵化一夜之间在4°C anti-aP2多克隆抗体(美国剑桥195657年,Abcam)和多克隆抗体anti-GAPDH(美国剑桥9483年,Abcam)稀释在水里含有7%的奶粉。应用可视化使用二次抗体结合抗体过氧化物酶IgG-horseradish过氧化物酶共轭合(sc - 2354,圣克鲁斯、钙、美国),在水中稀释1:7000包含7%的奶粉。使用的默认标记是基准™pre-stained蛋白质梯(生活技术,大岛屿,美国)根据描述的方法gydF4y2BaBurnette (1981)gydF4y2Ba。乐队的量化与ImageJ程序执行版本1.46 r(美国马里兰州贝塞斯达国家健康研究所)和表达为任意单位(UA / GAPDH)。gydF4y2Ba
2.12。PPARγ核受体保护试验对蛋白酶消化gydF4y2Ba
配体结合域(小黑裙)人类PPARγ表达细菌(gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba、应变BL21)作为polyhistidine-tagged重组蛋白(His-LBD-PPARγ)和钴亲和色谱法纯化。重组蛋白与罗格列酮孵化,提取由真菌BvFII,提取由真菌BvFVII或车辆二甲亚砜(DMSO) (0.01 mol.L PBS缓冲gydF4y2Ba1gydF4y2Ba在室温下,pH值7.4)30分钟。然后,它是用蒸馏水或孵化胰蛋白酶(100、250、或350μg.mL的解决方案gydF4y2Ba1gydF4y2Ba60分钟),在室温下也。消化反应是通过添加变性样品缓冲(100 mmol.L停止gydF4y2Ba1gydF4y2Ba三羟甲基氨基甲烷缓冲液,pH值6.8,β-mercaptoethanol含2%,4% SDS, 4 mmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2BaEDTA、20%甘油和溴酚蓝在95°C)和加热10分钟。的小黑裙蛋白水解模式分析的蛋白质就在变性条件下12.5%的聚丙烯酰胺凝胶电泳(gydF4y2BaLaemmli 1970gydF4y2Ba),其次是染色的凝胶protein-dye Coomassie蓝色(gydF4y2Ba艾伦et al ., 1992gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.13。评价抑制胰蛋白酶提取蛋白水解活性的真菌BvFII和BvFVIIgydF4y2Ba
评估的能力,抑制胰蛋白酶对明胶提取的蛋白水解活性的真菌BvFII BvFVII,包含0.25%的聚丙烯酰胺凝胶(12.5%)明胶制备。然后,100µL反应介质10µL胰蛋白酶(200µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)80年µL PBS缓冲(0.01 mol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba、pH值7.4)和10µL车辆(DMSO),真菌BvFII提取(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),或真菌BvFVII提取(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba在室温下)孵化1 h。潜伏期后,20µL每个样品浸泡在6毫米直径滤纸光盘沉积在凝胶在室温下和孵化为60分钟。蛋白水解模式测定凝胶染色强度的差异由Coomassie蓝色。脱色后的凝胶,乐队的强度测量使用图像J程序,版本1.46 r(美国国家卫生研究院,马里兰州贝塞斯达),表示为一个关于胰蛋白酶活性的抑制率(gydF4y2Ba蒋介石et al ., 2012gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
2.14。统计分析gydF4y2Ba
所有的实验都是在至少三个不同的设置,和数据被表示为平均值±标准偏差(SD)的至少三个测量。集成电路gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值计算使用Graphpad棱镜gydF4y2Ba®gydF4y2Ba9.0.0版本。在实验中获得的数据进行了分析通过单向方差分析(方差分析)测试Bonferroni紧随其后的多重比较测试。所有使用软件Graphpad棱镜进行了统计检验gydF4y2Ba®gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
3所示。结果gydF4y2Ba
3.1。水下文化真菌和提取获得gydF4y2Ba
提取生产的质量是决定,收益率计算流体体积的文化中提取和菌丝体的大规模生产。真菌BvFI产生的菌丝量最高的质量(湿重62.19克)和BvFII最低数量的菌丝体的质量(湿重6.32克)浸没液体培养。然而,更高收益率的代谢物提取获得文化的真菌BvFII和BVFIX产生35.2毫克和89.5毫克的提取,分别。gydF4y2Ba
3.2。真菌的分子鉴定gydF4y2Ba
3.2.1之上。核糖体RNA基因的保守区域(其内部转录间隔区)真菌基因组DNA的放大gydF4y2Ba
核糖体RNA基因的保守区域(其内部转录间隔区)真菌基因组DNA被放大的分子识别。聚合酶链反应扩增产物测序,序列数据相比,从物种基因库中描述(国家健康研究所)。gydF4y2Ba
执行的一致性在基因库中使用先进的爆炸工具显示身份98%以上所有分析执行。的gydF4y2Ba创造价值gydF4y2Ba(gydF4y2Ba期望值gydF4y2Ba偶然)发生的概率是一个对齐和计算基于对齐的质量。越低gydF4y2Ba创造价值gydF4y2Ba越高,执行的一致性的质量。gydF4y2Ba
如结果所示,真菌BvFII BvFVII BvFIX属于同一属,gydF4y2BaPhomopsisgydF4y2Basp,但菌株是分开保存,因为他们之间的分歧。真菌BvFI显示最高的94.20%gydF4y2Ba刺盘孢属gydF4y2Basp.对齐的。真菌BvFV, 100%的身份,为特征gydF4y2Ba刺盘孢属gydF4y2Basp。真菌BvFIII获得更大的身份的真菌gydF4y2BaPhoma spgydF4y2Ba家庭,最高99.64%的身份。真菌BvFVIII最大100%的身份gydF4y2BaPestalotiopsis mangiferaegydF4y2Ba。neighbor-joining方法分析了分组的相似之处与1000年引导重复构建系统发育树(gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
图1gydF4y2Ba系统发育树构建的PCR扩增子its1 - 5.8 - s - its2 rDNA内生真菌的遗传相似性与数据获取与数据从基因库(NCBI)。系统树构建的基础上的相似性PCR扩增子的内部转录间隔区1和2 rDNA地区和序列中发现基因库(NCBI),分析了分组neighbor-joining方法,与1000重复引导。数量的影响提出了引导价值(gydF4y2BaFelsenstein, 1985gydF4y2Ba)。分析涉及31 FASTA序列。gydF4y2Ba根霉oryzaegydF4y2Ba用于系统发育树的根。所有职位包含漏洞和缺失的数据都消除了。在MEGA11进化进行了分析(gydF4y2Ba田村et al ., 2021gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
3.3。多酚和类黄酮含量gydF4y2Ba
获得了多酚和类黄酮提取物进行分析来确定内容使用,分别Folin-Ciocalteu和氯化铝的方法,如前所述。校准曲线建立了以没食子酸和槲皮素为标准。结果所示gydF4y2Ba图2一个gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
图2gydF4y2Ba茶多酚和黄酮类物质含量和抗氧化效果。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba多酚和类黄酮含量的提取产生的内生真菌分离gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba叶子。gydF4y2Ba(B)gydF4y2BaHydrogen-donating能力的真菌提取物(BvFI、BvFII BvFIII, BvFV, BvFVII, BvFVIII,和BvFIX)被DPPH·法评估。提取物的浓度范围在0.036到150.6µg.mL反应介质gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。标准化合物,抗坏血酸、二叔丁基对甲酚和槲皮素浓度在反应中也使用同样的浓度。gydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba抑制脂质过氧化的能力评价真菌的提取物。亚油酸聚山梨醇酯20的乳液的存在和缺乏提取(150µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和标准抗氧化活性(生育酚(125µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和二叔丁基对甲酚(125µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)]。gydF4y2Ba(D)gydF4y2Ba内生真菌提取物清除超氧化物阴离子自由基的能力。提取的能力在清除超氧化物阴离子自由基是评估使用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统的过氧化物。gydF4y2Ba生产减少电视台在560 nm甲瓒被分光光度法。抗氧化剂清除超氧化物阴离子自由基,降低电视台的减少,因此,甲瓒生产。结果表示为抑制脂质过氧化过程,的百分比的平均值±标准偏差三个不同的化验。统计测试应用方差分析(ANOVA)其次是Newman-Keuls多重比较检验,* * *,明显不同,p < 0.0001与所有化合物。gydF4y2Ba
3.4。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba抗氧化活性测定gydF4y2Ba
3.4.1。DPPH·化验gydF4y2Ba
提取物的抗氧化活性是评价DPPH·法和与公认的抗氧化活性的化合物相比,抗坏血酸,Butylhydroxytoluene(二叔丁基对甲酚)和槲皮素。研究结果发表在gydF4y2Ba图2 bgydF4y2Ba。提取的真菌BvFIII BvFV、BvFIX和BvFII DPPH·清除活性越高,降低集成电路gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值在新月秩序。的集成电路gydF4y2Ba50gydF4y2Ba真菌的代谢产物BvFIII之间发现了标准的抗氧化剂作为控制,表现出较高的抗氧化活动。gydF4y2Ba
3.4.2。脂质过氧化抑制试验gydF4y2Ba
亚油酸是一种多不饱和脂肪酸所需生产花生四烯酸。它存在于细胞膜的磷脂和参与脂质第二信使信号。脂质都是PPAR配体(gydF4y2Ba福尔曼et al ., 1997gydF4y2Ba)。评估内生真菌提取物对脂质过氧化的影响,亚油酸(5 mmol.L乳剂gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),聚山梨醇酯20(渐变gydF4y2Ba®gydF4y2Ba20)在盐水磷酸盐缓冲剂(0.1 mol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba和pH值7.0)孵化8小时37°C萃取物的存在与否和积极控制生育酚和二叔丁基对甲酚。这样,亚油酸发生自动氧化,其产品可以通过分光光度法测定吸光度的234海里。这个测试所示的结果gydF4y2Ba图2 cgydF4y2Ba。除了由真菌BvFIII提取,提取物能够抑制脂质过氧化作用。最弱的提取效果观察真菌BvFI,抑制脂质过氧化作用为38%。最高的提取效果观察真菌BvFV,抑制56.1%的氧化过程。二叔丁基对甲酚和α-tocopherol作为积极抑制脂质过氧化作用控制了89.9%和66.6%,分别。提取的真菌BvFII BvFVII、BvFVIII BvFXI百分比48.8%的脂质过氧化反应,54.6%,45.9%,和53.2%,分别。结果还表明,真菌BvFIII提取脂质过氧化作用提高了2倍半以上(-262.4%)。gydF4y2Ba
3.4.3。封存的超氧化物自由基阴离子(gydF4y2Ba)gydF4y2Ba
提取的能力在清除超氧化物阴离子自由基是评估使用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(gydF4y2Ba可观的Gryglewski, 1988gydF4y2Ba)系统的源产生的超氧化物自由基负离子(O2 -∙)减少电视台在560 nm甲瓒被分光光度法。抗氧化剂清除超氧化物阴离子自由基,降低电视台的减少,因此,甲瓒生产。内生真菌中提取回收超氧化物阴离子自由基(gydF4y2Ba图2 dgydF4y2Ba)。提取真菌BvFVII (ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.80 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),真菌BvFVIII (ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.147 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和BvFV (ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.083 mg.mlgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)在清除超氧化物显示能力最低。提取真菌BvFI (ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.208 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和BvFIX (ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.199 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)提出了类似的活动和提取真菌BvFII BvFIII, ICgydF4y2Ba50gydF4y2Ba0.147 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba和0.083 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba分别是提取物清除超氧化物阴离子自由基能力最高。gydF4y2Ba
3.5。脂肪细胞的分化分析gydF4y2Ba
我们可以看到gydF4y2Ba图3一gydF4y2Ba小鼠胚胎成纤维细胞(NIH 3 t3l1)显示,不同模式的分化后油红O染色。细胞用罗格列酮治疗(10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba米)显示最脂质积累。真菌BvFII提取、20µg.mL浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,也刺激这些细胞的分化程度略高于,提出的车辆和低于罗格列酮引起的。在25µg.mL的浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba的提取、染色的细胞没有明显变化的控制。真菌BvFVII提取并没有促进细胞分化与车辆。gydF4y2Ba
图3gydF4y2Ba提取BvFII 3 t3-l1和BvFVII不促进脂肪生成。细胞诱导分化与胰岛素和暴露于车辆(DMSO) Rosi 10gydF4y2Ba5gydF4y2Bamol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba、提取BvFII 20或25µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba和提取BvFVIIµg.mL 3.4或7.8gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba14天之后,这些细胞被固定的,沾油红O,照片记录。gydF4y2Ba(B, C)gydF4y2Ba人类系膜细胞与表达向量co-transfected PPARα或PPARγ,包含荧光素酶报告基因的质粒和处理车辆(DMSO:甲醇,1:3),苯扎贝特3.10gydF4y2Ba4gydF4y2Bamol.LgydF4y2Ba1gydF4y2BaPPARα、β和罗格列酮10gydF4y2Ba5gydF4y2BaPPARγM(积极控制)或真菌BvFII提取物浓度的增加gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba和BvFVIIgydF4y2Ba(C)gydF4y2Ba。gydF4y2Ba(D)gydF4y2Ba实时定量PCR对表达式求值的Fabp4 (aP2)后8天的分化。gydF4y2Ba(E)gydF4y2Ba免疫印迹评估FABP4的表达(aP2)蛋白质经过14天的分化。数据作为三个独立实验的平均(SD)一式三份,并表示在车辆样本相对于转录激活水平(DMSO)。* p≤0.05;* * p≤0.001。gydF4y2Ba
3.6。评价PPAR激动剂活性的真菌提取物的α,β和γ报告基因分析gydF4y2Ba
培养提取物被提交给PPARα受体激动剂的评价能力,PPARβ,PPARγ使用基因记者化验和治疗使用MTT试验获得的浓度。coactivation获得的结果所示gydF4y2Ba图3 b, CgydF4y2Ba。真菌的提取BvFII能够激活所有PPAR亚型,这激活是类似于积极控制µg.mL 20.16的浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba(gydF4y2Ba图3 bgydF4y2Ba)。真菌BvFVII还显示受体激动剂活性的提取,但只有在PPARα和PPARβ受体(gydF4y2Ba图3 cgydF4y2Ba)。其他提取并没有表现出任何激活(数据未显示)。gydF4y2Ba
3.7。评价脂肪细胞的相对基因表达蛋白2 (aP2或FABP4)定量PCRgydF4y2Ba
3 t3-l1细胞分化为8天完全培养基和处理车辆(DMSO),罗格列酮(10gydF4y2Ba5gydF4y2Bamol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),真菌BvFII提取(20或25µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),或真菌BvFVIIµg.mL提取(3.4或7.2gydF4y2Ba1gydF4y2Ba在分化)。ap2蛋白基因表达的差异(FABP4)之间并没有显著的车辆(DMSO)和真菌提取物。只有一个显著差异蛋白表达在细胞间用罗格列酮治疗和其他治疗(gydF4y2Ba图3 dgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
3.7.1。西方墨点法gydF4y2Ba
评估提取的影响产生的真菌BvFII和BVFVII aP2分化3的表达t3-l1细胞,细胞的总蛋白提取、量化和分析gydF4y2Ba免疫印迹分析gydF4y2Ba(gydF4y2Ba图3 egydF4y2Ba)。20µg.mL的浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba提取的真菌µg.mL BvFII和3.4gydF4y2Ba1gydF4y2Ba提取的真菌BvFVII选择评估aP2蛋白的表达,因为他们表现出最高的激活在PPARγ报告基因试验(gydF4y2Ba图3 b, CgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
3.8。蛋白酶消化保护试验gydF4y2Ba
绑定的小黑裙的核受体受体激动剂的确定构象变化的关键转录激活这些受体(gydF4y2Ba艾伦et al ., 1992gydF4y2Ba)。这些变化反映在改性蛋白水解的可访问性网站表面的受体,因此,在受体增加阻力的小黑裙在蛋白酶消化。因此,蛋白酶消化保护试验的仪器用于研究PPARγ构象改变配体的存在。从获得的结果,所示gydF4y2Ba图4一gydF4y2Ba,可以观察到有更大的保护免受胰蛋白酶消化产生的两个样品的提取处理真菌BvFII对于那些治疗真菌的提取BvFVII与罗格列酮治疗相比,即使是350µg.mL的胰岛素剂量gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
图4gydF4y2Ba小黑裙的蛋白水解作用模式PPARγ胰蛋白酶与不同的配体治疗后。gydF4y2Ba(一)gydF4y2Ba胰蛋白酶活动PPARγ小黑裙被使用重组蛋白his-LBD-hPPARγ评估,这是孵化与车辆(DMSO), 10µmol.LgydF4y2Ba1gydF4y2Ba罗格列酮、真菌BvFII提取或真菌BvFVII提取和胰蛋白酶(0、100、250和350μg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba60分钟)。小黑裙的蛋白水解模式PPARγ被变性条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其次是染色的凝胶Coomassie蓝色。gydF4y2Ba(B)gydF4y2Ba胰蛋白酶的蛋白水解活性明胶后评估孵化酶的车辆(DMSO)或真菌的提取物BvFII(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)或真菌BvFVII(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。聚丙烯酰胺凝胶0.25%明胶被接触滤纸片浸泡在20µL胰蛋白酶溶液(200µg.mLgydF4y2Ba1)gydF4y2Ba1 h。蛋白水解模式分析染色的凝胶Coomassie蓝色。黑暗区域显示退化的明胶。抑制率的量化工具和提取BvFII BvFVII显示在右边。给出的数据代表的均值±标准差的意思。统计测试应用方差分析(ANOVA)其次是Newman-Keuls多重比较检验,没有统计上的显著差异。gydF4y2Ba
3.9。评价抑制胰蛋白酶提取蛋白水解活性的真菌BvFII和BvFVIIgydF4y2Ba
样品的提取真菌BvFII或真菌BvFVII孵化与胰蛋白酶在PBS缓冲来评估是否提取干扰蛋白水解酶的活性。胰蛋白酶在聚丙烯酰胺凝胶含有明胶蛋白水解活性评估(gydF4y2Ba图4 bgydF4y2Ba)。作为一个消极的控制,胰蛋白酶和DMSO孵化。研究结果表明,提取物真菌BvFII(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)或真菌BvFVII(400µg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)不干扰蛋白水解明胶胰蛋白酶的活性。gydF4y2Ba
4所示。讨论gydF4y2Ba
塞拉多的微生物群的潜在的药物生物群系的深入探讨,和众多的研究表明,真菌,特别是内生真菌,成为一个新的视角源生物活性的天然产物(gydF4y2BaStrobel et al ., 2004gydF4y2Ba;gydF4y2BaZhang et al ., 2006gydF4y2Ba;gydF4y2Ba阿诺德,2007gydF4y2Ba;gydF4y2Ba罗德里格斯et al ., 2009gydF4y2Ba;gydF4y2Ba周et al ., 2010gydF4y2Ba;gydF4y2Ba布莱克威尔,2011gydF4y2Ba;gydF4y2Ba萨和Raizada, 2013gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
紫荆花variegatagydF4y2Ba是植物适应塞拉多,产生的酚类化合物,如单宁和类黄酮(gydF4y2BaDuarte et al ., 2007gydF4y2Ba),有抗炎(gydF4y2Ba穆罕默德et al ., 2009gydF4y2Ba),王亚南活动(gydF4y2Ba2007年Bodakhe和RamgydF4y2Ba)、抗高血糖药(gydF4y2Ba代理et al ., 2006gydF4y2Ba;gydF4y2BaKumar et al ., 2012gydF4y2Ba;gydF4y2BaKulkarni Garud, 2015gydF4y2Ba)除了激活PPARγ(gydF4y2Ba席尔瓦,2014gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
出版后的工作描述能力的内生真菌产生相同的活性代谢物作为其寄主植物(gydF4y2BaStierle et al ., 1993gydF4y2Ba),前景被打开了,天然产物中发现药用植物内生真菌产生的可能,殖民(gydF4y2Ba纽曼和克拉格,2015年gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
从这个意义上说,通过与血糖过低的物质生产活动(gydF4y2Ba代理et al ., 2006gydF4y2Ba;gydF4y2Ba法兰克et al ., 2010gydF4y2Ba;gydF4y2BaKumar et al ., 2012gydF4y2Ba;gydF4y2BaKulkarni Garud, 2015gydF4y2Ba)和物质激活PPARγ(gydF4y2Ba哥,2005gydF4y2Ba;gydF4y2Ba席尔瓦,2014gydF4y2Ba),gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba被选为内生真菌,殖民的隔离,评估这些真菌产生代谢产物的能力,可以激活PPAR(/δα,β,γ)和抗氧化活性,寻找新的生物活性化合物,可用于糖尿病的治疗。gydF4y2Ba
三个孤立的内生真菌,BvFII BvFVII、和BvFIX确认为真菌属gydF4y2BaPhomopsisgydF4y2Ba(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。此属对应的无性(鉴定)形式子囊菌gydF4y2BaDiaporthegydF4y2Ba,包括900多种真菌,和特点是次生代谢产物的主要生产商,包括治疗糖尿病药、抗炎和抗氧化化合物(gydF4y2Ba徐et al ., 2021gydF4y2Ba)。真菌BvFI BvFV显示更高的相似性gydF4y2Ba刺盘孢属gydF4y2Basp.爆炸分析。gydF4y2BaTianpanich et al。(2011)gydF4y2Ba孤立的六个物质的抗氧化活性gydF4y2Ba刺盘孢属gydF4y2Basp.被认为是五,异香豆素衍生物和苯酞,其中四个显示细胞毒性的活动。在另一个工作,gydF4y2Ba李et al。(2022)gydF4y2Ba证明二萜内酯所得gydF4y2Ba刺盘孢属gydF4y2Basp.显示强大的抗菌和抗氧化活性。真菌BvFI是相关的gydF4y2BaGuignardiagydF4y2Ba(同义词:gydF4y2BaPhyllosticta)gydF4y2Ba(gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba),一个内寄生的/植物病原真菌。属的一些种类gydF4y2BaGuignardiagydF4y2Ba,如gydF4y2BaGuignardia citricarpagydF4y2Ba和gydF4y2BaGuignardia psidiigydF4y2Ba导致疾病,如柑橘黑点和番石榴果实腐烂。其他物种gydF4y2BaGuignardia mangiferaegydF4y2Ba,gydF4y2Bap . capitalensisgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . citribraziliensisgydF4y2Ba被认为是内寄生的从植物中提取的,因为他们没有感染的迹象。gydF4y2BaGuignardia mangiferaegydF4y2Ba是一个重要的生产生物活性物质,如萜烯(gydF4y2Ba元et al ., 2010gydF4y2Ba)和乙酰胆碱酯酶抑制剂。真菌BvFIII为特征gydF4y2BaPhomagydF4y2Basp。这属被认为是一个重要的植物病原体,也是海洋环境中;它产生数以百计的次生代谢物已经描述(gydF4y2BaRai et al ., 2018gydF4y2Ba),其中物质与抗真菌和对肿瘤细胞株的细胞毒性行动已经被描述(gydF4y2Ba李et al ., 2005gydF4y2Ba;gydF4y2Ba王et al ., 2012gydF4y2Ba)。这些以前作品的结果证实了这项工作,这显示这些真菌的代谢产物的抗氧化活性隔绝gydF4y2Bab . variegatagydF4y2Ba(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
表1gydF4y2Ba分离的内生真菌菌株gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba。gydF4y2Ba
口服降糖药thiazolidinediones有利于胰岛素敏感由PPARγ激活。他们一直用于治疗2型糖尿病,但一些严重的副作用,如骨质密度,保留体液,troglitazone-related肝病,心脏病与罗格列酮消费(gydF4y2Ba辛格et al ., 2007gydF4y2Ba)。然而,PPARγ配体仍然是一个有效的选择治疗2型糖尿病。他们可以提高胰岛素敏感性的所有组织生产在外围组织葡萄糖摄取增加。部分受体激动剂可能有更多的积极影响PPARγ配体在糖尿病通过减少副作用造成的不必要的转录的激活,支持绑定的完整的受体激动剂,并通过防止Cdk5-mediated PPARγ磷酸化,改善胰岛素敏感性。兵也可以使磷酸化丝氨酸273 Cdk5 PPARγ,可以压制的gydF4y2Ba通过gydF4y2BaMEK激活(gydF4y2Ba银行et al ., 2015年gydF4y2Ba),通过这种方式,PPARγ有其功能控制。因此,治疗2型糖尿病与ERK / MEK轴抑制剂可以用于改善胰岛素抵抗。gydF4y2Ba
评估是否提取显示不同的PPAR激动剂活动亚型,我们进行了基因记者分析,接着用不同提取最大浓度建立了细胞毒性试验的结果之前执行。测试中提取,其中两个,提取BvFII BvFVII,显示PPAR激动剂活动(gydF4y2Ba图2 b, CgydF4y2Ba)。提取BvFIIµg.mL 20.16的浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba(gydF4y2Ba图2 bgydF4y2Ba)激活所有三个PPAR亚型(/δα,β和γ),显示pan-agonist。反过来,只提取BvFVII激活PPARαPPARβ,但显示低激活嵌合PPARγ(LBD-PPARγ/ DBD-GAL4)。gydF4y2Ba
然后,它是评价摘录真菌BvFII和BvFVII是否能够修改PPARγ的小黑裙的结构。为此,我们进行了测定蛋白酶保护。的小黑裙PPARs口袋里有一个大的绑定,最大的关于其他核受体。结合受体激动剂时,小黑裙经历重要结构的变化,反映出表面蛋白水解网站访问的难度,因此,增加其抗蛋白酶消化。在这种情况下,当通过sds - page分析,它显示了一个典型的运行模式在聚丙烯酰胺凝胶上,与一群大约25 kDa的证据,在一个受体激动剂,它能抵抗蛋白酶降解。给出的结果表明,当存在提取真菌BvFII和BvFVII PPARγ礼物电泳模式的小黑裙喜欢对方,表明这些比罗格列酮提取更有效地保护受体(gydF4y2Ba图4一gydF4y2Ba)。这是明确的,因为大约25 kDa的乐队更多的保护。gydF4y2Ba伯杰et al。(2003)gydF4y2Ba描述部分激动剂显示模式的保护对胰蛋白酶活性相似,这些结果所示。进行了一个试验来评估胰蛋白酶的蛋白水解活性提取物的存在(gydF4y2Ba图4 bgydF4y2Ba)排除假设一些物质中提取是防止胰蛋白酶的蛋白水解作用因为有研究,描述由真菌蛋白酶的生产(gydF4y2BaDe Souza et al ., 2015gydF4y2Ba)。结果表明,凝胶的降解模式没有区别的存在与否提取和车辆(DMSO)。这表明,防止蛋白酶的提取的影响消化试验是PPARγ直接绑定。gydF4y2Ba
到目前为止,已经有研究表明受体激动剂活性的代谢物PPARγ真菌(gydF4y2Ba佐藤et al ., 2002gydF4y2Ba;gydF4y2Ba李et al ., 2008gydF4y2Ba;gydF4y2Ba李et al ., 2012gydF4y2Ba;gydF4y2Ba许et al ., 2013gydF4y2Ba),另一个在抑制其表达,但是,据我们所知,没有其他活动的α和β/δ受体亚型。然而,作品展示的受体激动剂活性天然产物从植物PPARγ(gydF4y2Ba王et al ., 2014gydF4y2Ba),另PPAR亚型(α和β/δ)也由天然产品激活。gydF4y2Ba马丁et al。(2013)gydF4y2Ba显示四个异黄酮(多酚类化合物)与受体激动剂活动PPARα,PPARβ/δ,pan-agonists PPARγ,描述这些物质。在另一个工作,结果表明,正己烷提取的gydF4y2BaTabebuia heptaphyllagydF4y2Ba在PPARs pan-agonist活动。它也表明,可以激活PPARα复合隔绝西红柿,9-oxo-10 (E), 12 (E) -octadecadienoic酸(gydF4y2Ba金正日et al ., 2011gydF4y2Ba),另一个隔离的gydF4y2Ba大麻gydF4y2Ba(gydF4y2Ba纳达尔et al ., 2017gydF4y2Ba绿茶提取物,反过来,能够激活PPARβ/δ(gydF4y2BaDanesi et al ., 2009gydF4y2Ba),而咖啡提取物抑制PPARγ(gydF4y2BaAoyagi et al ., 2014gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
服用tzd可以促进preadipocytes的分化,导致患者体重增加的不利影响(使用它们gydF4y2Ba威尔丁,2006gydF4y2Ba)。激活PPARα也促进preadipocyte分化。造成评估这种影响是否也可以提取真菌BvFII和BvFVII 3 t3-l1 preadipocytes诱导分化在提取的存在与否,罗格列酮或车辆(DMSO) (gydF4y2Ba图3一gydF4y2Ba)。真菌的提取物BvFII和BvFVII刺激略有脂质积累细胞,明显低于被罗格列酮的浓度10gydF4y2Ba5gydF4y2Bam .这结果是意料之外的,因为全PPARγ已知受体激动剂能够诱导脂肪生成3 t3-l1细胞(gydF4y2Ba罗森和Spiegelman, 2014年gydF4y2Ba),PPARα受体激动剂影响3 t3-l1 preadipocyte。gydF4y2Ba
因此,有意思的是评估的影响这些提取物FABP4基因转录的蛋白质(aP2)。FABP4 (aP2)蛋白质是一种脂质伴侣蛋白,位于细胞的细胞质和受PPARγ在脂肪细胞,在高度表达,参与脂质存储。在实时PCR试验(gydF4y2Ba图3 dgydF4y2Ba)和免疫印迹(gydF4y2Ba图3 cgydF4y2Ba),发现他们并没有影响FABP4基因和蛋白质表达的(aP2),确认结果中观察到的脂肪细胞的分化试验和脂质披露红油O染色(gydF4y2Ba图3一gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
一个假设来解释归纳提取脂肪形成的低,即使积极的兴奋剂活动和建议结合受体,是提取在某种程度上阻碍aP2的作用。aP2基因两侧PPARγ响应元素,和非功能性aP2减少脂肪形成的效果。然而,为了证实这一假设,其他的实验是必要的。gydF4y2Ba
这些发现可能导致受体激动剂分子的发现,可以测试用作抗高血糖药制剂治疗2型糖尿病和血脂异常。与真菌的分子识别和系统发育分析,可以验证提取的真菌BvFII BvFVII,但不是BvFIX属gydF4y2BaPhomopsisgydF4y2Ba,最高程度的亲属关系(gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba)。这个结果可以解释的方式提取的真菌BvFIX PPARs化验没有展示活动。gydF4y2Ba
在细胞内氧化应激的结果之间的不平衡抗氧化防御系统,这是降低,活性氧的产生,增加了。这种不平衡是参与几个介导的疾病的病因,其他途径,通过破坏DNA,脂质和蛋白质,除了信号,调节基因转录。gydF4y2Ba
类黄酮不同PPARs也被描述为受体激动剂(gydF4y2Ba萨拉姆et al ., 2008gydF4y2Ba;gydF4y2BaQuang et al ., 2013gydF4y2Ba;gydF4y2Ba徐et al ., 2018gydF4y2Ba)。然而,类黄酮也有抗氧化和氧化剂活动,根据其浓度反应介质和介质的pH值。的氧化剂影响黄酮类化合物,作为一个规则,直接与羟基的总数成正比,负责黄酮类化合物的细胞毒性和pro-apoptotic影响隔绝各种药用植物(gydF4y2BaMetodiewa et al ., 1999gydF4y2Ba)。这些特征的类黄酮同意获得的结果(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba),提取多酚含量最低的是那些显示低抗氧化活性测试时稳定自由基DPPH。在一个评论写的gydF4y2Ba汉密尔顿et al。(2012)gydF4y2Ba内生真菌是重要的,它们之间存在的共生关系和宿主植物,叶子和菌丝的生长更容易发生在增长。最初,跟工厂沟通的时候,有必要真菌产生活性氧(ROS),从而防止植物的防御作用。这肯定不知道什么定义了共生或寄生关系,但感染后,有一个平衡生产活性氧和抗氧化物质,植物和真菌,这关系,在某些情况下,种专一性(gydF4y2Ba田中et al ., 2006gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
进一步推进的理解提取物的抗氧化作用机理,评估他们的能力防止脂质过氧化反应,清除超氧化物自由基离子。多不饱和脂肪酸的脂质过氧化过程取决于氧的存在。这些脂肪酸可以激活过氧物酶体proliferator-activated受体α,β/δ,γ。抗氧化剂代理可以通过阻止这些脂肪酸的氧化行为,因此,助氧化剂的作用剂或灭活激进的物质。高浓度的葡萄糖浓度增加活性氧(ROS)以及酶的激活磷脂酶A2,它能够诱导两个丝氨酸的磷酸化(505和515)(gydF4y2BaPavicevic et al ., 2008gydF4y2Ba)和花生四烯酸的释放和细胞膜磷脂的亚油酸。释放后,这些脂肪酸氧化(ROS产生脂质过氧化作用),除了其他产品,4-hydroxyl-2-nonenal (4-HNE),结合PPARβ/δ,增加胰岛素分泌。当发生慢性高血糖时,4-HNE生产过剩,加合物与蛋白质、DNA和磷脂形成,顺向β-cell胰腺细胞凋亡。gydF4y2Ba
在测试执行,评估是否提取能够防止脂质过氧化过程的开始。反应发生在一个水包油乳液,有必要考虑抗氧化剂代理从非极性物质的极性可能存在更高的活动,因为他们被保留在油滴,脂肪酸所在地,在测试的情况下,亚油酸。二叔丁基对甲酚(2,6-bis(1,1 -二甲基乙基)4-methylphenol)和生育酚是极性物质,被用来作为积极的控制分析。除了真菌BvFIII提取,提取测试能够防止亚油酸过氧化反应(gydF4y2Ba图2 cgydF4y2Ba)。摘录真菌BvFII和BvFVII显示PPARβ/δ受体激动剂活性,此外,是抗氧化剂,可能代表一个有趣的活动,当我们认为这可以防止β-cell细胞凋亡,因此,预防糖尿病的发展。极低的抗氧化物质的存在,在乳化相间,或非极性油相混相,可能是负责的好活动抑制脂质过氧化作用。所示gydF4y2Ba图2一个gydF4y2Ba,提取黄酮类化合物。这类物质具有亲脂性的性格,可能负责抗氧化作用。关于真菌BvFIII提取,一个假设来解释其助氧化剂活动是活性物质的浓度非常高,这是pro-oxidative活动的原因,导致亚油酸的氧化。也知道,类黄酮抗氧化剂或氧化剂字符,根据介质的pH值或过渡金属的存在反应介质,如铜(铜gydF4y2Ba2 +gydF4y2Ba)或铁除氧(gydF4y2Ba曹et al ., 1997gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
评估清除超氧化物自由基负离子的能力,(gydF4y2Ba),提取,黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统被用作ROS的生产商。众所周知,超氧化物自由基阴离子存在于有氧细胞,在氧化反应中扮演着重要的角色,和干扰细胞信号,连同其他活性氧。此外,它是参与一些疾病的发病机理。脂质过氧化作用的分析,提取的黄酮类化合物的存在可能解释的清除能力gydF4y2Ba激进,突显出真菌BvFIII提取(gydF4y2Ba图2 dgydF4y2Ba),能够这样做的低浓度0.083 mg.mLgydF4y2Ba1gydF4y2Ba。要理解这个结果的相关性,在发表的工作gydF4y2Ba董et al . (2013)gydF4y2Ba蜂蜜提取物,最好的活动是观察到28 mg.mL的浓度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。,可以看出所有提取获得了优秀的活动相比,引用的工作。gydF4y2Ba
仍需要更多的研究来更好的理解的代谢途径和综合影响封存的活性氧和活化的核受体,但获得的结果可以被认为是有前途的,因为相同的提取显示激活的能力PPARγ不会太多干涉脂肪细胞的分化,而且还能够抑制脂质过氧化反应的起始步骤,清除超氧化物自由基离子。这些生物活性承诺在寻找新的候选人的降糖药代理商,他们将使药物与特定活动的发展,用更少的不良反应的发生率。gydF4y2Ba
数据可用性声明gydF4y2Ba
原始数据支持了本文的结论将由作者提供。gydF4y2Ba
作者的贡献gydF4y2Ba
点进行了实验,分析数据,并写了手稿。拉了提取obtention实验。FN协调主项目。MB的构思和协调。所有作者的手稿和批准提交的版本。gydF4y2Ba
资金gydF4y2Ba
这项工作是支持的联邦地区研究支持基金会(FAPDF -流程193.000.376/2008和0193.000977/2015),国家科学和技术发展委员会(CNPq),科学、技术、创新和通信(MCTIC)和国家科学技术发展基金(FNDCT)——MCT / CNPq FNDCT / fap / MEC /斗篷/ PRO CENTRO-OESTE(流程564506/2010-9和407851/2013-5)和改善高等教育的协调人员(披肩)。本研究还为改进的部分经费由协调高等教育人员——巴西(斗篷,葡萄牙语:Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量优越)——财务代码001。gydF4y2Ba
的利益冲突gydF4y2Ba
作者声明,这项研究是进行没有任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。gydF4y2Ba
出版商的注意gydF4y2Ba
本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
Ada公元a (2014)。糖尿病的诊断和分类。gydF4y2Ba糖尿病护理gydF4y2Ba37岁的S81-S90。doi: 10.2337 / dc14-S081gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
阿尔贝蒂k·g·M·M。,Zimmet P. F. (1998). Definition, diagnosis and classification of diabetes mellitus and its complications. part 1: diagnosis and classification of diabetes mellitus. provisional report of a WHO consultation.糖尿病地中海。gydF4y2Ba15日,539 - 553。doi: 10.1002 / (SICI) 1096 - 9136(199807)十五7 < 539:AID-DIA668 > 3.0.CO; 2 sgydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
艾伦·g·F。,愣了X。,Tsai S. Y., Weigel N. L., Edwards D. P., Tsai M. J., et al. (1992). Hormone and antihormone induce distinct conformational changes which are central to steroid receptor activation.生物。化学。gydF4y2Ba267年,19513 - 19520。doi: 10.1016 / s0021 - 9258 (18) 41805 - 4gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Aoyagi R。,Funakoshi-Tago M., Fujiwara Y., Tamura H.. (2014). Coffee inhibits adipocyte differentiation via inactivation of PPARγ.生物制药的公牛gydF4y2Ba37(11),1820 - 5所示。doi: 10.1248 / bpb.b14 - 00378gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
阿诺德·a·e·(2007)。理解叶内生真菌的多样性:进步,挑战,和前沿。雷竞技rebatgydF4y2Ba真菌生物。牧师。gydF4y2Ba21日,51 - 66。doi: 10.1016 / j.fbr.2007.05.003gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
代理C。,Maciel F., Silva L., Ferreira A., Da Cunha M., Machado O., et al. (2006). Isolation and intracellular localization of insulin-like proteins from leaves of bauhinia variegata.布拉兹。j .地中海,杂志。Res。gydF4y2Ba39岁,1435 - 1444。doi: 10.1590 / s0100 - 879 x2006001100007gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
银行a S。,Mcallister F. E., Camporez J. P. G., Zushin P.-J. H., Jurczak M. J., Laznik-Bogoslavski D., et al. (2015). An ERK/Cdk5 axis controls the diabetogenic actions of PPAR[ggr].自然gydF4y2Ba517年,391 - 395。doi: 10.1038 / nature13887gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
伯杰j . P。,Petro A. E., Macnaul K. L., Kelly L. J., Zhang B. B., Richards K., et al. (2003). Distinct properties and advantages of a novel peroxisome proliferator-activated protein γ selective modulator.摩尔。性。gydF4y2Ba17日,662 - 676。doi: 10.1210 / me.2002 - 0217gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
布莱克威尔m (2011)。真菌:1、2、3…510万种?gydF4y2Ba点。j .机器人。gydF4y2Ba98年,426 - 438。doi: 10.3732 / ajb.1000298gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
布洛瓦m . s . (1958)。抗氧化剂决定使用一个稳定的自由基。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba181年,1199 - 1200。doi: 10.1038 / 1811199 a0gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Bodakhe s . H。,Ram A. (2007). Hepatoprotective properties of bauhinia variegata bark extract.Yakugaku ZasshigydF4y2Ba127年,1503 - 1507。doi: 10.1248 / yakushi.127.1503gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Burnette w . n . (1981)。“西方墨点法”:从钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳转移蛋白质未改性硝基和影像学检测抗体和radioiodinated蛋白质。gydF4y2Ba学生物化学分析。gydF4y2Ba112年,195 - 203。0003 - 2697 . doi: 10.1016 / (81) 90281 - 5gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
参赛。,贝奈斯V。,Garson J. A., Hellemans J., Huggett J., Kubista M., et al. (2009). The MIQE guidelines: Minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments.中国。化学。gydF4y2Ba55岁,611 - 622。doi: 10.1373 / clinchem.2008.112797gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
曹G。,年代ofic E., Prior R. L. (1997). Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids: Structure-activity relationships.自由基医学杂志。地中海。gydF4y2Ba22日,749 - 760。doi: 10.1016 / s0891 - 5849 (96) 00351 - 6gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
常c c。,Yang M. H., Wen H. M., Chern J. C. (2002). Estimation of total flavonoid content in propolis by two complementary colorimetric methods.j .食品药品肛门。gydF4y2Ba10日,178 - 182。doi: 10.38212 / 2224 - 6614.2748gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
蒋介石小时。,陈H.-C。,林T.-J。,年代hih I. C., Wen K.-C. (2012). Michelia alba extract attenuates UVB-induced expression of matrix metalloproteinases通过gydF4y2BaMAP激酶通路在人类皮肤成纤维细胞。gydF4y2Ba食品化学。Toxicol。gydF4y2Ba50岁,4260 - 4269。doi: 10.1016 / j.fct.2012.08.018gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
基耶利尼G。,一个priletti J. W., Yoshihara H. A., Baxter J. D., Ribeiro R. C. J., Scanlan T. S. (1998). A high-affinity subtype-selective agonist ligand for the thyroid hormone receptor.化学。医学杂志。gydF4y2Ba5,299 - 306。doi: 10.1016 / s1074 - 5521 (98) 90168 - 5gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
科斯塔m (2005)。gydF4y2BaExtrato de紫荆花variegata尤其一个atividade transcricional mediada pelo受体dos proliferadores peroxissomais-gama (PPARgama)gydF4y2Ba(巴西利亚大学:Mestrado)。gydF4y2Ba
Cotelle n (2001)。黄酮类化合物在氧化应激中的作用。gydF4y2Ba咕咕叫。上面。地中海,化学。gydF4y2Ba1,569 - 590。doi: 10.2174 / 1568026013394750gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Da Cunha a . M。梅农S。,梅农R。,Couto A. G., Bürger C., Biavatti M. W. (2009). Hypoglycemic activity of dried extracts of bauhinia forficata link.植物学期刊gydF4y2Ba17 (1),37-41。doi: 10.1016 / j.phymed.2009.06.007gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Danesi F。,Di Nunzio M., Boschetti E., Bordoni A. (2009). Green tea extract selectively activates peroxisome proliferator-activated receptor β/δ in cultured cardiomyocytes.Br。j .减轻。gydF4y2Ba101年,1736 - 1739。doi: 10.1017 / S0007114508145871gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Das。,Rosazza J. P. N. (2006). Microbial and enzymatic transformations of flavonoids.j .自然刺激。gydF4y2Ba69年,499 - 508。doi: 10.1021 / np0504659gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
De Souza p . M。,Bittencourt M. L., Caprara C. C., De Freitas M., De Almeida R. P., Silveira D., et al. (2015). A biotechnology perspective of fungal proteases.布拉兹。j . Microbiol。gydF4y2Ba46岁,337 - 346。doi: 10.1590 / s1517 - 838246220140359gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Devchand p R。,Ziouzenkova O., Plutzky J. (2004). Oxidative stress and peroxisome proliferator-activated receptors: Reversing the curse?中国保监会,Res。gydF4y2Ba95年,1137 - 1139。res.0000151331.69399.b2 doi: 10.1161/01.gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Dinis t . C。,Maderia V. M., Almeida L. M. (1994). Action of phenolic derivatives (acetaminophen, salicylate, and 5-aminosalicylate) as inhibitors of membrane lipid peroxidation and as peroxyl radical scavengers.拱门。物化学。Biophys。gydF4y2Ba315年,161 - 169。doi: 10.1006 / abbi.1994.1485gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
董R。,Zheng Y., Xu B. (2013). Phenolic profiles and antioxidant capacities of Chinese unifloral honeys from different botanical and geographical sources.食品生物处理工艺。gydF4y2Ba6,762 - 770。doi: 10.1007 / s11947 - 011 - 0726 - 0gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
杜阿尔特·m·R。,年代ilva A. G., Costa R. E., Faria L. T. (2007).紫荆花variegatagydF4y2Ba:诊断morfoanatomica e注意comparativa范例之间德区climaticas distintas。gydF4y2Ba拉丁语。j .制药。gydF4y2Ba26日,837年。gydF4y2Ba
埃文斯j . L。,Maddux B. A., Goldfine I. D. (2005). The molecular basis for oxidative stress-induced insulin resistance.Antioxid。氧化还原信号gydF4y2Ba7,1040 - 1052。doi: 10.1089 / ars.2005.7.1040gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Felber j . P。,Golay A. (2002). Pathways from obesity to diabetes.Int。j . ob。遗传代数。金属底座。Disord。gydF4y2Ba26增刊2,S39-S45。doi: 10.1038 / sj.ijo.0802126gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Felsenstein j . (1985)。信心限制的发展史:使用引导的方法。gydF4y2Ba进化gydF4y2Ba39岁,783 - 791。doi: 10.1111 / j.1558-5646.1985.tb00420.xgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
福尔曼b M。陈,J。,Evans R. M. (1997). Hypolipidemic drugs, polyunsaturated fatty acids, and eicosanoids are ligands for peroxisome proliferator-activated receptors α and δ.Proc。国家的。学会科学。gydF4y2Ba94年,4312 - 4317。doi: 10.1073 / pnas.94.9.4312gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
法兰克N。,De Sousa Menezes F., Mills C., Sheridan H. (2010). Enhancement of insulin release from the beta-cell line INS-1 by an ethanolic extract of bauhinia variegata and its major constituent roseoside.足底地中海。gydF4y2Ba76年,995 - 997。doi: 10.1055 / s - 0029 - 1240868gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
盖洛m . b . C。,Pupo m . T。,B一个年代to年代J. K., Nunes A. S., Cavalcanti B. C., Moraes M. O., et al. (2007). Atividade citotóxica de extratos de fungos endofíticos isolados deSmallanthus sonchifoliusgydF4y2Ba。gydF4y2Ba启胸罩。BiocienciasgydF4y2Ba5,402 - 404。gydF4y2Ba
Guellich。,Damy T。,Conti M., Claes V., Samuel J.-L., Pineau T., et al. (2013). Tempol prevents cardiac oxidative damage and left ventricular dysfunction in the PPAR-α KO mouse.点。j .杂志。gydF4y2Ba304年,H1505-H1512。doi: 10.1152 / ajpheart.00669.2012gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
吉马良斯d . O。博尔赫斯w·S。,【c . Y。,Ribeiro P. H., Goldman G. H., Nomizo A., et al. (2008). Biological activities from extracts of endophytic fungi isolated from viguiera arenaria and tithonia diversifolia.《Immunol。地中海,Microbiol。gydF4y2Ba52岁,134 - 144。doi: 10.1111 / j.1574 - 695 x.2007.00354.xgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
哈利维尔(2011)。自由基和抗氧化剂——君在何处?gydF4y2Ba趋势杂志。科学。gydF4y2Ba32岁,125 - 130。doi: 10.1016 / j.tips.2010.12.002gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
汉密尔顿c, E。Gundel p E。,Helander M。,Saikkonen K。(2012)。内寄生的中介活性氧和抗氧化活性的植物:一个回顾。gydF4y2Ba真菌多样性gydF4y2Ba54岁,1 - 10。doi: 10.1007 / s13225 - 012 - 0158 - 9gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
许W.-H。,李B.-H。,Chang Y.-Y., Hsu Y.-W., Pan T.-M. (2013). A novel natural Nrf2 activator with PPARγ-agonist (monascin) attenuates the toxicity of methylglyoxal and hyperglycemia.Toxicol。达成。杂志。gydF4y2Ba272年,842 - 851。doi: 10.1016 / j.taap.2013.07.004gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
黄J。,Kleinhenz D. J., Lassègue B., Griendling K. K., Dikalov S., Hart C. M. (2004). Peroxisome proliferator-activated receptor- ligands regulate endothelial membrane superoxide production.点。j .杂志。细胞杂志。gydF4y2Ba288年,C899。doi: 10.1152 / ajpcell.00474.2004gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
杰克逊M。,Karwowski J., Humphrey P., Kohl W., Barlow G., Tanaka S. (1993). Calbistrins, novel antifungal agents produced by penicillium restrictum.j .抗生素gydF4y2Ba46岁的品种马非常。doi: 10.7164 / antibiotics.46.34gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Janderova L。,麦克尼尔公司M。,Murrell A. N., Mynatt R. L., Smith S. R. (2003). Human mesenchymal stem cells as an in vitro model for human adipogenesis.ob。Res。gydF4y2Ba11日,65 - 74。doi: 10.1038 / oby.2003.11gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
江B。,Liang P., Zhang B., Song J., Huang X., Xiao X. (2009). Role of PPAR-beta in hydrogen peroxide-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells.动脉粥样硬化gydF4y2Ba204年,353 - 358。doi: 10.1016 / j.atherosclerosis.2008.09.009gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
金,我。,Hirai S., Takahashi H., Goto T., Ohyane C., Tsugane T., et al. (2011). 9-oxo-10(E),12(E)-octadecadienoic acid derived from tomato is a potent PPAR α agonist to decrease triglyceride accumulation in mouse primary hepatocytes.摩尔。减轻。食物Res。gydF4y2Ba55岁,585 - 593。doi: 10.1002 / mnfr.201000264gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
王g . L。,Loeken M. R. (2004). Hyperglycemia-induced oxidative stress in diabetic complications.Histochem。细胞生物。gydF4y2Ba122年,333 - 338。doi: 10.1007 / s00418 - 004 - 0678 - 9gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Kulkarni y。,Garud M. S. (2015). Effect of bauhinia variegata Linn.(Caesalpiniaceae) extract in streptozotocin induced type I diabetic rats.东方制药。Exp。地中海。gydF4y2Ba15 (3),1 - 8。doi: 10.1007 / s13596 - 015 - 0186 - 6gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Kumar P。,B一个r一个iya S., Gaidhani S., Gupta M., Wanjari M. M. (2012). Antidiabetic activity of stem bark of bauhinia variegata in alloxan-induced hyperglycemic rats.j .杂志。Pharmacotherapeut。gydF4y2Ba3,64。0976 - 500 - x.92518 doi: 10.4103 /gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Kumazawa年代。,Taniguchi M., Suzuki Y., Shimura M., Kwon M. S., Nakayama T. (2002). Antioxidant activity of polyphenols in carob pods.j·阿格利司。食品化学。gydF4y2Ba50岁,373 - 377。doi: 10.1021 / jf010938rgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Laemmli美国(1970年)。最常用的不连续SDS电泳缓冲系统。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba227年,680 - 685。doi: 10.1038 / 227680 a0gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Larran年代。,Perelló A., Simón M., Moreno V. (2007). The endophytic fungi from wheat (Triticum aestivum l.).j . Microbiol世界。Biotechnol。gydF4y2Ba23日,565 - 572。doi: 10.1007 / s11274 - 006 - 9266 - 6gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
李B.-H。,许W.-H。,Chang Y.-Y., Kuo H.-F., Hsu Y.-W., Pan T.-M. (2012). Ankaflavin: a natural novel PPARγ agonist upregulates Nrf2 to attenuate methylglyoxal-induced diabetes在活的有机体内gydF4y2Ba。gydF4y2Ba自由基医学杂志。地中海。gydF4y2Ba53岁,2008 - 2016。doi: 10.1016 / j.freeradbiomed.2012.09.025gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
李I.-K。,Lee J.-H., Yun B.-S. (2008). Polychlorinated compounds with PPAR-γ agonistic effect from the medicinal fungus phellinus ribis.Bioorg。地中海,化学。列托人。gydF4y2Ba18日,4566 - 4568。doi: 10.1016 / j.bmcl.2008.07.034gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Lingnert H。,Vallentin K., Eriksson C. E. (1979). Measurement of antioxidative effect in model system.j .食物的过程。保存gydF4y2Ba3,87 - 103。doi: 10.1111 / j.1745-4549.1979.tb00574.xgydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
李H。,Qing C., Zhang Y., Zhao Z. (2005). Screening for endophytic fungi with antitumour and antifungal activities from Chinese medicinal plants.j . Microbiol世界。Biotechnol。gydF4y2Ba21日,1515 - 1519。doi: 10.1007 / s11274 - 005 - 7381 - 4gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
刘Y.-J。詹,J。,刘X。- - - - - -L., Wang Y., Ji J., He Q.-Q. (2014). Dietary flavonoids intake and risk of type 2 diabetes: A meta-analysis of prospective cohort studies.中国。减轻gydF4y2Ba33 (1),59 - 63。doi: 10.1016 / j.clnu.2013.03.011gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
李N。,Xu D., Huang R. H., Zheng J. Y., Liu Y. Y., Hu B. S., et al. (2022). A new source of diterpene lactones from andrographis paniculata (Burm. f.) nees-two endophytic fungi of colletotrichum sp. with antibacterial and antioxidant activities.前面。Microbiol。gydF4y2Ba13日,819770年。doi: 10.3389 / fmicb.2022.819770gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Lupi的R。,Del Guerra S., Mancarella R., Novelli M., Valgimigli L., Pedulli G. F., et al. (2007). Insulin secretion defects of human type 2 diabetic islets are corrected在体外gydF4y2Ba通过一个新的活性氧清除剂。gydF4y2Ba糖尿病金属底座。gydF4y2Ba33岁,340 - 345。doi: 10.1016 / j.diabet.2007.03.005gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Majka s M。,巴拉克Y。,Klemm D. J. (2011). Concise review: adipocyte origins: weighing the possibilities.干细胞gydF4y2Ba29日,1034 - 1040。doi: 10.1002 / stem.653gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Manach C。,年代c一个lbert A., Morand C., Rémésy C., Jiménez L. (2004). Polyphenols: food sources and bioavailability.点。j .中国。减轻。gydF4y2Ba79年,727 - 747。doi: 10.1093 / ajcn / 79.5.727gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Marin-Penalver J·J。,我Martin-Timon。,年代evillano-Collantes C., Del Cañizo-Gómez F. J. (2016). Update on the treatment of type 2 diabetes mellitus.世界j .糖尿病gydF4y2Ba7,354 - 395。doi: 10.4239 / wjd.v7.i17.354gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
马丁·h·(2010)。在γ- ppar炎症的作用。食物组件治疗干预的前景。gydF4y2BaMutat ResgydF4y2Ba669 (1 - 7),57 - 63。doi: 10.1016 / j.mrfmmm.2009.09.009gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
马丁。,Doddareddy M. R., Gavande N., Nammi S., Groundwater P. W., Roubin R. H., et al. (2013). The discovery of novel isoflavone pan peroxisome proliferator-activated receptor agonists.Bioorg。地中海,化学。gydF4y2Ba21日,766 - 778。doi: 10.1016 / j.bmc.2012.11.040gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Metodiewa D。,Jaiswal A. K., Cenas N., Dickancaite E., Segura-Aguilar J. (1999). Quercetin may act as a cytotoxic prooxidant after its metabolic activation to semiquinone and quinoidal product.自由·拉迪奇。医学杂志。地中海。gydF4y2Ba26日,107 - 116。doi: 10.1016 / s0891 - 5849 (98) 00167 - 1gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
默罕默德·m·A。,Mammoud M. R., Hayen H. (2009). Evaluation of antinociceptive and anti-inflammatory activities of a new triterpene saponin from bauhinia variegata leaves.z毛皮Naturforschung C。gydF4y2Ba64年,798 - 808。doi: 10.1515 / znc - 2009 - 11 - 1208gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
穆勒E。,B一个hnweg G., Sandermann H., Geiger H. (1992). A simple and efficient protocol for isolation of high molecular weight DNA from filamentous fungi, fruit bodies, and infected plant tissues.核酸Res。gydF4y2Ba20日,6115年。doi: 10.1093 / nar / 20.22.6115gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Mosmann t (1983)。快速比色测定细胞生长和存活的:应用程序来增殖和细胞毒性分析。gydF4y2Baj . Immunol。方法gydF4y2Ba65年,55 - 63。0022 - 1759 . doi: 10.1016 / (83) 90303 - 4gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Mousa w·K。,Raizada M. N. (2013). The diversity of anti-microbial secondary metabolites produced by fungal endophytes: an interdisciplinary perspective.前面。Microbiol。gydF4y2Ba4所示。doi: 10.3389 / fmicb.2013.00065gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
纳达尔X。,Del Río C., Casano S., Palomares B., Ferreiro‐Vera C., Navarrete C., et al. (2017). Tetrahydrocannabinolic acid is a potent PPARγ agonist with neuroprotective activity.英国药理学杂志》上的报告gydF4y2Ba174 (23),4263 - 4276。doi: 10.1111 / bph.14019gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Nazari M。,Ghorbani A., Hekmat-Doost A., Jeddi-Tehrani M., Zand H. (2011). Inactivation of nuclear factor-[kappa]B by citrus flavanone hesperidin contributes to apoptosis and chemo-sensitizing effect in ramos cells.欧元。j .杂志。gydF4y2Ba650年,526 - 533。doi: 10.1016 / j.ejphar.2010.10.053gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
纽曼·d·J。,Cragg G. M. (2015). Endophytic and epiphytic microbes as “Sources” of bioactive agents.前面。化学。gydF4y2Ba3所示。doi: 10.3389 / fchem.2015.00034gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Oguntibeju o . o . (2019)。2型糖尿病氧化应激和炎症:检查链接。gydF4y2BaInt。j .杂志。Pathophysiol。杂志。gydF4y2Ba11日,45。gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Pavicevic Z。,Leslie C. C., Malik K. U. (2008). cPLA2 phosphorylation at serine-515 and serine-505 is required for arachidonic acid release in vascular smooth muscle cells.j .脂质物。gydF4y2Ba49岁,724 - 737。doi: 10.1194 / jlr.M700419-JLR200gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
角色p K。,Doble M. (2008). A target based therapeutic approach towards diabetes mellitus using medicinal plants.咕咕叫。糖尿病牧师。gydF4y2Ba4,291 - 308。doi: 10.2174 / 157339908786241124gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Quang t . H。,Ngan N. T., Minh C. V., Kiem P. V., Tai B. H., Nhiem N. X., et al. (2013). Anti-inflammatory and PPAR transactivational properties of flavonoids from the roots of sophora flavescens.Phytother。Res。gydF4y2Ba27日,1300 - 1307。doi: 10.1002 / ptr.4871gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
拉伊米。,Gade A., Zimowska B., Ingle A. P., Ingle P. (2018). Marine-derived phoma-the gold mine of bioactive compounds.达成。Microbiol。Biotechnol。gydF4y2Ba102年,9053 - 9066。doi: 10.1007 / s00253 - 018 - 9329 - 2gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
reiter G。,Toborek M., Hennig B. (2004). Quercetin protects against linoleic acid-induced porcine endothelial cell dysfunction.j .减轻。gydF4y2Ba134年,771 - 775。doi: 10.1093 /约/ 134.4.771gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
里贝罗r·c·J。,冯W。,Wagner R. L., Costa C. U. H. R. M., Pereira A. C., Apriletti J. W., et al. (2001). Definition of the surface in the thyroid hormone receptor ligand binding domain for association as homodimers and heterodimers with retinoid X receptor.生物。化学。gydF4y2Ba276年,14987 - 14995。doi: 10.1074 / jbc.M010195200gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
可观的J。,Gryglewski R. J. (1988). Flavonoids are scavengers of superoxide anions.物化学。杂志。gydF4y2Ba37岁,837 - 841。0006 - 2952 . doi: 10.1016 / (88) 90169 - 4gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
罗德里格斯r . J。,White J. F. Jr., Arnold A. E., Redman R. S. (2009). Fungal endophytes: diversity and functional roles.新植醇。gydF4y2Ba182年,314 - 330。doi: 10.1111 / j.1469-8137.2009.02773.xgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Rosen e D。,年代piegelman B. M. (2014). What we talk about when we talk about fat.细胞gydF4y2Ba156年,20-44。doi: 10.1016 / j.cell.2013.12.012gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Saikkonen K。Faeth S。,Helander M., Sullivan T. (1998). Fungal endophytes: a continuum of interactions with host plants.为基础。启生态。分类学gydF4y2Ba29日,319 - 343。doi: 10.1146 / annurev.ecolsys.29.1.319gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
萨拉姆·n·K。,Huang T. H., Kota B. P., Kim M. S., Li Y., Hibbs D. E. (2008). Novel PPAR-gamma agonists identified from a natural product library: a virtual screening, induced-fit docking and biological assay study.化学。医学杂志。药物洗脱支架。gydF4y2Ba71年,57 - 70。doi: 10.1111 / j.1747-0285.2007.00606.xgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
佐藤M。,Tai T., Nunoura Y., Yajima Y., Kawashima S., Tanaka K. (2002). Dehydrotrametenolic acid induces preadipocyte differentiation and sensitizes animal models of noninsulin-dependent diabetes mellitus to insulin.医学杂志。制药。公牛。gydF4y2Ba25日,81 - 86。doi: 10.1248 / bpb.25.81gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
席尔瓦c a d m (2014)。Estudo quimico biomonitorado de extratos das folha de紫荆花variegata var. variegata直流。帕拉identificacao de agonista做受体ativado为什么proliferadores peroxissomais-gama (PPARg)。gydF4y2BaTese (doutorado)——巴西利亚大学Faculdadede Ciencias da SaudegydF4y2Ba。doi: 10.26512 / 2014.12.t.18052gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
辛格。,Loke Y. K., Furberg C. D. (2007). Long-term risk of cardiovascular events with rosiglitazone.《美国医学会杂志》gydF4y2Ba298年,1189 - 1195。doi: 10.1001 / jama.298.10.1189gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Stierle。,Strobel G。,年代tierle D. (1993). Taxol and taxane production byTaxomyces andreanaegydF4y2Ba植物内生真菌的太平洋紫杉。gydF4y2Ba科学gydF4y2Ba260年,214 - 216。doi: 10.1126 / science.8097061gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Strobel G。,黛西B。,Castillo U., Harper J. (2004). Natural products from endophytic microorganisms.j .自然刺激。gydF4y2Ba67年,257 - 268。doi: 10.1021 / np030397vgydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
田村K。,年代techer G., Kumar S. (2021). MEGA11: Molecular evolutionary genetics analysis version 11.摩尔。杂志。另一个星球。gydF4y2Ba38岁,3022 - 3027。doi: 10.1093 / molbev / msab120gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
田中。,Christensen M. J., Takemoto D., Park P., Scott B. (2006). Reactive oxygen species play a role in regulating a fungus–perennial ryegrass mutualistic interaction.植物细胞网络gydF4y2Ba18日,1052 - 1066。doi: 10.1105 / tpc.105.039263gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
泰西耶E。,Nohara A。,Chinetti G., Paumelle R., Cariou B., Fruchart J. C., et al. (2004). Peroxisome proliferator-activated receptor {alpha} induces NADPH oxidase activity in macrophages, leading to the generation of LDL with PPAR-{alpha} activation properties.中国保监会,Res。gydF4y2Ba95 (12)1174 - 82。res.0000150594.95988.45 doi: 10.1161/01.gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Tianpanich K。Prachya S。,Wiyakrutta S., Mahidol C., Ruchirawat S., Kittakoop P. (2011). Radical scavenging and antioxidant activities of isocoumarins and a phthalide from the endophytic fungus colletotrichum sp.j . Nat,刺激。gydF4y2Ba74年,79 - 81。doi: 10.1021 / np1003752gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
沃尔·g·T。,Damasceno D. C., Rudge M. V., Padovani C. R., Calderon I. M. (2008). Effect of bauhinia forficata aqueous extract on the maternal-fetal outcome and oxidative stress biomarkers of streptozotocin-induced diabetic rats.j . Ethnopharmacol。gydF4y2Ba116年,131 - 137。doi: 10.1016 / j.jep.2007.11.013gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
王L。,Waltenberger B., Pferschy-Wenzig E.-M., Blunder M., Liu X., Malainer C., et al. (2014). Natural product agonists of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ): a review.物化学。杂志。gydF4y2Ba92年,73 - 89。doi: 10.1016 / j.bcp.2014.07.018gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
王L.-W。徐B.-G。,Wang J.-Y., Su Z.-Z., Lin F.-C., Zhang C.-L., et al. (2012). Bioactive metabolites from phoma species, an endophytic fungus from the Chinese medicinal plant arisaema erubescens.达成。Microbiol。Biotechnol。gydF4y2Ba93年,1231 - 1239。doi: 10.1007 / s00253 - 011 - 3472 - 3gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
白色t J。,布鲁斯T。,李。,Taylor J. (1990). Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics.方法:PCR协议:指南。gydF4y2Ba18日,315 - 322。doi: 10.1016 / b978 - 0 - 12 - 372180 - 8.50042 - 1gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
野生的j . (2006)。Thiazolidinediones、胰岛素抵抗和肥胖:找到一个平衡。gydF4y2BaInt。j .中国。Pract。gydF4y2Ba1272 - 1280。doi: 10.1111 / j.1742-1241.2006.01128.xgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
徐H。,B一个rne年代G. T., Yang Q., Tan G., Yang D., Chou C. J., et al. (2003). Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the development of obesity-related insulin resistance.j .中国。投资。gydF4y2Ba112年,1821 - 1830。doi: 10.1172 / JCI200319451gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
徐苏耿赋。,Lu Y.-H., Wang J.-F., Song Z.-Q., Hou Y.-G., Liu S.-S., et al. (2021). Bioactive secondary metabolites of the genus diaporthe and anamorph phomopsis from terrestrial and marine habitats and endophytes: 2010–2019.微生物gydF4y2Ba9日,217年。doi: 10.3390 / microorganisms9020217gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
徐l . J。,Yu M. H., Huang C. Y., Niu L. X., Wang Y. F., Wu C. Z., et al. (2018). Isoprenylated flavonoids from morus nigra and their PPAR gamma agonistic activities.FitoterapiagydF4y2Ba127年,109 - 114。doi: 10.1016 / j.fitote.2018.02.004gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
元w·H。刘米。,Jiang N., Guo Z. K., Ma J., Zhang J., et al. (2010). Guignardones a–c: Three meroterpenes from guignardia mangiferae.欧元。j . Org。化学。gydF4y2Ba2010年,6348 - 6353。doi: 10.1002 / ejoc.201000916gydF4y2Ba
CrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
扎卡里亚z。,温家宝l . Y。,一个bdul Rahman N. I., Abdul Ayub A. H., Sulaiman M. R., Gopalan H. K. (2007). Antinociceptive, anti-inflammatory and antipyretic properties of the aqueous extract of bauhinia purpurea leaves in experimental animals.地中海,Princ。Pract。gydF4y2Ba16,443 - 449。doi: 10.1159 / 000107749gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
张h·W。,年代ongY. C., Tan R. X. (2006). Biology and chemistry of endophytes.Nat。刺激。代表。gydF4y2Ba23日,753 - 771。doi: 10.1039 / b609472bgydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
周X。,Zhu H., Liu L., Lin J., Tang K. (2010). A review: recent advances and future prospects of taxol-producing endophytic fungi.达成。Microbiol。Biotechnol。gydF4y2Ba86年,1707 - 1717。doi: 10.1007 / s00253 - 010 - 2546 - ygydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
Zunino s (2009)。2型糖尿病和血糖反应葡萄或葡萄产品。gydF4y2Baj .减轻。gydF4y2Ba139年,1794年代- 1800年代。doi: 10.3945 / jn.109.107631gydF4y2Ba
《公共医学图书馆摘要》gydF4y2Ba|gydF4y2BaCrossRef全文gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
关键词:gydF4y2Ba过氧物酶体proliferator-activated受体,抗氧化、糖尿病、内生真菌,gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba
引用:gydF4y2BaMesquita PG, Araujo LM,七巧板,答MdF(2022)内生真菌的代谢产物从叶子中分离出来的gydF4y2Ba紫荆花variegatagydF4y2Ba表现出抗氧化活性和过氧物酶体激动剂活动proliferator-activated受体α,β和γ和δ。gydF4y2Ba前面。真菌生物。gydF4y2Ba3:1049690。doi: 10.3389 / ffunb.2022.1049690gydF4y2Ba
收到:gydF4y2Ba2022年9月20日;gydF4y2Ba接受:gydF4y2Ba2022年11月23日;gydF4y2Ba
发表:gydF4y2Ba2022年12月08年。gydF4y2Ba
编辑:gydF4y2Ba
若昂韦森特de Souza布拉加gydF4y2Ba亚马逊国家研究所的研究(INPA),巴西gydF4y2Ba审核:gydF4y2Ba
Lijian徐gydF4y2Ba黑龙江大学,中国gydF4y2BaRamendra Pati PandeygydF4y2BaSRM大学(德里首都区),印度gydF4y2Ba
版权gydF4y2Ba©2022 Mesquita Araujo、七巧板、答。这是一个开放分布式根据文章gydF4y2Ba知识共享归属许可(CC)gydF4y2Ba。使用、分发或复制在其他论坛是允许的,提供了原始作者(年代)和著作权人(s)认为,最初发表在这个期刊引用,按照公认的学术实践。没有使用、分发或复制是不符合这些条件的允许。gydF4y2Ba
*通信:gydF4y2BaMaria de法蒂玛答gydF4y2Bamfborin@unb.brgydF4y2Ba;gydF4y2Bamfborin@gmail.comgydF4y2Ba