原始研究的文章

前面。Cardiovasc。地中海,07年2023年2月
秒。动脉粥样硬化和血管医学
卷10 - 2023 | https://doi.org/10.3389/fcvm.2023.1060719

Ox-LDL诱导深刻变化的小非编码RNA在大鼠内皮细胞

于王 ^__,

Tianhua刘^__,

署名,

Yanyan呗^*,

《悦^*和

地溜溜转冯 ^*

Shidong医院心内科Shidong医院隶属于上海科技大学,上海,中国

作品简介:动脉粥样硬化(AS)是一种常见的心血管疾病的高发病率和死亡率。内皮细胞损伤和功能障碍的早期征兆。氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)是一个重要的危险因素的发展。Ox-LDL促进内皮细胞凋亡,诱导内皮细胞炎症和氧化应激。小非编码rna (sncRNAs)主要包括Piwi-interacting rna (piRNAs),小核仁的rna (snorna)、小核rna(核内小rna),小分子核糖核酸(microrna)和repeat-associated rna。研究表明,小非编码rna在疾病发挥着越来越重要的作用。

方法:我们使用ox-LDL治疗大鼠内皮细胞模拟内皮细胞损伤。sncRNA分析小RNA的表达变化高通量测序,piRNA的表情变化,snoRNA,核内小RNA, microrna repeat-associated RNA被验证定量聚合酶链反应(qPCR)。

结果:小核糖核酸测序显示42 piRNAs调节和38 piRNAs在内皮细胞表达下调ox-LDL对待。PiRNA DQ614630促进了内皮细胞的凋亡。snoRNA分析结果表明,80 snoRNA调节和68 snoRNA表达下调与ox-LDL内皮细胞治疗,和snoRNA ENSRNOT00000079032.1抑制内皮细胞的凋亡。核内小rna,我们发现20核内小rna调节和26个核内小rna表达下调与ox-LDL内皮细胞治疗,和核内小rna ENSRNOT00000081005.1增加内皮细胞的凋亡。microrna的分析表明,106个microrna调节和91 microrna的表达下调与ox-LDL内皮细胞治疗,和microrna的优化——小说- 136成熟促进了内皮细胞的凋亡。重复4重复RNA RNA分析结果表明,调节和6重复RNA在内皮细胞表达下调ox-LDL对待。

讨论:本研究首次报道sncRNAs的表达变化与ox-LDL内皮细胞治疗,为诊断和治疗提供了新的标记内皮细胞损伤。

介绍

动脉粥样硬化(AS)是一种常见的心血管疾病的高发病率和死亡率(1,2)。它是冠心病的主要原因,心肌梗死和周围性血管疾病。内皮细胞发挥重要作用在维持血管的动态平衡系统(3)。他们的损伤和功能障碍的早期征兆。了高血压、高脂血症和其他因素,由内皮细胞粘附分子表达能促进当地积累氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),诱导炎性反应、氧化应激和内皮细胞凋亡,最后导致斑块的形成(4,5)。阐明ox-LDL-mediated细胞凋亡的分子机制血管内皮细胞(vec)开发有效的治疗方法具有重要意义。

低密度脂蛋白进入vec之后,它与细胞内活性氧结合形成ox-LDL (6)。Ox-LDL vec的结构和功能造成损害,导致vec凋亡异常(7)。它可以作为一种凋亡诱导信号在线粒体膜、线粒体膜的通透性增加,线粒体的细胞凋亡促进剂释放到细胞质中,改善apoptosis-promoting基因Bax的表达细胞,激活细胞凋亡启动蛋白酶caspase-9,激活下游凋亡效应蛋白酶caspase-3通过级联反应,作用于细胞骨架,导致细胞凋亡的变化,如DNA修复的损失函数和激活核酸内切酶(8,9)。Ox-LDL穿过subintima矢量之间的差距,结合细胞外活性氧形成Ox-LDL。同时,单核细胞迁移通过vec subintima过度炎症因素和刺激的作用下转变为巨噬细胞。的保护吞噬巨噬细胞吞噬作用下使ox-LDL内膜变成泡沫细胞,和泡沫细胞积聚的内膜下管壁形成早期的脂质条纹病变(10- - - - - -14)。因此,阐明ox-LDL-mediated障碍的分子机制vec开发有效的治疗方法具有重要意义。

小非编码rna (sncRNAs)主要包括Piwi-interacting rna (piRNAs),小核仁的rna (snorna)、小核rna(核内小rna),小分子核糖核酸(microrna)和repeat-associated rna (15)。PiRNA是一种小RNA的长度大约30个核苷酸从哺乳动物的生殖细胞,分离和PiRNA只能发挥监管作用当结合匹威蛋白质家族成员(16)。piRNA的影响在生殖细胞的生长和发育是受基因沉默造成的匹威piRNA复杂(17)。然而,由于研究piRNAs仍处于初级阶段,一些特定功能和生物起源piRNAs仍在研究。SnoRNA是一种非编码RNA的长度60 - 300个核苷酸,广泛存在于真核细胞(18)。它负责其他非编码rna的转录后修饰。SnoRNA可以结合特定的蛋白质形成复合物稳定存在于细胞。snoRNA的主要功能是指导2′-O-Ribose-Methylation和pseudouridylation修改rRNA (19)。核内小RNA是一种小分子RNA含有大约50 - 200核苷酸在真核细胞核(20.)。小ribonucleosome (snRNP)由其结合相关的蛋白质,主要起着重要的作用在处理RNA前体和删除多余的片段(如内含子)。迄今为止,microrna研究了20多年,和它们的功能涉及到各种疾病的发生。传统上,microrna起着负监管的作用在细胞质中由绑定到目标基因3′utr抑制翻译或信使rna的降解。研究表明,sncRNA在表观遗传调控中发挥着越来越重要的作用,参与基因表达在许多方面的规定,如基因转录后基因mRNA转录和翻译(21,22)。他们是密切相关的诊断、治疗和预后的许多人类疾病(23- - - - - -25)。然而,尽管一些报道microrna在ox-LDL-induced内皮损伤的作用研究26,27),到目前为止,没有调查piRNA snoRNA、核内小RNA和repeat-associated RNA被报道。

在这项研究中,我们使用小RNA序列和定量聚合酶链反应(qPCR)分析的影响ox-LDL在VEC sncRNAs的表达和识别sncRNAs ox-LDL-induced VEC功能障碍,从而提供一个新的治疗目标的诊断和治疗。

材料和方法

隔离和大鼠主动脉内皮细胞的文化

老鼠被杀死后颈椎错位,整个老鼠浸泡在75%乙醇消毒。箱子被打开,主动脉在无菌PBS解剖。切除后的脂肪和纤维组织血管动脉外膜,与PBS主动脉被冲洗,去除血液和血管腔凝固。主动脉被切割成1毫米³动脉植入用一个锋利的手术刀,种植在培养皿。动脉内膜的表面的移植与培养皿底部的联系,和种植密度大约是1块/厘米²。培养皿放置在孵化器2 h。含25%胎牛血清的培养基添加从组织的顶部稍微覆盖动脉移植的内层的表面。板被转移到一个孵化器24 h, 24小时后,培养基是改变。第三天,内皮细胞是成熟,成纤维细胞生长。然后,动脉移植轻轻删除,培养基是改变每2天。

Ox-LDL治疗

血管内皮细胞接种到培养板,2毫升的介质包含100μg /毫升ox-LDL被加入到培养板12 h,和细胞样本收集12 h后的文化。

RNA提取

细胞溶解样品在室温下放置10分钟完全区分核蛋白质和核酸。氯仿(0.2毫升)添加到细胞溶解样品,和混合物猛烈震动了15秒,在室温下放置3分钟。然后,混合物在12000 rpm离心机,10分钟。4°C的上层水相收集和与同等体积的异丙醇混合。混合物在室温下放置20分钟,然后离心机在12000 rpm, 4°C, 10分钟。上层的丢弃,和1毫升的75%乙醇添加洗沉淀。RNA在12000 rpm纯化后离心,4°C 3分钟。净化的RNA在30 - 50μl筛选了RNase-free ddH2O。

小核糖核酸测序

量子位RNA检测工具被用来精确地量化总RNA来确定数量的总RNA添加到图书馆建设。RNA的3′末端连接到连接器与T4 RNA连接酶2。RNA 5′末端的连接到连接器与T4 RNA连接酶1。连接产品reverse-transcribed获得的互补脱氧核糖核酸链连接产品。在这一步中,小RNA图书馆reverse-transcribed到DNA。逆转录产品被PCR扩增获得最终的产品库。NextSeq 550 (Illumina公司)系统用于测序分析。生读了后测序,然后过滤、拼接和净化获得干净的读取,而后续的参考基因组信息分析。被删除的数据与原程序。低质量的序列使用获得的数据清理trimmatic程序。 The FastQC program was used to count the data volume of clean data. Fragments larger than 15 nucleotides were retained for subsequent analysis. The Bowtie program was used to compare clean data to the non-coding RNA database and genome. The edgeR program was used to analyze the differences in non-coding RNA expression. The databases used in this study were list as follow: PiRNABANK (piRNA), miRbase (miRNA) and Ensembl database (snoRNA and snRNA). As for repeat RNA were analyzed by RepeatMasker. The differentially expressed small RNAs are listed in补充表1。

qPCR

从血管内皮细胞总RNA提取试剂盒。EZ-press微rna逆转录工具包用于microRNA和piRNA逆转录。PrimeScript RT大师混合用于snoRNA和核内小rna逆转录。SYBR预混料Taq交货是用来检测在vec sncRNA的表达。U6用作内部控制。的相对表达sncRNA计算了2^-ΔΔ^Ct方法。列出使用的引物补充表2。

SncRNA过度和可拆卸的

piRNA和microrna的过度和击倒,piRNA和microrna的模仿是用于超表达,piRNA和microrna的抑制剂用于击倒。piRNA microrna的模仿和抑制剂的设计、合成了一般生物系统(安徽)有限公司,有限公司共有50μl Opti MEM和0.2 nmol RNA被轻轻混合获得RNA稀释剂。共有50μl Opti MEM和2.0μl Lip2000轻轻混合获得Lip2000稀释剂,和Lip2000稀释剂在室温下培养5分钟。RNA Lip2000稀释剂和稀释剂混合和孵化20分钟在室温下形成RNA-Lip2000复杂。RNA-Lip2000复杂添加到孵化细胞,培养板轻轻摇晃。细胞在37°C孵化有限公司₂孵化器为4 - 6 h,然后改变了媒介和培养18-48 h。

核内小rna和snoRNA过度,目标序列克隆到核内小rna和snoRNA pLVX向量构建慢病毒,用来使转染内皮细胞。

流式细胞术

大鼠主动脉内皮细胞治疗与ox-LDL 12 h,然后接受指定的治疗。之后,细胞凋亡测定使用膜联蛋白V-FITC /碘化propidium工具包(BD生物科学)根据制造商的协议。使用流式细胞分析仪观察凋亡细胞。CellQuest软件被用来分析凋亡率。

统计分析

提出了所有数据的均值±s.d三个独立的实验。T测试和方差分析被用来比较两组Excel 2017;p< 0.05被认为是显著性差异P< 0.01被认为是高度显著的。

结果

微分表达式piRNA与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞

PiRNA参与转座子沉默,精子发生、基因组重排,表观遗传调控、蛋白质监管和生殖干细胞维护(28)。然而,监管piRNAs对内皮细胞损伤的影响是未知的。小核糖核酸测序显示42 piRNAs调节和38 piRNAs下调ox-LDL-treated内皮细胞相比,数控细胞(图1 a - c)。我们使用PCA piRNA表达式和ox-LDL治疗之间的关系。结果表明,piRNA表达式杰出ox-LDL组和NC组(图1 d)。接下来,我们使用qPCR验证piRNA的小核糖核酸测序结果。qPCR结果表明与NC组相比,12 piRNAs ox-LDL组的表达增加,和的表达piRNA DQ602402最重要的增加(图1 e)。另一方面,的表达piRNA DQ606544和DQ749693明显减少ox-LDL组相比NC组(图1 f)。在内皮细胞的表达piRNA DQ614630增加或撞倒piRNA DQ614630模仿或抑制剂(补充图1)。piRNA DQ614630超表达促进了内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL,和piRNA DQ614630击倒抑制内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL (图1 g, H)。

图1

图1所示。微分表达式piRNAs与ox-LDL鼠内皮细胞治疗。的热图(一)马,地图(B),火山的地图(C)显示的表达piRNA与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞,n= 3。(D)主成分分析显示,老鼠piRNA的表达内皮细胞有或没有ox-LDL治疗,n= 3。(E)qPCR发现piRNA在大鼠内皮细胞的表达有或没有ox-LDL治疗。(F)qPCR发现piRNA在大鼠内皮细胞的表达有或没有ox-LDL治疗。(G)流式细胞术分析细胞凋亡治疗后与piRNA DQ614630模仿和piRNA DQ614630抑制剂。(H)根据流量仪结果量化的正常细胞。统计分析,三个独立的实验。*p< 0.05,* *p< 0.01。

微分的snoRNA与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞

snoRNA研究发展迅速,最近的研究表明,snoRNA也参与遗传疾病,人类变异、造血、代谢和癌症(19)。小核糖核酸测序表明80 snorna调节和68 snorna ox-LDL-treated内皮细胞相比,数控细胞表达下调(图2 a - c)。主成分分析的结果表明,snoRNA表达式可以区分ox-LDL组和NC组(图2 d)。qPCR分析表明,与NC组相比,20 snoRNA ox-LDL组的表达增加,和snoRNA ENSRNOT00000079223.1增加最重要的表达(图2 e)。另一方面,qPCR表明ENSRNOT00000079032.1的表达降低ox-LDL组相比NC组(图2 f)。在内皮细胞的表达snoRNA ENSRNOT00000079032.1增加了与慢病毒转染和qPCR探测到(补充图1 b)。snoRNA ENSRNOT00000079032.1过度抑制内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL (图2 g, H)。

图2

图2。微分表达式snoRNA与ox-LDL鼠内皮细胞治疗。的热图(一)马,地图(B),火山的地图(C)显示的表达snoRNA与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞,n= 3。(D)主成分分析显示,大鼠内皮细胞的表达snoRNA有或没有ox-LDL治疗,n= 3。(E)qPCR发现snoRNA在大鼠内皮细胞的表达有或没有ox-LDL治疗。(F)qPCR发现snoRNA在大鼠内皮细胞的表达有或没有ox-LDL治疗。(G)流式细胞术测定细胞凋亡与pLVX-ENSRNOT00000079032.1治疗后。(H)根据流量仪结果量化的正常细胞。统计分析,三个独立的实验。*p< 0.05,* *p< 0.01。

核内小rna的微分表达式与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞

核内小RNA有一大群非编码RNA与大差异,这些非编码RNA主要参与的选择性剪接的信使RNA前体和核糖体RNA的处理(29日)。我们分析了表达的变化与ox-LDL snoRNA治疗的大鼠内皮细胞。小核糖核酸测序显示20个核内小RNA调节和26个核内小RNA表达下调ox-LDL-treated内皮细胞(图3 a - c)。主成分分析表明,核内小rna表达可以区分ox-LDL组和NC组(图3 d)。我们使用qPCR核实核内小RNA的小核糖核酸测序结果。qPCR结果表明与NC组相比,25 ox-LDL组的核内小rna的表达增加,和核内小rna的表达ENSRNOT00000081005.1最重要的增加(图3 e)。核内小rna的表达ENSRNOT00000081005.1在内皮细胞增加了与慢病毒转染qPCR探测到(补充图1 c)。核内小rna ENSRNOT00000081005.1过度抑制内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL (图3 f, G)。

图3

图3。微分表达式鼠内皮细胞的核内小rna ox-LDL对待。的热图(一)马,地图(B),火山的地图(C)显示核内小rna的表达与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞,n= 3。(D)主成分分析显示,老鼠核内小rna的表达内皮细胞有或没有ox-LDL治疗,n= 3。(E)qPCR检测到核内小rna的表达在大鼠内皮细胞有或没有ox-LDL治疗。(F)流式细胞术测定细胞凋亡与pLVX-ENSRNOT00000081005.1治疗后。(G)根据流量仪结果量化的正常细胞。统计分析,三个独立的实验。*p< 0.05,* *p< 0.01。

微分microrna的表达与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞

microrna参与内皮细胞功能的维护(30.,31日)。小核糖核酸测序表明106 microrna是调节和91 microrna的表达下调ox-LDL-treated内皮细胞相比,数控细胞(图4 a - c)。我们使用PCA microrna的表达和ox-LDL治疗之间的关系。结果表明,microrna的表达能够区分ox-LDL和NC组(图4 d)。qPCR分析表明,与NC组相比,ox-LDL组21 microrna的表达增加,和microrna的表达优化小说- 136成熟最重要的增加(图4 e)。microrna的表达优化小说- 136成熟内皮细胞的增加或microrna的汽车撞倒了小说- 136成熟模仿或抑制剂(补充图1 d)。microrna优化小说- 136成熟的超表达促进了内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL,和microrna的优化——小说- 136成熟击倒抑制内皮细胞的凋亡诱导ox-LDL (图4 f, G)。

图4

图4。微分microrna的表达与ox-LDL鼠内皮细胞治疗。的热图(一)马,地图(B),火山的地图(C)显示microrna的表达与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞,n= 3。(D)主成分分析显示,老鼠microrna的表达内皮细胞有或没有ox-LDL治疗,n= 3。(E)qPCR发现microrna的表达在大鼠内皮细胞有或没有ox-LDL治疗。(F)流式细胞术测定细胞凋亡与优化小说- 136治疗后成熟的模拟和优化小说- 136成熟模仿抑制剂。(G)根据流量仪结果量化的正常细胞。统计分析,三个独立的实验。*p< 0.05,* *p< 0.01。

微分表达式重复RNA与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞

所有的rna倾向于自发折叠成二级或三级结构。尽管RNA只有四种核苷酸,可以形成不同的结构,从而影响细胞的功能。异常的扩大,功能重复的RNA序列表现出异常,成为致病,引起许多疾病(32)。结果显示,4重复rna调节和6重复rna表达下调ox-LDL-treated内皮细胞相比,数控细胞(图5 a - c)。主成分分析表明,重复RNA表达可以区分ox-LDL组和NC组(图5 d)。

图5

图5。重复的微分表达式与ox-LDL RNA治疗的大鼠内皮细胞。的热图(一)马,地图(B),火山的地图(C)显示重复RNA的表达与ox-LDL治疗大鼠内皮细胞,n= 3。(D)主成分分析显示,老鼠重复RNA的表达内皮细胞有或没有ox-LDL治疗,n= 3。

讨论

RNA结构和功能之间的关系在不同的生物多样性是生命科学的重要基础研究的前沿。尤其是在基因组和蛋白质组的建议项目,RNA的组学研究已经成为分子生物学研究的一个新的增长点。在这项研究中,我们发现小RNA的关系,小RNA序列和qPCR ox-LDL-induced ED。PiRNA是一种小RNA从哺乳动物的生殖细胞,分离和PiRNA只能发挥监管作用当结合匹威蛋白质家族成员(16)。目前,piRNAs已发现在血管和心脏,和以前的研究已经表明piRNAs施加机械的监管效力期间心脏分化(33)。pirna - 30473 B淋巴瘤的发生和预后提供中介通过调节m6A甲基化(34)。PiRNA-DQ541777介导神经性疼痛通过有针对性的监管Cdk5rap1表达式(35)。pirna - 63076促进肺动脉平滑肌细胞的增殖通过调节酰coa脱氢酶活动(36)。然而,没有研究报道监管piRNAs对血管内皮细胞的影响。我们第一次报道的影响ox-LDL piRNA在血管内皮细胞的表达,这可能成为一个生物标志物的检测血管内皮损伤。

SnoRNA是一种非编码RNA的长度60 - 300个核苷酸,广泛存在于真核细胞(18)。在脊椎动物中,基因编码snorna主要存在于蛋白质编码基因的内含子区域或non-protein-coding基因,形成成熟snorna经过进一步转录后的处理(18,37)。它可以与特定的蛋白质结合,形成复合物稳定存在于细胞。snoRNA的主要功能是指导2′-O-ribose-methylation和pseudouridylation修改rRNA (19)。最近的研究表明,snoRNA也参与遗传疾病,人类变异、造血、代谢和癌症(19)。SNORD50A / B作为控制蛋白质喀斯特的活动分子开关,然后调节肿瘤的发生(38)。目前,没有研究报道snoRNA的表达变化的过程中ox-LDL引起的内皮细胞损伤。我们报道的表达变化snoRNA ox-LDL引起的内皮细胞损伤过程中的第一次,它提供了一个新的研究和治疗内皮细胞损伤的研究目标。

核内小RNA RNA剪接体的主要成分在真核生物的转录后的加工(29日)。现在有五种核内小rna的长度大约100 - 215核苷酸在哺乳动物。核内小RNA RNA剪接体形式大约40核蛋白质和RNA转录后的加工中扮演重要角色29日)。核内小rna的表达在人类、黑猩猩、猕猴和鼠标前额叶皮质被高通量测序技术系统地测量。通过比较分析,发现核内小rna基因家族层面非常保守,但U1的表情大大改变人类的大脑(39)。我们发现核内小rna的表达显著改变在内皮细胞损伤。然而,核内小rna的机制需要进一步研究。

microrna sncRNAs是研究最多的,他们的功能是参与生物过程的几乎所有方面。越来越多的研究表明,在心血管疾病(microrna发挥重要的监管作用40)。一些报告研究了microrna在ox-LDL-induced内皮损伤的作用。mir - 214 - 3 - p保护内皮细胞通过瞄准GPx4的表达(26)。mir - 217减少ox-LDL-induced EGR1通过抑制内皮细胞损伤表达式(27)。在这项研究中,我们发现一些新的microrna ox-LDL引起的内皮细胞损伤有关,而这些新microrna需要识别序列和功能。

有相对较少的报告repeat-associated RNA和疾病之间的关系。Repeat-associated RNA被报道与肌强直性营养不良(DM), Fuch内皮的角膜营养不良(FECD)和肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS) (41)。我们第一次发现repeat-associated RNA表达变化在ox-LDL-induced内皮细胞损伤小RNA序列。

使用小型RNA高通量测序和qPCR检测,我们发现piRNAs的表达,snorna,核内小RNA, microrna repeat-associated RNA ox-LDL-induced期间显著改变内皮细胞损伤。我们的研究结果初步表明,这些sncRNAs ox-LDL治疗期间显著调节或表达下调。PiRNA snoRNA,核内小RNA, microrna repeat-associated RNA可能是内皮细胞损伤的生物标志物和将来可能是有用的治疗目标。仍需要进一步的研究,揭示了细胞通路由sncRNAs参与ox-LDL-induced内皮细胞损伤。

数据可用性声明

在这项研究中提出的数据集可以在网上找到存储库。库的名称/存储库和加入数量(s)可以在本文中找到补充材料。

道德声明

这种动物研究的动物伦理委员会审查和批准Shidong医院。

作者的贡献

YW写的手稿,进行数据分析,参与这项研究的概念和传导。TL参与研究的概念和传导和广泛参与的准备和修改的草稿。WX参与研究的概念,数据分析,和修改的草稿。YB, DY,如果参与研究的概念,监督传导和数据分析,并广泛参与准备和修改的草稿。所有作者的文章和批准提交的版本。

资金

这项研究是由杨浦区的关键学科建设基金(YP19ZA09)和上海帆船项目(21 yf1443300)。

的利益冲突

作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。

出版商的注意

本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。

补充材料

本文的补充材料在网上可以找到:https://www.雷竞技rebatfrontiersin.org/articles/10.3389/fcvm.2023.1060719/full补充材料

补充图1 |的超表达和击倒ncRNA鼠内皮细胞。(一)的超表达和击倒piRNA DQ614630鼠内皮细胞。(B)ENSRNOT00000079032.1在大鼠内皮细胞的过度。(C)ENSRNOT00000081005.1在大鼠内皮细胞的过度。(A, D)的超表达和可拆卸的microrna优化小说- 136在大鼠内皮细胞成熟。统计分析,三个独立的实验。^{* *}p< 0.01。

引用

1。莱伊Kobiyama K, K .动脉粥样硬化。中国保监会Res。(2018)123:1118-20。doi: 10.1161 / CIRCRESAHA.118.313816