利用硒代半胱氨酸提高氢微生物细胞工厂生产
Armaan帕特尔
大卫·w·穆德
迪特尔Soll后
娜塔莉Krahn- 1分子生物物理学和生物化学,耶鲁大学纽黑文,美国CT
- 2国家可再生能源实验室、生物科学中心、金,美国公司
- 3化学系,耶鲁大学纽黑文,美国CT
氢是一种清洁、可再生能源,结合氧气时,会产生热量和电力biproduct只有水蒸气。此外,它的能量最高的体重所有已知的燃料。因此,各种策略设计方法有效地生产氢和数量感兴趣的经济。方法的概念产生了氢气从生物学的角度来看,我们关注氢化酶中自然产生的微生物。这些生物有机械制造出氢,巧妙地设计时,可能是有用的在细胞工厂导致大量生产氢。并不是所有的氢化酶是有效的在制氢,那些,往往是氧气敏感。因此,我们提供一个新的视角介绍硒代半胱氨酸,高活性proteinogenic氨基酸,作为一个策略对工程与增强氢氢化酶,或增加氧气的宽容。
1介绍
C1-utilizing微生物,微生物生存,依赖于一个碳分子,一直感兴趣的生产生物燃料工业使用(杜et al ., 2011)。代谢工程的进步导致了生物合成途径的设计来有效地使用细胞机械(Bar-Even et al ., 2010)。这些工程策略的一个应用程序是利用的活动(镍铁),(象皮病)-hydrogenases C1微生物。氢化酶是酶催化的可逆氧化氢和氢用于生产、可再生的能源。竞争与现有化学制氢方法,氢化酶需要重要的制氢率(卡纳和Lindblad, 2015)。此外,氢生产氢化酶最高也是最氧气敏感,这些微生物工厂内降低他们的效率。详细的驱动因素研究制氢和氧敏感性有促进工程策略来克服这个问题Wittkamp et al ., 2018)。更具体地说,调查硒代半胱氨酸的作用在这些关键过程(Sec)小说发展的氢化酶增加了工业用途的适用性(品牌et al ., 2017;埃文斯et al ., 2021)。
秒,同族体半胱氨酸(半胱氨酸),存在于redox-associated酶跨所有域的生活(李et al ., 2014)。用一个硫硒替换与半胱氨酸相比,证券交易委员会保留化学相似,但是增强的化学性质(即。,增加亲核性,减少侧链pK,增加氧化通常是可逆的)(钟,Krahn 2022)。这种氨基酸的明显特征及其半胱氨酸的相似性表明它是可能影响活性部位的电子性质,催化速率,或氧氢化酶的敏感性(Hondal et al ., 2013;品牌et al ., 2017;埃文斯et al ., 2021)。
自然发生在细菌中,Sec在蛋白质在佐治亚大学注册密码子,立即先于发夹环(称为Sec插入序列(seci)元素)mRNA的翻译地区。生物合成的交会tRNA上发生证券交易委员会,第一次与丝氨酸(Ser) aminoacylated seryl-tRNA合成酶(SerRS),然后转换为秒的硒代半胱氨酸合成酶(塞拉)(傅et al ., 2018)。塞拉使用selenophosphate作为底物转化,由selenophosphate合成酶(SelD) (股票和洛特,2009)。结果Sec-tRNA证券交易委员会是被一个专业延伸因子(SelB)肽伸长的核糖体。SelB像规范化EF-Tu伸长因素,但与seci交互元素(c端扩展股票和洛特,2009)。这个复杂和高度管制路径插入秒(图1 a, B硒蛋白生产(重组)一直是一个障碍傅et al ., 2018)。
图1。硒代半胱氨酸(Sec) tRNA结构促进翻译和插入的秒。(一)大肠杆菌(电子商务)tRNA证券交易委员会二级结构强调了促进其自然生物合成和插入的功能多肽链。长变量的胳膊,G73鉴别器基础(深蓝色)认可电子商务seryl-tRNA合成酶(SerRS)首次与Ser氨酰化。Ser转换成秒发生电子商务硒代半胱氨酸合成酶(塞拉)认识到D-arm和(8/5)受体域(蒂尔)。这13个英国石油(bp)受体域是tRNA的歧视证券交易委员会从规范转运rna由专门的伸长,使识别因子,电子商务SelB(栗色),插入到核糖体。(B)电子商务SelB也承认一个信使rna发夹(秒插入序列(seci)元素]立即下游的佐治亚大学密码子插入秒。使用硒蛋白的降解释放证交会的基质电子商务Sec裂合酶(进而),将氨基酸转化为丙氨酸(Ala)和释放硒(Se)。Se然后转换成selenophosphate (SeP) selenophosphate合成酶(SelD)重新进入生物合成路径。(C)allo-tRNAUTu1二级结构突出的特性,促进一个更简单的生物合成和插入路径交会的细菌。长变量的胳膊,G73鉴别器基础(深蓝色)认可电子商务SerRS而D-arm和(9/3)受体域(蒂尔)是公认的气单胞菌属salmonicida(作为塞拉。伸长的allo-tRNAUTu1Sec和插入到多肽链发生电子商务EF-Tu(栗色),不需要严格的seci元素。(D)pSecUAG-Evol质粒港口额外的酶,重组表达(下划线)促进秒插入在这个简化的路径。硒蛋白降解,包括额外的梅毒denticola(道明)Trx1释放交会重组和内源性进而转化为阿拉巴马州。增加Se转换成9月,作为SelD和电子商务SelD。
从这个角度看,我们讨论的细节秒插入的一项新兴技术大肠杆菌和它如何能适应细胞工厂。我们专注于这些细胞工厂申请制氢,突出最近的证据证交会的小说性质氢化酶。
2工程图示SECIS-independent硒代半胱氨酸插入
复杂的生物合成,推动了Sec的tRNA证券交易委员会结构,其主要区别因素作为一个13 bp受体域(受体茎和T-stem结合)。这可以促进承认SelB和减少EF-Tu绑定也有利于规范化7/5 tRNA结构(12 bp受体域)(Krahn et al ., 2020)。SelB还需要识别的seci元素,以方便插入秒。这种交互控制交会的位置在一个蛋白质,但是它限制了这些蛋白质或使小说硒蛋白过表达的能力(程和阿恩,2017年)。因此,为了消除这些限制,这是假设tRNA可以改造biosynthesize交会但被插入在核糖体EF-Tu (Aldag et al ., 2013;米勒et al ., 2015;你的et al ., 2015)。tRNA上利用先验知识证券交易委员会元素需要与每个蛋白质在这个通路(Krahn et al ., 2020),一个可以在战略上工程师的tRNA SECIS-independent秒插入。
allo-tRNAs的发现,小说一群转运rna二级结构(向井亚纪et al ., 2017),为工程提供了脚手架tRNA插入秒以EF-Tu依赖的方式。Allo-tRNAs发现有12个bp在9/3或8/4受体域配置,与配置规范图示(7/5图1 c)。这备用安排承兑人干和T-stem似乎并不限制其绑定EF-Tu (向井亚纪et al ., 2017),也不影响受体抑制和反密码子之间的距离(角色et al ., 2022)。反密码子不是识别元素任何Sec生物合成的相关酶(Krahn et al ., 2020),因此它可以操纵readthrough UAG密码子的交会除了其自然抑制佐治亚大学密码子(向井亚纪et al ., 2017;向井亚纪et al ., 2018)。此外,一些allo-tRNAs tRNA相似的功能证券交易委员会,即G73鉴别器基础,D-arm长变量的手臂,独一无二的。前两个特征是SerRS识别所需关键标识元素,而后者被塞拉(图1 c)(Krahn et al ., 2020)。由于这些原因,allo-tRNAs成为tRNA的骨干工程重新在Sec翻译路径(图1 d)(向井亚纪et al ., 2018)。
自证实可以有效地识别allo-tRNAs EF-Tu (向井亚纪et al ., 2017),它必须确保只有秒会插入到蛋白质。不像SelB优先识别Sec-tRNA Ser-tRNA (Leibundgut et al ., 2005),EF-Tu只需要一种氨基酸的存在tRNA (施克拉德et al ., 2011)。因此,塞拉和tRNA仔细调查证券交易委员会交互需要促进Ser秒转换。除了D-arm,大肠杆菌塞拉也认识到13 bp受体tRNA的领域证券交易委员会(Krahn et al ., 2020)。促进与allo-tRNAs互动,气单胞菌属salmonicida(作为),的近亲大肠杆菌被发现有12个基点塞拉酶能够识别受体域图示。这个重大变化适应证交会allo-tRNAs转换,进一步提高了工程的D-arm allo-tRNAs类似于作为tRNA证券交易委员会(图1 c)(向井亚纪et al ., 2018)。
allo-tRNAs的独特9/3结构促进交会EF-Tu生物合成和识别,但没有提供任何证据,如何接受的核糖体。结构分析和单分子翻译研究显示,9/3受体域不会干扰翻译。相反,它是影响变量的刚性臂易位的allo-tRNA A - p区域的核糖体。单点突变干扰tRNA的三级互动在中央循环变量的手臂的灵活性增加促进秒插入(角色et al ., 2022)。
战略工程allo-tRNAs EF-Tu依赖翻译导致改善Sec公司相比,图示设计tRNA的混合证券交易委员会和tRNA爵士(Aldag et al ., 2013;米勒et al ., 2015;你的et al ., 2015)。allo-tRNAs的结构解耦秒翻译从SECIS-element SelB和同样促进秒插入任何位置的蛋白质(向井亚纪et al ., 2018)。多功能性网站插入交会和增强的化学性质由这种氨基酸使其吸引力C1微生物工厂使用。
2.1适应秒翻译在细菌细胞系统
allo-tRNAs在细菌细胞的表达系统是通过质粒介导的,特别是pSecUAG-Evol质粒系列(向井亚纪et al ., 2018;钟et al ., 2021)。pSecUAG-Evol包含一个allo-tRNA基因促进剂araC下加上其他蛋白基因已被发现提高交会插入:我)作为塞拉促进Ser allo-tRNAs秒转换,(二)作为SelD iii)梅毒denticola(道明)Trx1和iv)突变体大肠杆菌Sec裂合酶(SufS_C364A)增加可用的硒。质粒,只需要两个内生组件从主机:i)首次Ser SerRS氨酰化和ii) EF-Tu促进伸长的核糖体。从内部表示大肠杆菌SelD路径,进而不必不可少的但可以帮助表达的重组蛋白(作为SelD和电子商务SufS_C364A)促进秒插入(图1 d)。
使用allo-tRNAs秒插入的有效性大肠杆菌表明他们也可以适应在细菌细胞工厂。这些工厂可以从属组成的有机体梭状芽胞杆菌(刘et al ., 2016)。例如,代谢工程autoethanogenum梭状芽胞杆菌是用于提高生产乙醇的固碳作用(刘et al ., 2017)。c . autoethanogenum,就像大肠杆菌包含交会的机械公司,所看到的硒的存在含甲酸脱氢酶(Abubackar et al ., 2015)。因此,使用的一些蛋白质内源秒插入也可以协助重组表达。此外,> 70% EF-Tu和SerRS的同源性c . autoethanogenum相比大肠杆菌表明allo-tRNAs可以serylated,认出这些生物体的伸长。
可比机械表明pSecUAG-Evol质粒系统中使用大肠杆菌可以很好的修改使用c . autoethanogenum。优化的要求或更换作为SelD,道明Trx1和电子商务SufS_C364A促进Sec可能需要插入。这三种蛋白被添加到增加可用的硒在没有诱导细胞的细胞毒性从额外补充硒(向井亚纪et al ., 2018)。密码子使用情况大肠杆菌和梭状芽胞杆菌种类也不同。因此,为了优化从pSecUAG-Evol蛋白表达质粒,密码子优化这些信使rna序列将更为可取。作为被观察到大肠杆菌,这些额外的蛋白质的表达水平可以繁重的有机体,因此不应该假定最大最佳的表达水平(向井亚纪et al ., 2018)。
另一个重要的考虑这个系统适应细菌细胞工厂时,是硒的浓度和形式捐助。一些生物容忍不同浓度的亚硒酸钠(硒捐赠中使用大肠杆菌)之前,抑制经济增长。然而,其他的硒源,如硒代蛋氨酸还可以使用,可能是更可取的生物(许多Larras-Regard, 2000)。
3氢化酶作为硒代半胱氨酸的目标公司
发现跨不同的微生物,氢化酶是一类酶进行氢代谢的基本功能(Vignais Billoud, 2007;Calusinska et al ., 2010;Peters等人。,2015年;绿化et al ., 2016)。两个主要类别的氢化酶命名根据活性部位的金属中心,(镍铁),(象皮病)-hydrogenases催化的可逆氧化H2气体从电子和质子(2 h++ 2 e−⇆H2)(图2)(Lubitz et al ., 2014)。的一个子集(镍铁)-hydrogenases NiFeSe氢化酶,包含秒代替活性部位中的半胱氨酸配体(Garcin et al ., 1999;品牌et al ., 2010;Volbeda et al ., 2013)。Fe-hydrogenases第三类氢化酶,含有mono-nuclear铁活性部位并激活H2在衬底methylenetetrahydromethanopterin的存在(日本岛et al ., 2008)。由于(镍铁)的能力,(象皮病)-hydrogenases实现高反应率在环境条件下,这些酶和各自的活性位点结构作为仿生设计模型和仿生催化剂(西蒙斯et al ., 2014;Schilter et al ., 2016;Dutta et al ., 2018;Kleinhaus et al ., 2021)。
图2。剖视的观点(一)(镍铁)氢化酶的活性部位Hyd-1大肠杆菌(PDB: 4月5日),(B)(NiFeSe)氢化酶的活性部位脱磷孤菌属寻常的Hildenborough (PDB: 5 jsk),(C)H-cluster的CpI(象皮病)氢化酶的活性部位pasteurianum梭状芽胞杆菌(PDB: 3 c8y)。着色方案:C,白色;啊,红色;N,蓝色;年代,黄橙色;Se,橙色;倪,绿色;铁、生锈。
的催化活化H2是可逆的,(镍铁)和(象皮病)-hydrogenases经常显示一个催化偏见所反映dis-proportionate H反应率吗2氧化和演化方向(穆德et al ., 2021)。这凸显了酶在H函数2新陈代谢,使它们可再生H的理想目标2生产和存储技术通过耦合到其他还原或氧化反应(Schuchmann et al ., 2018)。通过例子,电子产生的H2来自(象皮病)氢化酶的氧化反应可以耦合到还原过程,如有限公司2降低甲酸(Schuchmann和穆勒,2013)。相反,H2进化的反应往往是耦合的氧化等移动电子载体铁氧还蛋白或NADPH在厌氧发酵。绿藻和蓝藻细菌类型氢化酶发挥重要作用在光合H2生产,通过耦合电子水分解反应产生的H2进化(Akhlaghi Najafpour-Darzi, 2020;Kosourov et al ., 2021)。
3.1[镍铁]和[NiFeSe] -hydrogenases
(镍铁)-hydrogenases含有镍和铁金属的活性部位连接起来的半胱氨酸残基(图2一个)(Volbeda et al ., 1995;Shafaat et al ., 2013;Lubitz et al ., 2014;Peters等人。,2015年;Ogata et al ., 2016)。倪的活性部位是由四个半胱氨酸配体:协调两个桥接半胱氨酸硫醇盐配体连接的镍铁和两个终端半胱氨酸硫醇盐配体是位于倪。此外,铁是由两个CN协调−分子和CO分子之一。(NiFeSe) -hydrogenases共享一个相似的活性部位(图2 b),而其中一个半胱氨酸配体是秒。附近non-coordinating守恒的残留蛋白质支架扮演重要角色的调优的活性部位可逆的H2氧化反应通过氢键相互作用(布鲁克et al ., 2017)。守恒的Asp和Arg残留物发现远端有效H桥接半胱氨酸配体是必要的2氧化(埃文斯et al ., 2016;Vansuch et al ., 2020),而一个守恒的Glu残渣毗邻终端半胱氨酸作为通用质子门到活动网站(Dementin et al ., 2004;埃文斯et al ., 2018)。活性部位以外的环境中,存在菲斯集群允许远程传输的电子。O2宽容(镍铁)-hydrogenases(组1 d)包含一个独特的近端[4 fe-3s] 6-Cys结扎集群与活跃的网站,可以减少O2水,防止失去催化活性(弗里奇et al ., 2011;戈里et al ., 2011;Shomura et al ., 2011)。另一方面,O2敏感(镍铁)-hydrogenases没有所有6个半胱氨酸残基在这菲斯集群,已建议引起O2灵敏。[NiFeSe] -hydrogenases(组1)据报道,高生产H的活动2同时为H(镍铁)-hydrogenases通常是有偏见的2氧化(帕金et al ., 2008)。
(镍铁)-hydrogenases失去大部分的催化活性的O2。在一些镍铁-hydrogenases他们一旦O恢复活动2消散,但有些需要质子还原之前再次活跃起来(Shafaat et al ., 2013;Ogata et al ., 2016)。这些酶氧化氢的能力2在氧气的存在(尽管下级)被认为是O2宽容。(镍铁)的催化机制-hydrogenases已经被充分研究过的用于生物技术的应用,然而在有氧环境中工作的要求减少这一努力的可行性。
当我们开始理解[NiFeSe] -hydrogenases交会的角色,可能会有办法解开O2灵敏度的障碍。最初的研究自然NiFeSe氢化酶,研究的影响证券交易委员会对其活动和半胱氨酸替换O2宽容。半胱氨酸的存在而不是Sec在活性位点减少Ni公司,H2生产活动,O2宽容的酶(品牌et al ., 2017)。在相反的研究中,影响半胱氨酸的交会替换自然(镍铁)研究了氢化酶(埃文斯et al ., 2021)。不管Sec替换的位置在活动网站,H2氧化活性降低,没有H2生产活动是观察。另一方面,用一秒残留物一样观察是什么在自然NiFeSe -hydrogenases,显著增加了O2公差(埃文斯et al ., 2021)。
这些组合的结果表明,Sec在活性位点的存在并不是唯一的因素影响转向H2生产活动。而催化活性部位的周边环境也会影响的能力(镍铁)-hydrogenases氧化或生产H2。然而,令人信服的证据表明硒的存在增加O2宽容。这是对一个可能期望鉴于硒很容易氧化。虽然这是真的,看来可逆性和缓解减少硒氧化物相比,硫氧化物扮演了一个角色在这个效果(Maroney Hondal, 2018)。一个建议是,硒原子充当诱饵,优先被氧化,因此避免氧化和失活(镍铁)活跃的站点。进一步调查这个化学行为的细节仍然需要被发现。传达这两个重要的细节,NiFeSe -hydrogenases可以解决对氧化失活问题,和一个有前途的C1微生物的增长目标。
3.2(象皮病)-hydrogenases
第二个主要组氢化酶,(象皮病)-hydrogenases,包含一个复杂metallocofactor活性部位称为H-cluster和已知非常活跃在H2生产(Lubitz et al ., 2014;Peters等人。,2015年)。半胱氨酸的结扎的H-cluster由[4 fe-4s]集群([4 fe-4s]H)和双核的铁网站([2菲)H)(图2 c)(Peters等人。,1998年;Nicolet et al ., 1999)。这两个中心是通过半胱氨酸桥接和电子与硫醇盐配体是唯一的共价附着点(2菲)H蛋白质支架(Popescu Munck, 1999)。这不同于结构的镍铁氢化酶的活性位点,其中包含多个桥接半胱氨酸配体连接支架的蛋白质的活性部位。类似于镍铁氢化酶的活性位点,生物学上独特的公司和CN−配体的铁原子坐标(2菲)H除了一个过渡性azadithiolate配体(Silakov et al ., 2007;伯格伦et al ., 2013;Esselborn et al ., 2013)。后者起着重要的作用在H2激活。桥头堡胺可以作为催化基础(风扇和大厅,2001)H+远端铁原子的结合位点(2菲)H,提供一个关键交互点守恒的质子转移途径,终止与半胱氨酸H-bonding距离内的配体(Ginovska-Pangovska et al ., 2014;段et al ., 2018;Kisgeropoulos et al ., 2022)。无数定点诱变研究已经证明的重要性H-cluster的周围的蛋白质支架优化其电子性能和催化活性(温克勒et al ., 2013;脱et al ., 2022)。类似于镍铁-hydrogenases,长期潜在的对催化的影响可以通过额外的菲斯集群的存在,在电子转换函数(希腊et al ., 2011;Rodriguez-Macia et al ., 2017;污染et al ., 2018)。这是出现在不同的子组(象皮病)通过ferredoxin-like -hydrogenases绑定域modular-like的方式(穆德et al ., 2011)。
已经尝试引入外源氢化酶蓝藻可以对内生,双向Hox(镍铁)-hydrogenase或操作工程菌株缺乏Hox和其他内生吸收[镍铁]-hydrogenases (Ducat et al ., 2011;Gartner et al ., 2012;卡纳和Lindblad, 2015;Avilan et al ., 2018;Kosourov et al ., 2021)。成功找到了表达的(象皮病)氢化酶的能量要求固氮acetobutylicum梭状芽胞杆菌在non-nitrogen-fixing聚球藻属elongatussp。7942 (Ducat et al ., 2011)。而不需要使用能源来自太阳的固氮作用,阳光H2转换是增加。对这些类型的方法的一个重大挑战是极端啊2(象皮病)-hydrogenases的敏感性。虽然某些(象皮病)-hydrogenases如人beijerinckii梭状芽胞杆菌(CbA5H)是新兴的具有独特O2敏感属性(猜拳et al ., 2016;科里根et al ., 2020;温克勒et al ., 2021;猜拳,2022),大多数的特点(象皮病)-hydrogenases由O不可逆转地灭活2。因此,生物生产必须是一个微妙的过程,以确保(象皮病)-hydrogenases不抑制O2从依赖光反应。这通常是接洽有规律的有氧生长的蓝藻产生的内部存储的还原剂转移到一个厌氧大气光系统III(失活),促进氢化酶活动(Ducat et al ., 2011)。
这些努力展示的潜力增加H2生产水平(象皮病)-hydrogenases,虽然H的更深层次的理解2在蓝细菌代谢是必要的(卡纳和Lindblad, 2015;Kosourov et al ., 2021)。重复出现的问题是,蓝藻都无法继续依赖光反应和(象皮病)氢化酶活动在同一时间。考虑到卓越的O2宽容了Sec替代活性部位的镍铁氢化酶,有潜在应用交会的活性位点插入-hydrogenases象皮病。相关研究看着H-cluster金属硫化硒替换的位置的网站(诺斯et al ., 2016;Kertess et al ., 2017)。这是通过semi-artificial重建过程成为可能,实现一个积极的(象皮病)氢化酶的合成(2菲)H集群{[菲2(原理图2NHCH2(有限公司)4(CN)2]2−}的apo-form酶只包含[4 fe-4s]H(伯格伦et al ., 2013;Esselborn et al ., 2013)。为一个含有硒硒导数H-cluster硫醇盐azadithiolate配体(双曲正割位置2NHCH2Se),在催化倾向H略有增加2观察进化,然而这是伴随着减少O2稳定相比,本机酶(Kertess et al ., 2017)。另一个包含硒在硒导数H-cluster [4 fe-4s]H硫化位置([4 fe-4se]H)显示相似的催化率H2进化比原生酶(诺斯et al ., 2016)。
4前景
我们强调了一个新兴的重组技术特定站点秒插入使用小说在一个特别设计的质粒allo-tRNAs蛋白质。此外,我们表明在氢化酶中的应用,强调该系统的可转让性微生物细胞工厂。Sec的独特的化学性质使其合并有利于工程与增加或调整了催化活性和氢化酶,可能更困难,O2宽容。
证据到目前为止已调查了活性部位的交会,然而其他守恒的结构如菲斯集群在电子转换函数也可以调节中扮演至关重要的角色对氧化损伤的耐受性。对于某些类型的一个例子(镍铁)-hydrogenases带来极端啊2宽容,是一个独特的[4 fe-3s]的存在集群近端包含6守恒的半胱氨酸残基的活性部位(Dementin et al ., 2004;埃文斯et al ., 2018)。O2宽容是失去了在两个半胱氨酸g突变和增长的生物高O2浓度是影响(戈里et al ., 2011)。尽管趋势已经代替秒半胱氨酸的活性部位,这表明其他集群菲斯电子转换中心广泛存在在不同(镍铁),(象皮病)-hydrogenases也可能是合适的目标。
虽然我们强调交会的替代氢化酶和使用H2生产、独特的化学性质交会时可以利用任何蛋白质工程微生物细胞工厂。具体来说,提高催化性能使用半胱氨酸酶的活性部位是在列表的顶部。
数据可用性声明
最初的贡献提出了研究中都包含在本文/辅料,可以针对相应的作者进一步询问。
作者的贡献
美联社,DM和NK写的手稿。NK概念化的主意。NK和DS编辑了手稿。
资金
这项工作是由国家支持的综合医学科学研究所(R35GM122560-05S1 DS)和美国能源部办公室的基本能源科学(DE-FG0298ER2031 DS)。氢化酶,研究DM由基金支持从美国能源部办公室基本能源科学、化学科学分工,地球科学和生物科学、光合系统程序。这部分工作是撰写可持续能源联盟,经理和运营商LLC国家可再生能源实验室的美国能源部(DOE)号合同下。DE-AC36-08GO28308。美国政府保留和出版商,接受这篇文章发表,承认美国政府保留的非专有的、已付的,不可撤销的,全球发布或复制许可证发布的这项工作,或允许其他人这样做,美国政府的目的。
确认
我们想感谢弗雷泽阿姆斯特朗和埃文斯里安农至关重要的讨论。
的利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
出版商的注意
本文表达的所有索赔仅代表作者,不一定代表的附属组织,或出版商、编辑和审稿人。任何产品,可以评估在这篇文章中,或声称,可能是由其制造商,不保证或认可的出版商。
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关键词:硒代半胱氨酸、细胞工厂、生物燃料、allo-tRNA硒蛋白,C1微生物氢化酶,氢生产
引用:帕特尔,穆德DW, Soll后D和Krahn N(2022)利用硒代半胱氨酸增强微生物细胞工厂生产氢。前面。Catal。2:1089176。doi: 10.3389 / fctls.2022.1089176
收到:2022年11月07;接受:2022年12月13日;
发表:2022年12月22日。
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