%在香港,恩年轻% Lee Sun-Gu % Yun, Hyungdon %金,Byung-Gee % D J前沿催化2021% % % K C % F雷竞技rebat % G英语二硫桥,酶催化,大肠杆菌精氨酸脱羧酶,蛋白质设计,Site-saturation诱变% Q % 10.3389 R / W fctls.2021.774512 % % L % M % P % 7% 8 2021 - 11月23日% 9原始研究% # % !改善精氨酸脱羧酶的稳定性和活动% * % < % T提高稳定性和精氨酸脱羧酶的活性在碱性pH值的胍基丁胺% U //www.thespel.com/articles/10.3389/fctls.2021.774512 % V 1% 0期刊文章% @ 2673 - 7841 % X胍基丁胺,参与细胞的各种调节措施机制,是由精氨酸(Arg)通过脱羧反应使用精氨酸脱羧酶(EC雷竞技rebat 4.1.1.19 ADC)。使用野生型大肠杆菌的主要障碍ADC (ADC)胍基丁胺生产大幅活动损失和不稳定在碱性博士,为了克服这一问题,介绍了一个新的二硫键是理性decameric界面区域的酶。在突变体中生成,W16C / D43C增加热稳定性和活动。半衰期(T_1/2)W16C / D43C pH值8.0和60°C是560分钟,这是280倍的时间比野生型的,和特定的活动在pH值8.0还增加了2.1倍。Site-saturation诱变随后执行adc使用双硫键的活性位点残基突变(W16C / D43C)作为一个模板。最好的变体W16C / D43C I258A显示4.4倍提高催化效率与野生型相比。最后突变(W16C / D43C / I258A)已成功应用于体外合成的胍基丁胺提高产量和生产力(> 89.0%的收益率在5 h参数的基于100毫米)。