ChromEM-staining协议优化的心脏组织

Elettra Musolino ^{1 *},克里斯蒂娜Pagiatakis ^1、2,Federica Pierin ¹,丹尼尔·萨博迪诺 ³,乔凡娜Finzi ³,Rosalba Gornati ¹,乔凡尼Bernardini ¹和罗伯特·Papait ^{1、2 *}

• ¹苏布里亚大学的生物技术和生命科学,意大利
• ²意大利Humanitas研究医院
• ³分类Sette Laghi,意大利

三维(3 d)染色质组织有一个关键的角色在定义在开发过程中细胞的转录程序。其改变的原因是基因表达变化负责几种疾病。因此,我们需要新的工具来研究这方面的基因表达调控。为此,ChromEM最近开发了:这是一个电子显微镜染色技术,选择性是核DNA在不改变其结构,因此,允许更好的3 d可视化染色质构象。然而,尽管越来越频繁地应用细胞染色技术,它尚未应用到可视化染色质组织超微结构。在这里,我们提供一个协议执行ChromEM从左心室心肌组织收获C57BL / 6 j小鼠和使用这一结合透射电子显微镜(TEM)来衡量一些外围异染色质在心肌细胞的形态学参数。这个协议也可以使用,结合电子断层扫描,研究3 d在心肌细胞染色质组织心脏病理学的不同方面(例如,心脏的发展,心脏衰老,和心力衰竭)以及帮助设置ChromEM在其他组织。